Ocena żywotności przy użyciu mononukleotydu flawinowego (FMN) mierzonego w perfuzyjnej i żółci podczas normotermicznej perfuzji maszynowej

Identyfikacja w czasie rzeczywistym żywotności przeszczepu ma kluczowe znaczenie dla bezpiecznego rozszerzenia puli dawców. Różne strategie testowania żywotności w normotermicznej perfuzji maszynowej (NMP) zostały opisane przez grupy z Wielkiej Brytanii, Holandii, Austrii, Stanów Zjednoczonych i Szwajcarii. Ogólnie rzecz biorąc, strategie w NMP wykorzystują obserwacje kliniczne, warunki perfuzji, a także analizy płynu perfuzyjnego i żółci, w tym klirens mleczanów, pH, wykorzystanie/ponowne wychwyt glukozy i inne. Obecnie nie ma konsensusu co do parametrów żywotności lub określonych progów, choć klirens mleczanów i obserwacja kliniczna wydają się być obecnie najszerzej stosowanymi kryteriami.

Ocenę żywotności zgłaszano dla przeszczepów poddanych hipotermicznej utlenowanej perfuzji (HOPE), skupiając się głównie na mononukleotydzie flawinowym (FMN), markerze uszkodzenia mitochondriów pochodzącym z kompleksu mitochondrialnego 1. Wykazano, że FMN jest uwalniany do płynu perfuzyjnego podczas reoksygenacji wcześniej niedokrwionych tkanek i dobrze koreluje z powikłaniami po przeszczepie oraz przewiduje utratę przeszczepu po przekroczeniu pewnych progów stężenia FMN w płynie perfuzyjnym uzyskanych podczas HOPE. Doprowadziło to do poprawy w zakresie utraty przeszczepów i redukcji klinicznie istotnych nieanastomotycznych zwężeń (NAS) dzięki HOPE, pomimo użycia wątrob od dawców po śmierci krążeniowo-oddechowej (DCD) o rozszerzonych kryteriach (wiek dawcy do 100 lat, starzy dawcy, czas czynnego ciepłego niedokrwienia dawcy (fDWIT) >30 min, do 8 godzin statycznego przechowywania w zimnie przed HOPE, makrostłuszczenie) w Europie. Grupa dr. Schlegela niedawno zweryfikowała wcześniejsze progi w całym ośrodku i międzynarodowo, wielokrotnie wykazując korelację między stężeniem FMN w płynie perfuzyjnym a klinicznie istotnymi wynikami po przeszczepie wątroby (LT).

Nasza grupa zbadała przydatność stężenia FMN w płynie perfuzyjnym uzyskanego podczas NMP przy użyciu urządzenia OrganOx metra w przewidywaniu utraty przeszczepu i powikłań. Konkretnie, stwierdzamy, że FMN przewiduje NAS, ogólne powikłania i utratę przeszczepu po transplantacji. Być może najbardziej imponująco, stwierdzamy, że ilościowy pomiar FMN może przewidywać nie tylko binarne powikłania, ale także ich ciężkość w perfundowanych przeszczepach. Dodatkowo stwierdzamy, że typowe parametry, takie jak mleczany, glukoza i chemia żółci, słabo korelują z wynikami po przeszczepie.

Wreszcie, nasza grupa zweryfikowała FMN mierzone w żółci jako dodatkowe narzędzie identyfikujące uszkodzenie dróg żółciowych zarówno w sensie binarnym, jak i ilościowym, konkretnie przewidując powikłania żółciowe o różnej ciężkości klinicznej i potrzebie interwencji.

Jest to wieloośrodkowe obserwacyjne badanie walidacyjne. Szacujemy, że do potwierdzenia FMN jako markera żywotności podczas NMP potrzeba będzie 850 pacjentów w 10-15 ośrodkach badawczych. Około 250 pacjentów zostanie włączonych z Cleveland Clinic, zarówno retrospektywnie, jak i prospektywnie, od 22 października 2022 do 31 grudnia 2027.

- Głównym celem tego badania jest potwierdzenie i walidacja zdolności mononukleotydu flawinowego (FMN) jako markera przyszłej żywotności przeszczepu. Dążymy do zaangażowania w sumie 10 do 15 uczestniczących ośrodków, zarówno w USA, jak i w Wielkiej Brytanii, wykorzystujących normotermiczną perfuzję maszynową z powrotem do bazy z urządzeniem OrganOx metra.

Punkt końcowy pierwszorzędowy: Funkcjonalność przeszczepu do 1 roku po przeszczepie, mierzona przez stężenie FMN w płynie perfuzyjnym, stężenie FMN w żółci oraz korelację stężenia FMN w płynie perfuzyjnym + żółci z żywotnością przeszczepu (pierwotna niewydolność przeszczepu (PNF), nieanastomotyczne zwężenie (NAS), inne związane utraty przeszczepu – z cenzurą zgonów).

Punkty końcowe drugorzędne:

• Klinicznie istotne nieanastomotyczne zwężenia (NAS wymagające interwencji).
• Wszystkie powikłania żółciowe, w tym AS, NAS, przecieki żółci
• Klinicznie istotne NAS prowadzące do utraty przeszczepu
• Liczba interwencji wymaganych na NAS
• Powikłania według klasyfikacji Clavien-Dindo i kompleksowego wskaźnika powikłań (CCI)
• Pierwotna niewydolność przeszczepu (PNF), wczesna dysfunkcja alloprzeszczepu (EAD)
• Zakrzepica tętnicy wątrobowej (HAT) i inne powikłania naczyniowe
• Ostre uszkodzenie nerek (AKI), terapia nerkozastępcza (RRT)
• Odrzucanie komórkowe, liczba biopsji, liczba epizodów odrzucania i ich ciężkość
• Utrata przeszczepu, utrata przeszczepu z cenzurą zgonów, śmierć biorcy, czasy i przyczyny