Okołooperacyjne poziomy markerów glikokaliksu w osoczu w chirurgii jelita grubego.

TŁO: Śródbłonkowy glikokaliks (EG) jest złożoną warstwą makrocząsteczek, która wyścieła powierzchnię światła śródbłonka naczyniowego. Koncepcja ta została zaproponowana ponad 70 lat temu, a jej skład jest dobrze zbadany, co szczegółowo opisano w dwóch przeglądach (1, 2). Jednak jego rola w mechanizmach ochrony i uszkodzenia śródbłonka oraz jego późniejsze implikacje kliniczne stały się ostatnio oczywiste. EG składa się z różnych cząsteczek, w tym glikoprotein i proteoglikanów, które stanowią podstawę interakcji osocza z komórkami śródbłonka. Struktura EG, chociaż dobrze scharakteryzowana in vitro, jest słabo zdefiniowana in vivo, ponieważ jej skład zmienia się dynamicznie poprzez samoorganizację i zależną od ścinania enzymatyczną degradację lub odłączanie jej elementów. Jego głównymi składnikami są kwas hialuronowy, proteoglikany (PG), takie jak syndekan-1, glikoproteiny, białka osocza i glikozaminoglikany (GAG), których głównym składnikiem jest siarczan heparanu. EG jako całość tworzy śródbłonkową warstwę powierzchniową, która działa jako bariera dla krążących komórek i dużych cząsteczek. Dużą obietnicą prognostyczno-terapeutyczną jest pojawienie się EG jako kluczowego mediatora dysfunkcji śródbłonka w stanach patogennych, szczególnie w odniesieniu do przepuszczalności naczyń i powstawania obrzęków. Kilka badań wykazało rolę EG w równowadze osocza/płynu śródmiąższowego (3,4,5), mechano-transdukcji, która łączy ciśnienie wewnątrznaczyniowe i odpowiedzi komórek śródbłonka, tj. Sygnały biochemiczne, (6) w kaskadzie odpowiedzi zapalnej (7 ,8,9). Uszkodzenie EG wpływa na szereg ważnych funkcji komórek śródbłonka, prowadząc do upośledzenia mechanotransdukcji ze zmianami w przepływie płynów (6,10), aktywacją szlaków krzepnięcia (11), adhezją leukocytów (7,11) i płytek krwi (12) do powierzchni komórek śródbłonka oraz wyciek płynów i białek osocza do tkanki śródmiąższowej (13,14), powodując obrzęk tkanek (15). Specyficzne wyzwalacze patofizjologiczne, które prowadzą do uszkodzenia EG, są nadal aktywnie badane i pozostają słabo poznane. Niemniej jednak ochrona EG wydaje się być obiecującym celem w wielu scenariuszach klinicznych, zwłaszcza że jej degradacja jest ściśle związana z patofizjologią zapalenia, przeciekiem naczyń włosowatych i powstawaniem obrzęków w różnych urazach i stanach chorobowych; w tym niedokrwienie/reperfuzja, niedotlenienie, zapalenie, uraz, hiperwolemia, miażdżyca tętnic, cukrzyca i nadciśnienie (16). U pacjentek poddawanych poważnym zabiegom chirurgicznym w obrębie jamy brzusznej (w tym chirurgii przewodu pokarmowego, urologicznej, ginekologicznej lub innej) istnieje bardzo niewiele informacji na temat potencjalnego uszkodzenia śródbłonka w następstwie operacji (19). Istnieje kilka przeglądów, w których badano uszkodzenie EG u pacjentów z posocznicą pochodzenia medycznego i chirurgicznego (17, 18). Jednak w odniesieniu do chirurgii przewodu pokarmowego w obrębie jamy brzusznej, a w szczególności w chirurgii jelita grubego, przeprowadzono tylko jedno badanie, w którym jedynie 18 pacjentów poddano kolektomii (nie wspominając o patologiach) i włączono ich do innych pacjentów po dużych operacjach brzusznych trzustki, wątroby, ginekologii i urologii (19).

OCZEKIWANE WYNIKI: W niniejszej pracy oczekuje się, że u pacjentów operowanych w trybie planowym markery uszkodzenia glikokaliksu zwiększą swoje wartości w pooperacyjnych badaniach laboratoryjnych w porównaniu z wartościami wyjściowych (kontrolnych) badań laboratoryjnych. Oczekuje się również, że u pacjentów poddawanych zabiegom chirurgicznym w trybie pilnym, na ogół w stanach klinicznych okluzji, perforacji lub posocznicy, z aktywacją odpowiedzi zapalnej, odwodnieniem z obniżonym ciśnieniem onkotycznym i powstaniem obrzęku tkanek oraz trzeciej przestrzeni, markerami uszkodzenia glikokaliksu są podwyższona już w analizie wyjściowej, z utrzymaniem lub większym podwyższeniem jej wartości w okresie pooperacyjnym. Podobnie można by oczekiwać korelacji między markerami uszkodzenia glikokaliksu a innymi markerami zaangażowanymi w odpowiedź zapalną, takimi jak leukocyty, białko C-reaktywne, prokalcytonina i mleczan; jak również z towarzyszącymi chorobami pacjenta, które prowadzą do zwyrodnienia śródbłonka, takimi jak wysokie ciśnienie krwi, otyłość, cukrzyca, miażdżyca tętnic itp. Jeśli wyniki tego badania były zgodne z oczekiwaniami, markery uszkodzenia glikokaliksu (siarczan heparanu i syndekan-1) mogłyby być stosowane razem z innymi markerami stanu zapalnego (białko C-reaktywne, prokalcytonina itp.) i byłyby bardzo przydatne w obserwacji pooperacyjnej. pacjentów chirurgicznych, będąc w stanie przewidzieć możliwe powikłania pooperacyjne. Jeśli jednak w okresie okołooperacyjnym nie zaobserwowano podwyższenia poziomu markerów glikokaliksu, mogło to wynikać z braku liczby oznaczeń przebiegu w czasie; to znaczy, że nastąpiło podniesienie znaczników, ale nie wykrylibyśmy tego w czasach pomiaru; lub może być również potrzebna większa badana populacja. W obu przypadkach badanie mogłoby zostać zakończone w kolejnych projektach badawczych.

CELE:

Główne cele: Oszacowanie poziomów w osoczu 2 najbardziej reprezentatywnych markerów uszkodzenia glikokaliksu śródbłonka (siarczan heparanu i syndekan-1) u pacjentów poddawanych operacji jelita grubego w okresie okołooperacyjnym („przebieg czasowy”).

Cele drugorzędne:

• Analiza możliwej korelacji poziomów syndekanu-1 i siarczanu heparanu z innymi parametrami analitycznymi (białko C-reaktywne, prokalcytonina, mleczan, morfologia krwi, krzepnięcie i podstawowa biochemia).
• Analiza możliwej zależności markerów uszkodzenia glikokaliksu od różnych parametrów w zależności od pacjenta (wiek, płeć i choroby współistniejące) oraz interwencji chirurgicznej (czas operacji, droga dostępu, rodzaj operacji…).
• Analiza możliwego związku markerów uszkodzenia glikokaliksu śródbłonka z innymi parametrami klinicznymi, które mogą wskazywać na możliwe powikłanie pooperacyjne.

METODOLOGIA PROJEKTOWANIA: Jest to kliniczne, prospektywne, obserwacyjne i podłużne badanie grup jednoośrodkowych (Hospital Lluís Alcanyís, Xàtiva). Zawsze po zatwierdzeniu przez Komisję Etyki Badań danego Szpitala.

BADANA POPULACJA: Populacja badana (wartość n ) została obliczona na podstawie populacji 100 pacjentów, którzy będą poddani operacji przez około rok. Przy poziomie ufności 95% i marginesie błędu 5% obliczono wielkość próby 80 pacjentów. Wspomnianych 80 pacjentów będzie starszych niż wiek, mężczyzn i kobiet, przechodzących planową lub pilną operację jelita grubego (prawa hemikolektomia, rozszerzona prawa hemikolektomia, lewa hemikolektomia, sigmoidektomia, przednia resekcja odbytnicy lub amputacja brzuszno-kroczowa).

SELEKCJA PACJENTÓW I ŚWIADOMA ZGODA: Selekcja pacjentów i sporządzenie dokumentów dotyczących świadomej zgody zostanie przeprowadzone w uzasadniony sposób, zgodnie z artykułem 32 Deklaracji Helsińskiej i artykułem 58.2 Ustawy o badaniach biomedycznych. Należy to rozważyć biorąc pod uwagę Deklarację Helsińską Światowego Stowarzyszenia Lekarzy w jej ostatniej rewizji. I zgodnie z najnowszą wersją Deklaracji Helsińskiej z Fortalezy (Brazylia) z października 2013 r. Pacjenci zostaną włączeni do badania po przedoperacyjnym przyjęciu do szpitala, po zweryfikowaniu spełnienia kryteriów włączenia. Aby wziąć udział, wymagane będzie podpisanie świadomej zgody.