Estudo Infantil VIRTUUS (VIRTUUS)

Os avanços nos regimes imunossupressores melhoraram significativamente a sobrevida do aloenxerto a curto prazo para receptores de transplante renal. No entanto, a sobrevida do aloenxerto a longo prazo permanece estática. Para crianças com doença renal terminal (ESRD), melhorias nos resultados a longo prazo são extremamente necessárias. Crianças com ESRD requerem múltiplos transplantes ao longo da vida, incorrendo em riscos cirúrgicos e imunológicos repetidos com cada órgão recém-transplantado. A lesão do aloenxerto ocorre principalmente devido à rejeição celular aguda (ACR) e/ou rejeição mediada por anticorpos (AMR) e infecções virais, como a nefropatia associada ao vírus BK (BKVN). Um grande obstáculo para promover a sobrevida do aloenxerto a longo prazo é a falta de biomarcadores diagnósticos e prognósticos não invasivos para detectar de forma confiável a lesão precoce no aloenxerto antes que surjam as manifestações clínicas.

A incidência de rejeição aguda (RA) em crianças no primeiro ano pós-transplante é de 10-13%[1]. O padrão-ouro atual para o diagnóstico de AR é a biópsia por agulha grossa; no entanto, a biópsia é altamente invasiva, incorre em risco de sangramento e perda do enxerto, está sujeita a erros de amostragem e carece de sensibilidade e especificidade para lesão precoce. Como as respostas imunes são dinâmicas ao longo do tempo, biópsias únicas não capturam adequadamente a imunidade anti-aloenxerto, mas biópsias repetidas são impraticáveis ​​em crianças que frequentemente requerem sedação e hospitalização para biópsias. Outros marcadores, como a creatinina sérica, têm baixa sensibilidade e especificidade para dano precoce do aloenxerto renal.

A capacidade de identificar lesão subclínica do aloenxerto renal usando biomarcadores minimamente invasivos e robustos com alta sensibilidade e especificidade em receptores pediátricos representaria um grande avanço no tratamento de transplante renal pediátrico. No estudo Clinical Trials in Organ Transplantation (CTOT)-04, um estudo prospectivo, multicêntrico e patrocinado pelo NIH de receptores adultos de aloenxertos renais, os membros da equipe VIRTUUS foram capazes de diagnosticar e prever ACR usando mRNA de células urinárias e perfis de metabólitos com alto sensibilidade e especificidade[2, 3]. Além disso, os pesquisadores validaram uma assinatura de mRNA de células urinárias que distingue rejeição aguda (AR) de lesão tubular aguda (ATI) e ACR de AMR, bem como um diagnóstico de assinatura de mRNA de células urinárias e prognóstico de BKVN [3-5]. O objetivo geral desta proposta do VIRTUUS é adaptar os biomarcadores de diagnóstico e prognóstico não invasivos validados para caracterizar o status do aloenxerto em receptores pediátricos de aloenxertos renais. Especificamente, os investigadores investigarão 1) se a assinatura de 3 genes de células urinárias adultas é diagnóstica e prognóstica de ACR em receptores pediátricos de aloenxertos renais, 2) se o metabólito combinado e a assinatura de 3 genes de células urinárias são diagnósticos e prognósticos de ACR em receptores pediátricos de aloenxertos renais, 3) se os níveis de mRNA do BKV VP-1 nas células urinárias são diagnósticos de BKVN e 4) se os níveis celulares urinários do mRNA do inibidor do ativador do plasminogênio -1 (PAI-1) e os níveis de creatinina sérica predizem o aloenxerto falha.

Os investigadores propõem validar marcadores imunológicos precoces que demonstraram ser prognósticos e diagnósticos em receptores de transplante renal adulto em receptores de transplante renal pediátrico. Os achados dos investigadores irão avançar significativamente no campo do transplante pediátrico, movendo-se em direção a regimes imunossupressores proativos e personalizados que minimizam a morbidade e otimizam a sobrevida do aloenxerto a longo prazo.

O objetivo principal do investigador é levantar a hipótese de que: (i) a assinatura de 3 genes da célula urinária adulta será diagnóstica e prognóstica de ACR em amostras de urina coletadas longitudinalmente de crianças com transplantes renais; e (ii) metabólitos combinados e biomarcadores de mRNA têm maior capacidade de diagnosticar ACR do que a assinatura de mRNA ou metabólito sozinho e (iii) níveis de BKV VP-1 mRNA são diagnósticos de nefropatia por vírus BK (BKVN) e (iv) níveis de células urinárias de O mRNA do inibidor do ativador do plasminogênio-1 (PAI-1) e os níveis séricos de creatinina predizem a falha do aloenxerto.

Os investigadores procuram:

1. Determinar se a assinatura de 3 genes da célula urinária adulta é diagnóstica e prognóstica de ACR em receptores pediátricos de aloenxertos renais,
2. Avaliar se um metabólito combinado e a assinatura de mRNA urinário de 3 genes é diagnóstico e prognóstico de ACR e
3. Testar a hipótese de que os níveis de mRNA de BKV-VP-1 em células urinárias são diagnósticos de BKVN e testar a hipótese de que um modelo de predição de duas variáveis ​​composto pelo nível de células urinárias de mRNA de PAI-1 e níveis de creatinina sérica, ambos medidos no momento do diagnóstico de biópsia de BKVN, preveem a futura falha do enxerto

Os objetivos secundários incluem o seguinte:

1. Criar um repositório de amostras de DNA de urina, saliva, sangue e tecidos descartados e sangue e tecidos de doadores falecidos para usar em pesquisas futuras que examinarão associações genômicas amplas com rejeição e infecções virais em receptores pediátricos de transplante renal e
2. Crie um biobanco de amostras de sobras de sangue e de sangue de doadores falecidos para examinar posteriormente as associações entre a proteômica e a metabolômica da urina e do sangue.