LiveSpo Navax® wspomaga leczenie ostrego zapalenia zatok przynosowych i zapalenia ucha środkowego

Ostre zapalenie zatok przynosowych (ARS) to zapalenie przewodów nosowych i wyściółki zatok spowodowane infekcją. Objawy kliniczne i oznaki ARS obejmują niedrożność/niedrożność/przekrwienie błony śluzowej nosa lub katar, kichanie, ból głowy, ból zatok (ból twarzy) i utratę węchu. Według statystyk w USA co roku odbywa się około 18-22 milionów wizyt ARS u lekarza, których koszt leczenia szacuje się na nawet 11 miliardów dolarów. Zapalenie błony śluzowej nosa i zatok przynosowych zdiagnozowano u 28,9 mln dorosłych, co stanowi 11,6% populacji. W 5-letnich statystykach Narodowego Szpitala Otorynolaryngologicznego w Wietnamie pacjenci z zapaleniem zatok przynosowych w wieku produkcyjnym od 16 do 50 lat stanowią 87%. Ostre zapalenie ucha środkowego (OZUŚ) to zapalenie błony śluzowej ucha środkowego, któremu towarzyszy wysięk do ucha środkowego w wyniku zakażenia, co może być związane z obecnością lub brakiem perforacji błony bębenkowej. Objawy OZUŚ obejmują gorączkę, ropną wydzielinę z przewodu słuchowego (wydzielinę z ucha lub wyciek z ucha), ból ucha (pocieranie lub ciągnięcie za płatek ucha, rzucanie się lub obracanie, trudności w zasypianiu lub płaczu), ból głowy i przejściową utratę słuchu (słaba reakcja na dźwięk). , wymioty lub biegunka. OZUŚ jest najczęstszą chorobą uszu dzieci i częstą przyczyną utraty słuchu. Około 90% dzieci w wieku poniżej dwóch lat miało przynajmniej jeden epizod, a około 80% dzieci w wieku przedszkolnym ma zapalenie ucha środkowego. Częstość występowania wynosi obecnie około 20% w wieku 2 lat i 8% w wieku 8 lat. Bakterie wywołujące ostre zapalenie błony śluzowej nosa i zatok przynosowych oraz ostre zapalenie ucha środkowego obejmują S. pneumoniae, H. influenzae, M. catarrhalis i S. aureus... Zapalenie zatok przynosowych i bakteryjne zapalenie ucha środkowego zwykle wymagają leczenia antybiotykami; jednakże niewłaściwa antybiotykoterapia zwiększy lekooporność i skutki uboczne, zwiększając w ten sposób koszty leczenia. W ostatnich latach w przekonujących badaniach wspomina się również o roli probiotyków w chorobach układu oddechowego. Jednak te produkty probiotyczne są głównie stosowane doustnie, a bardzo niewiele produktów jest przygotowywanych w postaci zawiesin w aerozolu do nosa. Tutaj badacze przeprowadzili badanie, które wykazało, że bezpośrednie rozpylanie probiotyków do nosa skutecznie wspomaga leczenie ostrego zapalenia zatok przynosowych i ostrego zapalenia ucha środkowego.

Celem było zbadanie efektów leczenia wspomagającego objawowego produktu probiotycznego LiveSpo Navax® w postaci płynnej zawiesiny zawierającej spory Bacillus bezpiecznych szczepów B. subtilis ANA4 i B. clausii ANA39 u dzieci i dorosłych z ARS oraz dzieci z ARS z towarzyszącym OZUŚ wywołany przez bakterie, badacze oceniają poprawę skuteczności objawowej LiveSpo Navax® u pacjentów; oraz pomiar zmian stężeń bakterii i głównych wskaźników cytokin w próbkach jamy nosowo-gardłowej i uszu przed i po 3 dniach lub 7 dniach przy użyciu LiveSpo Navax®.

Metody: Przeprowadzono randomizowane, ślepe, kontrolowane badanie kliniczne. Pacjenci lub rodzice pacjentów muszą podać następujące informacje: imię i nazwisko, płeć, wiek, adres… Po wyrażeniu świadomej zgody, 120 kwalifikujących się pacjentów zostaje podzielonych na 2 grupy (n = 60/grupę) obejmujące grupę ARS i ARS z towarzyszącym grupa AOM (ARS & AOM). 60 pacjentów z ARS zostanie losowo przydzielonych do dwóch podgrup (n = 30/podgrupę): grupa kontrolna — podgrupa z ostrym zapaleniem zatok przynosowych (zwana podgrupą kontrolną — ARS) stosuje roztwór soli fizjologicznej 0,9% NaCl oraz eksperymentalna podgrupa — podgrupa z ostrym zapaleniem zatok przynosowych (zwana Navax — ARS podgrupa) stosują probiotyki LiveSpo Navax®. I podobnie, 60 dzieci z ARS z towarzyszącym OZUŚ zostanie losowo przydzielonych do dwóch podgrup (n = 30/podgrupę): grupa kontrolna – ostre zapalenie błony śluzowej nosa i zatok z towarzyszącym ostrym zapaleniem ucha środkowego (nazwana grupą kontrolną – ARS i OZUŚ) stosuje sól fizjologiczną o stężeniu 0,9% NaCl oraz eksperymentalnej - ostre zapalenie błony śluzowej nosa i zatok z towarzyszącym ostrym zapaleniem ucha środkowego (nazywana grupą Navax - ARS & AOM) stosują probiotyki LiveSpo Navax®. Pacjent otrzymuje zakodowany spray w postaci ślepej próbki, aby zapewnić obiektywność badania. Po okresie obserwacji pacjenta, próbki z jamy nosowo-gardłowej zarówno z ARS, jak i ARS z grupami OZUŚ oraz próbki z ucha z ARS z grupą OZUŚ zostaną pobrane w dniu 0 i dniu 3 lub/i 7 w celu oceny potencjalnego zmniejszenia obciążenia bakteryjnego i modulację cytokin, IgA i obecność przetrwalników probiotycznych w próbkach z jamy nosowo-gardłowej i ucha pacjenta.

Reakcja łańcuchowa polimerazy w czasie rzeczywistym (PCR w czasie rzeczywistym) do wykrywania mikroorganizmów w próbkach jamy nosowo-gardłowej i uszu: półilościowe testy do pomiaru zmian stężeń bakterii są przeprowadzane zgodnie z rutynowym protokołem PCR w czasie rzeczywistym, który został znormalizowany przez Międzynarodową Organizację dla kryteriów Standaryzacji 5189:2012 (ISO 15189:2012) i stosowane w Narodowym Szpitalu Dziecięcym w Wietnamie. Wykrywanie B. subtilis ANA4 i B. clausii ANA39 przeprowadza się również metodą real-time PCR SYBR® Green (SYBR® Green to barwnik wiążący dsDNA), standaryzowaną rutynowo w Spobiotic Research Center, ANABIO R&D Ltd.

Testy ELISA dla poziomów cytokin: poziomy cytokin prozapalnych (pg/ml), w tym interleukiny (IL-6, IL-8) i TNF-alfa oraz immunoglobiny A (ng/ml) oznacza się ilościowo za pomocą testu immunoenzymatycznego zestawu (ELISA) zgodnie z instrukcjami producenta. Pacjenci są monitorowani pod kątem objawów ARS i OZUŚ w dniach 0, 3 i/lub 7, w zależności od stopnia przestrzegania przez pacjentów ambulatoryjnych badania kontrolnego. Lekarze obserwują stan zdrowia pacjenta, a informacje o swoich pacjentach są wprowadzane do dokumentacji medycznej. Podczas tego badania pacjenci proszeni są o powstrzymanie się od spożywania innych probiotyków, zarówno w postaci aerozolu do nosa, jak i podawania doustnego.

Zbieranie danych i analiza statystyczna: zbierana jest indywidualna dokumentacja medyczna, a informacje o pacjencie są zbierane i systematyzowane. Skuteczność preparatu LiveSpo Navax® ocenia się i porównuje z 0,9% roztworem chlorku sodu (NaCl) w soli fizjologicznej na podstawie następujących kryteriów klinicznych i subklinicznych uzyskanych w grupie Navax i grupie kontrolnej: (i) skuteczne działanie łagodzące objawy; (ii) poziomy redukcji (2^△Ct) stężeń bakterii.△Ct dla genów docelowych oblicza się jako Ct (cykl progowy testu PCR w czasie rzeczywistym) w dniu 3 i/lub 7 - Ct w dniu 0, podczas gdy Ct kontroli wewnętrznej jest dostosowywane tak, aby było równe dla wszystkich próbek; (iii) poziomy redukcji cytokin IL-6, IL-8 i TNF-alfa oraz IgA. Analizę tabelaryczną przeprowadza się na zmiennych dychotomicznych za pomocą testu χ2 lub dokładnego testu Fishera, gdy wartość oczekiwana dowolnej komórki jest mniejsza niż pięć. Zmienne ciągłe są porównywane przy użyciu testu Wilcoxona, testu t lub testu Manna-Whitneya, gdy dane nie mają rozkładu normalnego. Korelacje między zmiennymi ocenia się za pomocą analizy korelacji Spearmana. Analizy statystyczne i graficzne przeprowadzono na oprogramowaniu GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA). Poziom istotności wszystkich analiz ustalono na p < 0,05. Wartości P.