Eficácia dos Probióticos Orais SALI-10 na Gengivite Experimental

A gengivite é uma condição de doença oral que afeta 50% a 90% dos adultos globalmente. A patologia da gengivite pode ser revertida através da redução ou remoção da placa microbiana que se acumula em tecidos duros e moles e é considerada o padrão de cuidados na indústria. A higiene oral regular em combinação com terapêuticas que proporcionam um benefício antimicrobiano pensa-se que mitigue o aparecimento da gengivite. No entanto, o teste de terapêuticas para benefício profilático para mitigar o desenvolvimento da gengivite não foi totalmente examinado.

O modelo clássico de gengivite experimental (GE) foi desenvolvido em 1965 por Loe e Silness, que demonstraram convincentemente a relação causal entre o acúmulo de placa dentária e o desenvolvimento de gengivite clinicamente evidente em adultos jovens saudáveis que se abstiveram de todas as práticas de higiene oral durante um período de 21 dias. Além disso, ao retomarem as práticas habituais de higiene oral, todos os sujeitos demonstraram um retorno à saúde gengival. Compreender como os participantes retornaram rapidamente à saúde gengival alinha-se com a compreensão atual de que o estado clinicamente saudável é um processo ativo e dinâmico.

Os neutrófilos, um tipo de glóbulo branco (leucócito), representam um componente-chave do sistema de defesa inato que protege o tecido periodontal tanto da gengivite como da periodontite. Não só são a primeira linha de defesa celular, como estão entre os leucócitos mais abundantes nos tecidos periodontais. A gengivite está associada a um aumento significativo no número de neutrófilos que migram para o tecido periodontal. Em contraste, indivíduos com poucos neutrófilos causados por deficiências congénitas no número ou trânsito de neutrófilos (LAD 1 e 2), ou aqueles com neutropenia induzida por indução química com agentes antimitóticos como a ciclofosfamida, invariavelmente desenvolvem periodontite. Da mesma forma, estudos em ratinhos knockout que são defeituosos no trânsito de neutrófilos também desenvolvem periodontite. Consistente com a contribuição chave dos neutrófilos tanto para a gengivite como para a periodontite, o trânsito de neutrófilos para o tecido gengival é altamente regulado. O periodonto contém mediadores de defesa do hospedeiro inato que facilitam o trânsito de neutrófilos do tecido gengival altamente vascularizado para o sulco gengival, onde formam uma "parede" entre o tecido do hospedeiro e o biofilme da placa dentária.

No entanto, a presença prolongada de neutrófilos no tecido gengival não é tolerada no estado saudável. A falha em desregular o trânsito de neutrófilos resulta num aumento do número de neutrófilos no tecido gengival e num aumento significativo da perda óssea periodontal. Portanto, a homing de neutrófilos para o sulco gengival é altamente regulada de modo que, em condições de saúde periodontal, a quantidade apropriada de neutrófilos está presente para manter o controlo do crescimento bacteriano da placa dentária e ainda não provocar danos teciduais. A avaliação de neutrófilos orais e sanguíneos durante a gengivite experimental mostrou que pessoas com resposta inflamatória excecionalmente alta têm uma resposta exagerada de neutrófilos polimorfonucleares tanto na cavidade oral como no sangue.

A gengivite é uma condição inflamatória reversível causada pelo acúmulo de placa dentária e pela perturbação associada da homeostase hospedeiro-microbiana. Durante a gengivite, a comunidade microbiana transita de ser dominada por bactérias gram-positivas associadas à saúde, como espécies de Streptococcus, para periopatógenos gram-negativos, incluindo espécies dos géneros Porphyromonas, Tannerella, Treponema e Prevotella. Esta mudança disbiótica desencadeia respostas inflamatórias, levando a danos teciduais e, em alguns casos, progressão para periodontite.

Um estudo recente sobre gengivite experimental humana identificou três fenótipos distintos de resposta do hospedeiro - respondedores altos, baixos e lentos - baseados em parâmetros clínicos, inflamatórios e microbianos:

Respondedores Altos: Acumulação rápida de placa acompanhada por um aumento significativo de periopatógenos gram-negativos e marcadores inflamatórios elevados, como interleucina-1β (IL-1β).

Respondedores Baixos: Acumulação de placa semelhante aos respondedores altos, mas inflamação mais baixa, sugerindo uma resposta do hospedeiro mais atenuada à disbiose bacteriana.

Respondedores Lentos: Acumulação de placa e sucessão microbiana atrasadas, com domínio prolongado de espécies de Streptococcus associadas à saúde e uma resposta inflamatória atrasada ou reduzida.

A análise microbiana revelou que a persistência de espécies benéficas de Streptococcus, como S. sanguinis e S. oralis, em respondedores lentos e baixos correlaciona-se com um efeito protetor contra o surgimento de periopatógenos e a cascata inflamatória associada. Por outro lado, a perda destas bactérias benéficas em respondedores altos foi associada a inflamação mais grave, destacando o papel crítico do microbioma oral na modulação da gravidade da gengivite.

As salivaricinas lantibióticas são péptidos policíclicos contendo resíduos de lantionina e/ou β-metillantionina que são produzidos por certas estirpes de Streptococcus salivarius, que residem quase exclusivamente na cavidade oral humana. Estas moléculas são notáveis pela sua atividade antimicrobiana contra patógenos orais relevantes, apoiando o desenvolvimento de estirpes probióticas produtoras de salivaricina. As salivaricinas também são relevantes para o desenvolvimento de novas terapias antibacterianas no contexto da resistência emergente aos antibióticos. Trabalhos anteriores mostraram as características bacteriocinas e de segurança de estirpes de S. salivarius isoladas de sujeitos saudáveis, demonstrando o seu potencial para uso como probióticos.

Solução Proposta: S. salivarius SALI-10

Os investigadores propõem o uso de uma nova estirpe, Streptococcus salivarius SALI-10, como uma intervenção microbiana direcionada para modular o microbioma oral e prevenir a gengivite. Hipótese-se que S. salivarius SALI-10:

• Mantenha uma população estável de estreptococos benéficos durante a acumulação de placa.
• Iniba o crescimento de periopatógenos através de competição microbiana e produção de Salivaricina 10.
• Atrase ou suprima a mudança disbiótica para dominância gram-negativa, reduzindo assim a resposta inflamatória.

Ao apoiar a homeostase microbiana, SALI-10 pode emular a resiliência observada em respondedores lentos e oferecer uma nova estratégia para a prevenção da gengivite.

Regime de Dosagem

Este é um estudo controlado por placebo. Cada participante randomizado para o grupo de intervenção receberá pastilhas SALI-10 com sabor a menta. Tomarão uma pastilha duas vezes ao dia - de manhã e à noite - após a escovagem, deixando-a dissolver na boca. Os participantes usarão as pastilhas do estudo durante todo o estudo.

Triagem Pré-estudo e Avaliação de Linha de Base Telefónica Pré-Triagem

Potenciais participantes do estudo que expressem interesse serão contactados por telefone. A elegibilidade para triagem será avaliada usando perguntas de recrutamento padrão.

Triagem Pessoal

Antes dos procedimentos de triagem ocorrerem, os participantes fornecerão consentimento informado. Os participantes preencherão informações demográficas e de saúde e passarão por um exame oral de tecidos moles e duros. Participantes do sexo feminino passarão por um teste de gravidez na urina. A triagem continua até sessenta (60) participantes serem inscritos.

Visita 1 - Avaliação de Linha de Base

Os participantes passarão por um exame oral incluindo profundidade de sondagem (PS), nível de inserção (NI), índice de placa visível (IPV), índice gengival (IG) e sangramento à sondagem (SS). As biospécimes recolhidas incluirão fluido gengival crevicular (FGC), placa subgengival, saliva e um bochecho oral. Os participantes receberão uma limpeza dentária e o seu produto de estudo atribuído com instruções.

Cronograma de Visitas de Tratamento

Os participantes consumirão duas pastilhas por dia em casa e assistirão a oito (8) visitas de estudo.

Visita 2 (Dia -14 / -7)

Exame oral e recolha de biospécimes (FGC, placa, saliva, bochecho oral). Os participantes reportam o uso de PNMs e efeitos adversos.

Fase de Indução (Sem Higiene Oral por 21 Dias) Visita 3 (Dia 0)

Exame oral e recolha de biospécimes. Os participantes abstêm-se de toda higiene oral por 21 dias e continuam as suas pastilhas atribuídas.

Visita 4 (Dia 7)

Exame oral e recolha de biospécimes. Os participantes são lembrados para continuar a abster-se de higiene oral.

Visita 5 (Dia 14)

Exame oral e recolha de biospécimes. Os participantes continuam a abster-se de higiene oral.

Fase de Resolução (Participantes Retomam Higiene Oral) Visita 6 (Dia 21)

Exame oral e recolha de biospécimes. Os participantes recebem uma limpeza dentária e retomam a higiene oral em casa enquanto continuam com as pastilhas do estudo.

Visita 7 (Dia 28)

Exame oral e recolha de biospécimes.

Visita 8 - Fim do Estudo (Dia 35)

Exame oral e recolha de biospécimes. Os participantes recebem compensação e retomam a higiene oral regular. Após a conclusão do estudo, o fabricante desvendará os grupos de produto, e os participantes serão informados da sua atribuição.