mTOR jako mediator w badaniu wrażliwości na insulinę

Próba A: Podczas próby A badany przybędzie do laboratorium badawczego i zje poranny posiłek o 6:30 rano. co odpowiada 5% dziennego zapotrzebowania energetycznego. Prosi się, aby osoba badana przyjechała samochodem lub transportem publicznym. W tym samym czasie pacjent przyjmuje 16 mg rapamycyny lub placebo (800 mg wapnia) w postaci pigułek. Po spożyciu badany odpoczywa przez 2 godziny iw tym czasie cewniki są wprowadzane do obu żył udowych, tętnicy udowej w jednej z nóg i do każdej żyły przedramienia (żył przedłokciowych) w celu późniejszego pobrania krwi i dożylnego wlewu insuliny, glukoza, stabilna D2-glukoza i stabilna 13C6-fenyloalanina. O godzinie 8:30 badani wykonają ćwiczenie wyprostu jednej nogi w kolanie przez 1 godzinę z intensywnością 80% maksymalnej wydolności. W tym protokole pracy wprowadzono 3 interwały trwające 5 minut, w których badany pracuje na 100% maksymalnej intensywności w celu zapewnienia pełnej aktywacji/rekrutacji wszystkich włókien mięśniowych. Bezpośrednio po zakończeniu ćwiczenia podaje się infuzję 13C6-fenyloalaniny w celu późniejszego określenia syntezy białek mięśniowych. Po 2 godzinach regeneracji po wysiłku podaje się D2-glukozę w celu późniejszego określenia produkcji glukozy w wątrobie. 4 godziny po zakończeniu ćwiczeń zostanie zainicjowana klamra hiperinsulinemiczna euglikemiczna na 2 godziny w celu określenia wychwytu glukozy przez mięśnie stymulowane insuliną. Biopsje mięśni z m. Mięsień obszerny boczny jednej lub obu nóg zostanie pobrany przed, bezpośrednio po, a także 2, 4 i 6 godzin po zakończeniu ćwiczeń. Płucny pobór tlenu jest mierzony za pomocą systemu online przed, w trakcie i po wysiłku fizycznym i służy do oznaczania metabolizmu substratów. Próbki krwi z żył udowych w obu nogach i tętnicy udowej w jednej z nóg są pobierane przed, w trakcie ćwiczeń i w okresie rekonwalescencji po wysiłku. W tym samym czasie mierzy się przepływ krwi w tętnicach udowych obu nóg techniką Dopplera. Wyznaczenie różnicy tętniczo-żylnej (różnicy AV) poprzez jednoczesny pomiar przepływu krwi umożliwia obliczenie wychwytu glukozy przez mięśnie szkieletowe oraz wychwytu/uwalniania odpowiednich substancji (białek, peptydów, metabolitów itp.). Część doświadczalna próby A kończy się o godzinie 15:30. Badany otrzyma jedzenie i picie oraz będzie obserwowany przez godzinę, zanim będzie mógł opuścić laboratorium badawcze.

Próba B jest identycznym protokołem, z wyjątkiem tego, że pacjent otrzyma przeciwny lek niż w próbie A (Rapamycyna lub placebo). Próba A i B zostaną oddzielone co najmniej 14 dniami.