IL-11 no Desenvolvimento da Esclerose Múltipla

As terapias imunomoduladoras são mais eficazes quando administradas no início do curso da esclerose múltipla recorrente remitente (EMRR). Portanto, os investigadores estão buscando biomarcadores da resposta autoimune para identificar com precisão pacientes com síndrome clinicamente isolada (CIS), a fase inicial da doença. Os estudos preliminares dos investigadores identificaram a IL-11 como a citocina mais significativamente aumentada no soro e líquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com CIS. Os níveis séricos de IL--11 e IL--17A correlacionam-se com a carga de lesão T2 e T1 da ressonância magnética cerebral e aumentaram significativamente durante as exacerbações clínicas em comparação com as remissões da doença em pacientes com EMRR não tratados. Os investigadores também descobriram que IL-11 induz a diferenciação e expansão de células Th17 em pacientes com CIS. Os estudos humanos dos investigadores identificaram que as células CD4+ representam a fonte predominante de IL--11 na circulação periférica. Em comparação com controles saudáveis ​​(HCs), as células IL--11+CD4+ de pacientes com CIS estavam significativamente aumentadas na circulação periférica e exibiam a maior expressão de CCR6 (86%) entre os subconjuntos de células T CD4+. Isso implicou seu potencial de migração precoce para o SNC. De fato, as células IL-11+CD4+ foram significativamente enriquecidas no LCR de pacientes com EMRR em comparação com suas amostras de sangue correspondentes (40,9 vs. 2,3%), com o aumento mais proeminente no número de IL--17A+IL--11 Células +CD4+. Estudos de imuno-histoquímica de amostras de biópsias de lesões cerebrais ativas de EM revelaram um enriquecimento de células IL--11+ dentro de células CD4+ infiltradas, sugerindo seu importante papel no desenvolvimento de lesões inflamatórias do SNC. Estudos em animais confirmaram o papel causal da IL-11 na exacerbação da encefalomielite autoimune experimental (EAE) RR, onde a IL-11 aumentou o número de células IL-17A+CD4+ infiltrantes do sistema nervoso central (SNC) em comparação para controlar camundongos com EAE, refletindo a indução de IL--11 da expressão de CCR6 em células CD4+. Camundongos IL--11Ra KO tiveram um curso clínico de EAE atenuado e níveis séricos de IL--17A mais baixos, bem como números mais baixos de células Il--17A+CD4+ no cérebro e infiltrados inflamatórios da medula espinhal, semelhantes aos camundongos IL23p19 KO. A administração de mAb anti IL--11R de camundongo na fase pré-clínica da EAE induziu um início tardio e diminuição da gravidade da doença, com diminuição dos níveis séricos de IL--17A. Os objetivos deste estudo são (1) identificar os mecanismos moleculares envolvidos na migração induzida por IL--11 de subconjuntos de células CD4+ para o SNC, (2) caracterizar funcionalmente células IL--11+CD4+ enriquecidas com LCR em Pacientes com CIS, (3) examinam o potencial de IL--11 para induzir células CD4+ encefalitogênicas e determinam o efeito terapêutico do mAb anti IL--11R em RREAE.

Objetivos Específicos:

Objetivo 1. Caracterizar a migração induzida por IL--11 de subconjuntos de células CD4+ em pacientes com CIS.

1.A. Identificar vias de sinalização envolvidas na migração induzida por IL--11 de subconjuntos de células CD4+ para o SNC. Os investigadores identificarão as vias de sinalização estimuladas por IL--11 mediando a expressão de CCR6 e moléculas de adesão em células CD45RO+.

1. B. Determinar o efeito quimiotático direto de IL--11 em subconjuntos de células CD4+. Ensaios de migração in vitro determinarão um efeito quimiotático direto de IL--11 na migração de subconjuntos de células CD4+ através da barreira de células endoteliais (EC).

   Objetivo 2. Identificar o perfil transcricional e o repertório TCRVb de células IL-11+CD4+ enriquecidas com LCR de pacientes com CIS.

2. A. Caracterizar o fenótipo e o perfil transcricional de células IL-11+CD4+ enriquecidas com CSF. A fenotipagem por citometria de fluxo e o sequenciamento de RNA serão realizados em células IL--11+CD4+ de LCR e amostras de sangue compatíveis.

2.B. Determine o repertório TCRVb das células CSF IL--11+CD4+. Identifique se eles podem ser rastreados para a circulação periférica.

Objetivo 3. Caracterizar o papel da IL--11 na indução de células CD4+ encefalitogênicas.

3.A. Determine a capacidade de IL--11 para induzir células CD4+ encefalitogênicas. Experimentos in vivo testarão o efeito da IL--11 na capacidade encefalitogênica de células CD4+.

3.B. Determinar a eficácia do mAb anti IL--11R na prevenção e supressão de RREAE. Camundongos com RREAE serão tratados antes e durante os surtos clínicos e a remissão da doença. O efeito terapêutico do mAb anti IL--11R será caracterizado por meio de estudos de resposta clínica, imuno-histoquímica e citometria de fluxo de células infiltradas no SNC.