Zmiany w jelitowych mocznicowych toksynach i metabolitach mikrobiomu pod wpływem suplementacji wielogatunkowym synbiotykiem u pacjentów hemodializowanych

Projekt badania i cele Niniejsze badanie to otwarte, jednoramienne badanie pilotażowe, mające na celu ocenę wpływu suplementacji wielogatunkowym synbiotykiem na metabolity mikroflory jelitowej, markery stanu zapalnego oraz jelitowe toksyny mocznicowe (GDUT) w ciągu 12 tygodni u dorosłych pacjentów hemodializowanych.

Populacja badania

• Kryteria włączenia: Dorośli w wieku 18 lat lub starsi, poddawani przewlekłej hemodializie przez co najmniej 3 miesiące

• Kryteria wykluczenia:

  1. Stosowanie suplementów probiotycznych w ciągu ostatniego miesiąca;
  2. Hospitalizacja w ciągu ostatniego miesiąca z powodu ostrych infekcji lub powikłań związanych z PChN;
  3. W wywiadzie poważne operacje jelitowe (gastrektomia, cholecystektomia; appendektomia dozwolona);
  4. Obecność wirusowego zapalenia wątroby, marskości wątroby, aktywnego nowotworu, zaawansowanej zastoinowej niewydolności serca lub zaburzeń tarczycy;
  5. Stosowanie antybiotyków lub terapii immunosupresyjnej w ciągu poprzednich trzech miesięcy.

Uzasadnienie liczebności próby To badanie pilotażowe obejmuje 30 uczestników, co zapewnia odpowiednią moc statystyczną (80%, alfa 0,05) do wykrycia średniej wielkości efektu (d Cohena = 0,6) dla pierwszorzędowego punktu końcowego, jakim jest stężenie siarczanu indoksylu w surowicy. Obliczenia oparte na oczekiwanych zmianach z 8,0 mg/l do 6,5 mg/l przy odchyleniu standardowym 2,5 mg/l wskazują na wymaganą liczebność próby ~24; przyjęta liczebność uwzględnia potencjalne wycofania, aby zapewnić rzetelność badania.

Procedury badania

• Oceny wyjściowe:
• Pobranie biochemicznych markerów surowicy,
• Pomiar toksyn mocznicowych w surowicy i moczu,
• Ilościowe oznaczenie metabolitów mikroflory.
• Interwencja:

Uczestnicy otrzymają wielogatunkowy synbiotyk Renobiome zawierający 30 miliardów CFU w kapsułce, w tym szczepy Lactobacillus rhamnosus (ID szczepu w trakcie ustalania), Lactobacillus salivarius LS 159, Lactobacillus pentosus LPE 588 i Lactococcus lactis LL 358.

• Dawkowanie: Jedna kapsułka dwa razy dziennie (rano i wieczorem), z posiłkiem lub bez, popijana wodą o temperaturze pokojowej.
• Przechowywanie: Kapsułki należy przechowywać w temperaturze poniżej 25°C, w suchym miejscu chronionym przed światłem.
• Obserwacja i monitorowanie:
• W 4. tygodniu: Monitorowanie i dokumentowanie objawów żołądkowo-jelitowych oraz zdarzeń niepożądanych.
• W 12. tygodniu: Powtórzenie ocen identycznych jak na początku badania, w tym badań krwi i moczu.

Przestrzeganie zaleceń i bezpieczeństwo

• Przestrzeganie zaleceń będzie śledzone poprzez regularne kontakty kontrolne.
• Za akceptowalny uznaje się wskaźnik przestrzegania zaleceń na poziomie 80-100%.
• Wszystkie niepożądane reakcje na lek i wszelkie nieoczekiwane zdarzenia będą rejestrowane przez cały czas trwania badania.

Pobieranie próbek biologicznych i metody laboratoryjne

• Pobieranie krwi:
• Próbki krwi na czczo będą pobierane po 8-godzinnym poście.
• Próbki będą wirowane przy 3000 obr./min przez 10 minut w ciągu 1 godziny od pobrania.
• Alikwoty surowicy (200 µL) będą przechowywane w temperaturze -80°C do analizy partiami.
• Pomiar biomarkerów:
• Przed analizą próbki będą rozmrażane w temperaturze pokojowej przez 20 minut.
• Ilościowe oznaczenie cytokin prozapalnych (IL-1, IL-6, TNF-α) przy użyciu zwalidowanych zestawów ELISA (Ziker Biological Technology Co., Ltd., Shenzhen, Chiny).
• Będzie przeprowadzany pomiar metabolitów mikroflory, takich jak krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe (SCFA, np. kwas masłowy), kwas indolomlekowy (ILA) i kwas indolopropionowy (IPA).
• Analiza toksyn mocznicowych:
• Stężenia siarczanu indoksylu (IS), siarczanu p-krezylu (PCS), kwasu indolooctowego (IAA) i kwasu indolomlekowego (ILA) w surowicy i moczu będą oznaczane za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej sprzężonej ze spektrometrią mas (HPLC-MS) zgodnie z ustalonymi protokołami.

Zagadnienia etyczne

• Od wszystkich uczestników zostanie uzyskana pisemna świadoma zgoda przed włączeniem do badania.
• Badanie będzie prowadzone zgodnie z wytycznymi tajwańskiej dobrej praktyki klinicznej (GCP), lokalnymi wymogami regulacyjnymi oraz Deklaracją Helsińską.
• Zatwierdzenie etyczne zostało udzielone przez Instytucjonalną Komisję Etyczną Szpitala Tungs' Taichung MetroHarbour.