Międzynarządowa wymiana leukocytów za pośrednictwem światła słonecznego (SMILE)

Celem tego badania będzie zwiększenie stężenia witaminy D3 w surowicy u pacjentów ze stwardnieniem rozsianym poprzez promieniowanie UVB w odniesieniu do różnych genotypów związanych z niedoborem witaminy D oraz analiza wpływu wzrostu witaminy D i promieniowania UVB, ogólnie, na ich układ odpornościowy komórki. Uczestnicy tego badania będą rekrutowani z puli już zarejestrowanych pacjentów ze stwardnieniem rozsianym na oddziale neurologii UKM oraz spośród lekarzy rezydentów Neuroimmunologisches Kompetenznetzwerk Münsterland. Promieniowanie UVB uczestników będzie miało miejsce w okresie zimowym, aby uniknąć zakłóceń przez światło słoneczne z otoczenia. Ponieważ uczestnicy nie będą przyjmować żadnych suplementów witaminy D, ich stężenie w surowicy powinno być bardzo niskie. Uczestnicy zostaną wcześniej przebadani pod kątem polimorfizmu pojedynczego nukleotydu związanego z niedoborem witaminy D i podzieleni na dwie grupy w zależności od obliczonej oceny ryzyka. Pacjenci otrzymają również ocenę kliniczną w oddziale neurologii i dermatologii oraz MRT czaszki. Każdy z 17 pacjentów zostanie przydzielony do jednej z dwóch grup: wysokiego ryzyka lub niskiego ryzyka z niedoborem witaminy D. Wpływ UVB na wzrost stężenia witaminy D w surowicy między tymi dwiema grupami powinien być zatem zależny od powiązanych genotypów. Będziemy śledzić te zmiany, pobierając próbki krwi przed i po naświetlaniu. Pobierzemy również próbki skóry oraz, w przypadku uczestników, płyn mózgowo-rdzeniowy (CSF). To pozwoli nam wyizolować pojedyncze komórki z każdego z trzech przedziałów i zsekwencjonować je na poziomie transkryptomicznym RNA zgodnie z 10-krotnym przepływem pracy. Promieniowanie UVB wywołuje efekty immunomodulujące w skórze, a witamina D okazała się jednym z tych efektów, ponieważ jej synteza jest inicjowana przez promieniowanie UVB, a jej wiązanie z receptorami witaminy D sprawia, że ​​komórki odpornościowe są bardziej regulacyjne. Jeśli stwierdzono różnice w zmianach komórek odpornościowych między dwiema grupami wyników ryzyka, należy je przypisać powiązanym genotypom, rzucając nowe światło na wpływ witaminy D na patogenezę pacjentów z SM i ogólnie na układ odpornościowy.

Wykorzystując sekwencjonowanie RNA pojedynczych komórek na izolowanych komórkach odpornościowych tych trzech przedziałów, przed i po naświetlaniu UVB, będziemy w stanie przyjąć względnie obiektywne podejście do badania wpływu promieniowania UVB i osobno witaminy D na układ odpornościowy. komórki. Specyficzne sygnatury komórkowe zsekwencjonowanych komórek odpornościowych z trzech przedziałów pozwolą nam śledzić migrację indukowanych komórek ze skóry przez krew do płynu mózgowo-rdzeniowego. Dodatkowo płyn mózgowo-rdzeniowy i surowica wyizolowane z krwi zostaną ocenione pod kątem mian przeciwciał przeciwko wirusowi Epsteina-Barra i pęcherzyków pozakomórkowych. Wszystkie te dane przyczynią się do naszej wielowymiarowej analizy z wykorzystaniem bioinformatycznych przepływów pracy opartych na metodach liniowych, takich jak analiza głównych składowych i narzędzia nieliniowe oparte na sieciach neuronowych i wnioskowaniu wariacyjnym bayesowskim.