Investigação In Vivo sobre Disfunção Mitocondrial na Fadiga Pós-COVID e Fadiga por Câncer.

As manifestações clínicas da fadiga pós-COVID são comparáveis ​​à síndrome da fadiga crônica ou encefalomielite miálgica (CFS/ME), cujas características clínicas compreendem diminuição substancial da função que persiste por mais de 6 meses, mal-estar pós-esforço, sono não reparador, comprometimento cognitivo ou intolerância ortostática (Blomberg, 2021; Logue, 2021). Do ponto de vista clínico, há alta plausibilidade de anormalidades na produção de energia ou na função mitocondrial como etiologia da SFC/EM (Tomas, 2017; Filler, 2014). As características clínicas semelhantes foram observadas em outras infecções, como EBV, Ebola, doença de cal, etc., o que levou à criação de uma terminologia, síndrome pós-infecciosa. Considerando o estudo recente mostrando que o SARS-CoV-2 reduz exclusivamente as proteínas mitocondriais, conhecidas como Complex One, para acalmar a produção metabólica da célula (Miller, 2021), a relevância etiológica da fadiga pós-COVID e CFS/ME deve ser examinada. A propósito, a fadiga é prevalente em sobreviventes de câncer, mesmo após a remissão completa, que é descrita como "paralisante" e resulta em exaustão física ou mental que pode não ser revertida com repouso ou sono. Essa fadiga relacionada ao câncer pode agravar o efeito da quimioterapia cerebral ou da névoa da quimioterapia, que denota disfunção cognitiva relacionada ao câncer que persiste por meses ou anos após o tratamento do câncer. Como tal, existem muitas características clínicas análogas compartilhadas por fadiga pós-COVID e fadiga por câncer. A comparação das alterações metabólicas entre a fadiga pós-COVID e a fadiga do câncer pode fornecer dicas para entender melhor o mecanismo da fadiga.

Tem sido um desafio técnico verificar o papel das mitocôndrias na SFC/ME. Um teste disponível comercialmente, e protocolo de escore de energia mitocondrial, falhou em mostrar a confiabilidade e reprodutibilidade exigidas de um teste diagnóstico (Thomas, 2019), o que implica nas limitações práticas do teste in vitro para avaliar a função mitocondrial, dados os fatores intrínsecos e extrínsecos que afetam o resultado do teste de metabólitos alvo. Dito isto, a espectroscopia de ressonância magnética de prótons (MRS) pode ser uma ferramenta útil que detecta os principais metabólitos cerebrais, como N-acetilaspartato (NAA), creatinina (Cr), mio-inositol (MI) e lactato (Kantarci, 2003). Os espectros de MRS, incluindo picos de lactato positivos anormais, correlacionam-se bem com outros marcadores clínicos em mitocondriopatias (Lin, 2003). O nível de ácido orgânico (incluindo ácido 3-metilglutacórico) na urina está associado ao metabolismo energético mitocondrial comprometido (Ikon N, 2016), que será usado como um índice adjunto.

Até o momento, pouco se sabe sobre fadiga pós-COVID ou fadiga por câncer, embora se saiba que afeta uma grande proporção de pacientes (10-70%, dependendo da população). Este estudo visa investigar a função mitocondrial potencial e alterações metabólicas no cérebro para fornecer mais informações sobre a etiologia dessas alterações que levam à fadiga.

Este estudo tem como objetivos:

1) determinar se há alterações no NAA/MI indicando papel bioenergético perturbado na função mitocondrial neuronal na fadiga pós-COVID e 2) comprovar alterações no fluxo sanguíneo cerebral (CBF) avaliado pela sequência 3D Arterial Spin Labeling (ASL) para cérebro na fadiga pós-COVID.

Este estudo levantou a hipótese de que a fadiga pós-COVID é causada por perturbações no metabolismo e na função mitocondrial no cérebro.

Este estudo incluirá 30 pacientes (grupo experimental) com queixa de fadiga persistente com duração superior a 4 semanas após a recuperação da infecção por SARS-CoV-2 e o controle pareado por idade/gênero de 30 indivíduos saudáveis ​​(grupo de controle 1) e 30 pacientes que sofrem de pacientes com fadiga relacionada ao câncer por mais de 4 semanas após a remissão (grupo controle 2). Tanto o grupo experimental (fadiga pós-COVID) quanto o grupo controle 2 (fadiga do câncer) serão recrutados no ambulatório do NUH. O controle saudável será recrutado entre funcionários do NUH de vários grupos de trabalho, utilizando um folheto de recrutamento e boca a boca.

Visitas de triagem e procedimentos:

(Visita 1) Os detalhes do estudo serão explicados claramente aos possíveis participantes e o consentimento será obtido dos participantes antes de iniciar os procedimentos do estudo, que incluem triagem, acesso e extração de dados de seus registros médicos, administração dos questionários do estudo (escala de fadiga de Chalder) e providenciar para que os participantes do estudo sejam submetidos a MRI, 3D Arterial Spin Labeling (ASL) e espectroscopia de ressonância magnética 1H (MRS) no NUS-Center para ressonância magnética de transição (TMR). Os indivíduos elegíveis irão então prosseguir para as visitas seguintes.

A visita 2 ocorrerá dentro de 28 dias após a primeira visita e envolverá medições MRI/MRS/ASL para avaliar perturbações metabólicas e mitocondriais na fadiga pós-COVID ou fadiga por câncer (detalhes abaixo). A amostra de urina (10ml) será coletada de todos os indivíduos para medir as alterações do nível de ácido orgânico em relação à faixa normal que pode refletir a disfunção mitocondrial.

Visita Final de Estudo (3ª visita ou telefonema). Para os participantes do grupo de fadiga pós-COVID e do grupo de fadiga do câncer, a equipe de estudo aplicará os mesmos questionários, incluindo Chalder Fatigue Scale, Health Questionnaire (EQ-5D-5L) e Hamilton Depression Rating Scale por telefone ou pessoalmente , que coincidirá com a consulta de acompanhamento com o médico assistente. Para indivíduos normais saudáveis ​​sem sintomas de fadiga, os questionários serão administrados por telefone e não precisam comparecer pessoalmente à Visita 3, que é definida para monitorar o curso clínico da fadiga pós-COVID e fadiga do câncer.

Este é um estudo de caso-controle. Com um tamanho de amostra de 30 por grupo (90 no total para 3 grupos), o estudo terá 90% de poder para detectar uma diferença padrão de 0,95 e a diferença média nos endpoints primários igual a 95% do DP do endpoint. Como tal, o tamanho mínimo da amostra será de pelo menos 27 por grupo. Uma vez que os dois endpoints primários do estudo são NAA/MI medidos por MRS de prótons e fluxo sanguíneo cerebral (CBF) avaliado pela sequência 3D Arterial Spin Labeling (ASL) para cérebro, o nível significativo será ajustado para 0,0125 (para 2 endpoints primários e 2 controles, o nível significativo será 0,05/4).

Essas variáveis ​​numéricas medidas em MRI/MRS serão comparadas com controle saudável ou controle de doença (pacientes com câncer de fadiga). Será usado o teste T de 2 amostras ou o teste U de Mann-Whitney, o que for mais apropriado para o teste de hipótese. A regressão linear pode ser aplicada para ajustar outros fatores de confusão ou covariáveis.

A hipótese nula: a média de NAA/MI e CBF do grupo de estudo é igual à média de NAA/MI e CBF do grupo de controle da doença (fadiga do câncer) e do grupo de controle saudável. A hipótese alternativa: a média de NAA/MI e CBF do grupo de estudo é diferente da média de NAA/MI e CBF do grupo de controle da doença e do grupo de controle saudável.

Erro tipo I: 0,0125 Erro tipo II: 0,1