Versietesten van EnzySystem versie A voor hemofilie A

Achtergrond van het onderzoek:

Om de bloedstolling te meten wordt bloed uit een ader afgenomen. Dit bloed wordt in het laboratorium verwerkt en vervolgens getest. Er is een nieuw apparaat ontwikkeld dat slechts een zeer klein volume bloed (5-10 druppels bloed) nodig heeft om de laboratoriumtests uit te voeren. Het doel op lange termijn is dat dit apparaat door een arts of thuis kan worden gebruikt om snel de bloedstolling te meten. In dit onderzoek willen we dit nieuwe systeem vergelijken met de standaardmethoden – meting in het laboratorium – en evalueren of de juiste waarde wordt bepaald.

Doel van de studie:

Het primaire doel van deze studie is om aan te tonen dat de EnzySystem HemA versie A trombinegeneratie TG kan registreren en FVIII-activiteitsniveaus kan kwantificeren binnen een tijdsbestek van 60 minuten in verse volbloedmonsters van gezonde vrijwilligers en patiënten met hemofilie A in het Enzyre-laboratorium ( voor gezonde vrijwilligers) en het Radboudumc (voor patiënten met hemofilie A).

Studieontwerp:

Dit is een cross-sectioneel observationeel onderzoek. Voorafgaand aan de bloedafname wordt aan alle deelnemers gevraagd een vragenlijst in te vullen. Het bloed van gezonde vrijwilligers wordt afgenomen in een kantoor van Enzyre BV, het bloed van patiënten wordt afgenomen in het Radboudumc. Bloedafname, middels venapunctie, wordt op beide locaties uitgevoerd door een onderzoeksverpleegkundige van het Radboudumc of arts van het onderzoeksteam. In totaal worden er vier bloedbuisjes met citraat als antistollingsmiddel afgenomen (in totaal circa 11 ml).

Studiepopulatie:

De onderzoekspopulatie bestaat uit 20 gezonde vrijwilligers: gelijkmatig verdeeld tussen mannen en vrouwen; leeftijden verspreid over het bereik van 20 tot 70 jaar; gerekruteerd door Enzyre via advertenties. 20 patiënten: 5 ernstige hemofilie A; 5 matige hemofilie A; 10 milde hemofilie A; geworven vanuit het Hemofilie Behandelcentrum (HTC) Nijmegen-Eindhoven-Maastricht (NEM) (locatie Radboudumc).

Primaire onderzoeksparameters/uitkomst van het onderzoek:

Demonstreren dat de EnzySystem HemA versie A TG- en kwantitatieve FVIII-activiteitsniveaus binnen een tijdsbestek van 60 minuten kan registreren in verse bloedmonsters van gezonde vrijwilligers en patiënten met hemofilie A.

Secundaire onderzoeksparameters/uitkomst van het onderzoek (indien van toepassing):

Secundaire onderzoeksparameters worden samengesteld of de gemeten waarden voldoen aan de gewenste testspecificiteit en nauwkeurigheid.

De uitkomsten worden geanalyseerd op gelijkwaardigheid vergeleken met de eenfasige FVIII-test, de FVIII-chromogene test, de vorming van trombine via de Nijmeegse Hemostase-test en mogelijk via de Technoclone-test.

Is het mogelijk om FVIII-activiteit te meten met de EnzySystem HemA versie A in verse bloedmonsters van gezonde vrijwilligers en patiënten met hemofilie A, vergeleken met de gouden standaard met;

• Precisie in het normale bereik (60-140%): min. 30%
• Precisie in het lage bereik (3-10%): min. 50%
• Limiet van detectiebereik min. 100% FVIII-activiteit
• Detectielimiet laag bereik min. 3% FVIII-activiteit Is het mogelijk om TG te meten met het EnzySystem HemA versie A in verse bloedmonsters van gezonde vrijwilligers en patiënten met hemofilie A, vergeleken met de gouden standaard met;
• Precisie in het normale bereik (60-140%) van controlemonsters: min. 30%
• Precisie bij patiënt met hemofilie A: min. 50%
• Detectielimiet, hoog bereik > 400 nM trombineactiviteit
• Detectielimiet gemeten met plasma, laag bereik < 50 nM trombine

Andere onderzoeksparameters Alle monsters zullen ook worden getest op andere hemostasespecifieke parameters, aangezien deze parameters een juiste meting van zowel FVIII-activiteit als trombinegeneratie kunnen beïnvloeden. De volgende parameters zullen worden gemeten in plasma verkregen uit de volbloed vacutainers. Bovendien zullen de overgebleven monsters (plasma) uiteindelijk worden gebruikt om andere stollingsgerelateerde parameters te ontwikkelen.

• von Willebrand Factor-antigeenniveaus
• von Willebrand Factor-activiteitsniveaus van ristocetine
• Protrombinefragment 1+2 niveaus
• ADAMTS13-activiteit
• FVIII-antigeenniveaus
• bloedgroep