Troca de leucócitos entre órgãos mediada pela luz solar (SMILE)

O objetivo deste estudo será aumentar as concentrações séricas de vitamina D3 em pacientes com esclerose múltipla via radiação UVB em relação a diferentes genótipos associados ao déficit de vitamina D e analisar os efeitos do aumento da vitamina D e da radiação UVB, em geral, em seu sistema imunológico células. Os participantes deste estudo serão recrutados do grupo de pacientes com EM já registrados no departamento de neurologia do UKM e de médicos residentes do Neuroimmunologisches Kompetenznetzwerk Münsterland. A radiação UVB dos participantes ocorrerá durante o inverno para evitar qualquer interferência da luz solar ambiente. Como os participantes não tomarão nenhum suplemento de vitamina D, sua concentração sérica deve ser muito baixa. Os participantes serão avaliados previamente quanto ao polimorfismo de nucleotídeo único associado ao déficit de vitamina D e classificados em dois grupos, dependendo de seus escores de risco calculados. Os pacientes também receberão uma avaliação clínica no departamento de neurologia e dermatologia e um MRT craniano. Cada um de 17 pacientes será classificado em um dos dois grupos: deficiência de vitamina D de alto risco ou baixo risco. A influência UVB nos aumentos da concentração sérica de vitamina D entre esses dois grupos deve então ser dependente dos genótipos associados. Vamos rastrear essas mudanças coletando amostras de sangue antes e depois da radiação. Também coletaremos amostras de pele e, para os participantes que optarem, de líquido cefalorraquidiano (LCR). Isso nos permitirá isolar células únicas de cada um dos três compartimentos e sequenciá-las em um nível transcriptômico de RNA seguindo o fluxo de trabalho 10x. A radiação UVB induzirá efeitos imunomoduladores na pele e a vitamina D demonstrou ser um desses efeitos, pois sua síntese é iniciada pela radiação UVB e sua ligação aos receptores de vitamina D torna as células imunes mais reguladoras. Se forem encontradas diferenças nas alterações das células imunes entre os dois grupos de escores de risco, elas devem ser atribuídas aos genótipos associados, lançando nova luz sobre a influência da vitamina D na patogênese dos pacientes com EM e no sistema imunológico em geral.

Ao utilizar o sequenciamento de RNA de célula única em células imunes isoladas desses três compartimentos, antes e depois da radiação UVB, poderemos ter uma abordagem relativamente imparcial para investigar a influência da radiação UVB e, separadamente, da vitamina D no sistema imunológico células. Assinaturas celulares específicas de células imunes sequenciadas dos três compartimentos nos permitirão rastrear a migração das células induzidas da pele através do sangue e no LCR. Além disso, o LCR e o soro isolados do sangue serão avaliados quanto aos títulos de anticorpos contra o vírus Epstein-Barr e vesículas extracelulares. Todos esses dados contribuirão para nossa análise multidimensional usando fluxos de trabalho de bioinformática baseados em métodos lineares, como análise de componentes principais e ferramentas não lineares baseadas em redes neurais e inferência variacional bayesiana.