Fattori di rischio per una maggiore infiammazione delle particelle di usura dell'artroplastica: analisi della produzione di citochine e dei polimorfismi

Verrà effettuata un'analisi del polimorfismo delle citochine in 100 individui con reazione di intolleranza all'impianto asettico (pazienti dell'ambulanza speciale per l'allergia all'impianto) e in 100 pazienti asintomatici con endoprotesi impiantate. Inoltre, vengono registrati dati clinici supplementari (come tipo di impianto, degenza ospedaliera, disagio), anamnesi basata su questionario e un punteggio clinico (punteggio WOMAC). Nell'analisi del sottogruppo in 10 pazienti di pazienti impiantati con reclami con polimorfismi citochinici trovati speciali e 10 pazienti impiantati senza problemi verrà valutata la risposta delle citochine alle particelle in vitro.

Parametri di prova:

1. collettivo totale:

   il DNA del campione di sangue criopreservato sarà isolato. Mediante reazione a catena della polimerasi, verranno analizzati quattro diversi polimorfismi noti, tre geni IL-1B (IL-1B-3954 IL-1B-31 e IL-1B-511) e un gene antagonista del recettore IL-1ß (IL-1 -RN, introne 2 VNTR). L'analisi molecolare comprende l'isolamento del DNA, le reazioni a catena della polimerasi (PCR) e l'elettroforesi su gel.

2. Analisi dei sottogruppi:

Le cellule del sangue periferico saranno isolate da 10 pazienti impiantati con complicanze e 10 persone senza sintomi e stimolate in coltura cellulare con stimoli di controllo, il lipopolisaccaride induttore di IL-1ß (LPS) e particelle di ceramica (BIOLOX delta)*, particelle di CoCrMo e XPE -particelle** coltivate separatamente o in combinazione. Verrà misurata la secrezione di IL-1ß e di citochine proinfiammatorie selezionate. I metodi includono l'isolamento delle cellule mediante centrifugazione della densità e l'analisi dei supernatanti della coltura cellulare mediante un test di misurazione delle citochine multiplex mediante citometria a flusso.

* Fornito CeramTec

** Generato ed elaborato dal gruppo di lavoro del partner di cooperazione Prof. R. Bader (Ospedale universitario Rostock) in un sistema di trasporto speciale per l'approccio di stimolazione della coltura cellulare