Intercambio de leucocitos entre órganos mediado por la luz solar (SMILE)

El objetivo de este estudio será aumentar las concentraciones séricas de vitamina D3 en pacientes con esclerosis múltiple mediante radiación UVB en relación con diferentes genotipos asociados al déficit de vitamina D y analizar los efectos del aumento de vitamina D y la radiación UVB, en general, sobre su sistema inmunológico. células. Los participantes de este estudio serán reclutados del grupo de pacientes con EM ya registrados en el departamento de neurología de la UKM y de médicos residentes de Neuroimmunologisches Kompetenznetzwerk Münsterland. La radiación UVB de los participantes se realizará durante el invierno para evitar cualquier interferencia de la luz solar ambiental. Como los participantes no tomarán suplementos de vitamina D, su concentración sérica debe ser muy baja. Los participantes serán evaluados de antemano por su polimorfismo de nucleótido único asociado con el déficit de vitamina D y se clasificarán en dos grupos según sus puntajes de riesgo calculados. Los pacientes también recibirán una evaluación clínica en el departamento de neurología y dermatología y una TRM craneal. 17 pacientes cada uno se clasificarán en uno de dos grupos: ya sea deficiencia de vitamina D de alto riesgo o de bajo riesgo. La influencia de los rayos UVB en los aumentos de la concentración sérica de vitamina D entre esos dos grupos debería depender de los genotipos asociados. Haremos un seguimiento de esos cambios tomando muestras de sangre antes y después de la radiación. También tomaremos muestras de la piel y, para los participantes que opten por participar, de líquido cefalorraquídeo (LCR). Esto nos permitirá aislar células individuales de cada uno de los tres compartimentos y secuenciarlas en un nivel transcriptómico de ARN siguiendo el flujo de trabajo 10x. La radiación UVB inducirá efectos inmunomoduladores en la piel y se demostró que la vitamina D es uno de esos efectos, ya que su síntesis es iniciada por la radiación UVB y su unión a los receptores de vitamina D hace que las células inmunitarias sean más reguladoras. Si se encontraran diferencias en las alteraciones de las células inmunitarias entre los dos grupos de puntuaciones de riesgo, deberían atribuirse a los genotipos asociados, arrojando nueva luz sobre la influencia de la vitamina D en la patogenia de los pacientes con EM y en el sistema inmunitario en general.

Al utilizar la secuenciación de ARN de una sola célula en células inmunitarias aisladas de esos tres compartimentos, antes y después de la radiación UVB, podremos tener un enfoque relativamente imparcial para investigar la influencia de la radiación UVB y, por separado, la vitamina D en el sistema inmunitario. células. Las firmas celulares específicas de las células inmunitarias secuenciadas de los tres compartimentos nos permitirán rastrear la migración de las células inducidas desde la piel a través de la sangre y hacia el LCR. Además, se evaluarán los títulos de anticuerpos del virus de Epstein-Barr y las vesículas extracelulares en el LCR y el suero aislado de la sangre. Todos estos datos contribuirán a nuestro análisis multidimensional utilizando flujos de trabajo bioinformáticos basados ​​en métodos lineales como el análisis de componentes principales y herramientas no lineales basadas en redes neuronales e inferencia variacional bayesiana.