Testowanie wersji EnzySystem w wersji A pod kątem hemofilii A

Tło nauki:

Aby zmierzyć krzepliwość krwi, pobiera się krew z żyły. Krew ta jest przetwarzana w laboratorium, a następnie badana. Opracowano nowe urządzenie, które do wykonania badań laboratoryjnych wymaga jedynie bardzo małej objętości krwi (5–10 kropli krwi). Długoterminowym celem jest to, aby urządzenie to mogło być używane przez lekarza lub w domu do szybkiego pomiaru krzepliwości krwi. W tych badaniach chcemy porównać ten nowy system z metodami standardowymi – pomiarem w laboratorium – i ocenić, czy wyznaczona zostanie prawidłowa wartość.

Cel badania:

Głównym celem tego badania jest wykazanie, że EnzySystem HemA w wersji A może rejestrować wytwarzanie trombiny TG i określać ilościowo poziomy aktywności FVIII w przedziale czasowym 60 minut w świeżych próbkach pełnej krwi zdrowych ochotników i pacjentów z hemofilią A w laboratorium Enzyre ( dla zdrowych ochotników) i Radboudumc (dla pacjentów z hemofilią A).

Projekt badania:

Jest to przekrojowe badanie obserwacyjne. Przed pobraniem krwi wszyscy uczestnicy proszeni są o wypełnienie ankiety. Krew zdrowych ochotników będzie pobierana w biurze Enzyre BV, krew pacjentów będzie pobierana w Radboudumc. Pobieranie krwi metodą wenepunktury będzie przeprowadzane przez pielęgniarkę badawczą Radboudumc lub lekarza zespołu badawczego w obu lokalizacjach. W sumie zostaną pobrane cztery probówki z cytrynianem jako antykoagulantem (w sumie około 11 ml).

Badana populacja:

Badana populacja składa się z 20 zdrowych ochotników: równomiernie rozłożonych pomiędzy mężczyznami i kobietami; wiek waha się od 20 do 70 lat; zatrudniony przez Enzyre za pośrednictwem ogłoszenia. 20 pacjentów: 5 ciężka hemofilia A; 5 umiarkowana hemofilia A; 10 łagodna hemofilia A; rekrutowani z Centrum Leczenia Hemofilii (HTC) Nijmegen-Eindhoven-Maastricht (NEM) (lokalizacja Radboudumc).

Podstawowe parametry badania/wynik badania:

Wykazanie, że EnzySystem HemA w wersji A może rejestrować poziomy aktywności TG i ilościowego FVIII w przedziale czasowym 60 minut w świeżych próbkach krwi zdrowych ochotników i pacjentów chorych na hemofilię A.

Drugorzędne parametry badania/wynik badania (jeśli dotyczy):

Na drugorzędne parametry badania składa się to, czy zmierzone wartości odpowiadają pożądanej specyficzności i dokładności testu.

Wyniki analizuje się pod kątem równoważności w porównaniu z jednoetapowym testem FVIII, testem chromogennym FVIII, wytwarzaniem trombiny za pomocą testu hemostazy Nijmegen i ewentualnie za pomocą testu Technoclone.

Czy możliwy jest pomiar aktywności FVIII za pomocą EnzySystem HemA w wersji A w świeżych próbkach krwi zdrowych ochotników i pacjentów chorych na hemofilię A w porównaniu ze złotym standardem?

• Precyzja w normalnym zakresie (60-140%): min. 30%
• Precyzja w niskim zakresie (3-10%): min. 50%
• Granica zasięgu detekcji min. 100% aktywności FVIII
• Granica wykrywalności dolny zakres min. 3% aktywność FVIII Czy można zmierzyć TG za pomocą EnzySystem HemA wersja A w świeżych próbkach krwi zdrowych ochotników i pacjentów chorych na hemofilię A w porównaniu ze złotym standardem;
• Precyzja w normalnym zakresie (60-140%) próbek kontrolnych: min. 30%
• Precyzja u pacjenta z hemofilią A: min. 50%
• Granica wykrywalności, wysoki zakres > 400 nM aktywności trombiny
• Granica wykrywalności mierzona w osoczu, dolny zakres < 50 nM trombiny

Inne parametry badania Wszystkie próbki zostaną również zbadane pod kątem innych parametrów specyficznych dla hemostazy, ponieważ parametry te mogą wpływać na prawidłowy pomiar zarówno aktywności FVIII, jak i wytwarzania trombiny. Następujące parametry będą mierzone w osoczu uzyskanym z próżniowych pojemników na krew pełną. Co więcej, pozostałe próbki (osocze) zostaną ostatecznie wykorzystane do opracowania innych parametrów związanych z koagulacją.

• poziom antygenu czynnika von Willebranda
• Poziomy aktywności rystocetyny czynnika von Willebranda
• Poziomy fragmentu protrombiny 1+2
• Aktywność ADAMTS13
• Poziom antygenu FVIII
• Grupa krwi