A prevalência de doenças relacionadas ao RYR1

RESUMO

O gene do receptor de rianodina do músculo esquelético (RYR1) codifica um importante canal de cálcio no músculo esquelético, com um papel crucial na contração muscular. Mutações (ou seja, alterações causadoras de doenças) no RYR1 estão associadas a uma ampla gama de problemas clínicos, que vão desde condições musculares congênitas com fraqueza profunda no nascimento ("miopatias congênitas"), até uma complicação anestésica potencialmente fatal ("Hipertermia Maligna, MH") em indivíduos saudáveis. Embora se acredite que as condições relacionadas com o RYR1 estejam entre as doenças neuromusculares mais comuns, a sua prevalência precisa (ou seja, o número de casos numa determinada população num determinado momento) é atualmente desconhecida. Além disso, não há informações sobre a frequência relativa de miopatias congênitas específicas, HM e manifestações relacionadas.

A falta de dados epidemiológicos fiáveis ​​representa um grande obstáculo à resposta às necessidades dos indivíduos afectados por doenças relacionadas com o RYR1, à alocação adequada de recursos e à preparação para estudos clínicos ("prontidão para ensaio") essenciais para o desenvolvimento da terapia. Para resolver esta lacuna, realizaremos um estudo colaborativo internacional envolvendo centros neuromusculares e de MH do Reino Unido e da Holanda, com foco na prevalência de condições relacionadas ao RYR1, como grupo e por subtipo. Os países participantes neste estudo foram incluídos devido a 1) testes centralizados de RYR1, 2) à presença de pelo menos um banco de dados/registro com cobertura populacional que captura distúrbios relacionados ao RYR1 e 3) de centros nacionais especializados em miopatia e HM. As informações sobre indivíduos com mutação RYR1 e seu diagnóstico específico serão obtidas de bancos de dados/registros nacionais e analisadas utilizando abordagens estatísticas bem estabelecidas na avaliação epidemiológica de doenças humanas e de outras populações de mamíferos.

Este estudo fornecerá informações importantes sobre a carga real da doença dos distúrbios relacionados ao RyR1 em uma escala mundial, informará a alocação de recursos de pesquisa apropriada e a preparação para a prontidão do teste.

I. Área de Prioridade de Pesquisa Ryr1

A. Prevalência de doenças relacionadas a RyR1

II. IMPACTO NA DOENÇA RELACIONADA COM RYR1

Existem vários motivos pelos quais esta pesquisa é importante e fará uma diferença significativa na missão da Fundação RYR-1 de encontrar tratamentos e curas para doenças relacionadas ao RYR1:

Pela primeira vez, este estudo fornecerá dados epidemiológicos confiáveis ​​e atualizados sobre a prevalência de distúrbios relacionados ao RYR1 como um grupo, e com relação a subgrupos específicos dentro deste grupo mais amplo. Os dados epidemiológicos atualmente disponíveis estão desatualizados e não refletem as mudanças nas práticas de diagnóstico e o aumento relacionado no rendimento diagnóstico ao longo da última década. Além disso, em contraste com os poucos estudos actualmente disponíveis, limitados a nível regional, este é o primeiro estudo epidemiológico relativo a doenças relacionadas com o RYR1 que adopta uma abordagem nacional envolvendo dois grandes países europeus com populações etnicamente mistas, limitando assim o impacto potencial das diferenças regionais em conhecimentos e rigor diagnóstico. Além disso, ao contrário de estudos anteriores, este estudo não se concentrará apenas nas miopatias relacionadas ao RYR1, mas também nos distúrbios relacionados ao RYR1 em sua totalidade, incluindo miopatias congênitas e suscetibilidade à hipertermia maligna.

Dados epidemiológicos fiáveis ​​relativos a um grupo de doenças e/ou subgrupos específicos são uma parte essencial da preparação para a prontidão dos ensaios clínicos e permitirão a tradução clínica de novos desenvolvimentos terapêuticos relativos a doenças relacionadas com o RYR1 na prática clínica. Uma série de novas abordagens terapêuticas estão atualmente em fase pré-clínica ou de ensaio clínico, e espera-se que algumas dessas abordagens sejam introduzidas na prática clínica nos próximos anos.

Este estudo irá destacar a verdadeira carga de doenças sociais e individuais dos distúrbios relacionados ao RYR1 e fornecer um estímulo para a alocação adequada de recursos de saúde e pesquisa dedicados a este importante grupo de distúrbios neuromusculares. Além disso, destacando a frequência relativa de subgrupos específicos (ou seja, miopatias congênitas, MH) dentro do grupo mais amplo de distúrbios relacionados ao RYR1 ajudará a focar e adaptar futuros esforços de pesquisa, uma vez que os mecanismos patogênicos subjacentes e as manifestações individuais da doença em diferentes subgrupos são amplamente diferentes. Mais importante ainda, as estratégias terapêuticas destinadas a pacientes que sofrem de miopatias congénitas não beneficiarão necessariamente aqueles que sofrem de HM, e podem ser necessárias diferentes abordagens de tratamento baseadas em dados epidemiológicos fiáveis.

Finalmente, é provável que a obtenção de dados mais detalhados do genótipo-fenótipo forneça informações importantes nos vínculos atualmente não totalmente explorados entre miopatia congênita e fenótipos malignos de hipertermia e o intrigante continuum entre a hipertermia maligna, a performance resumida.

III. OBJETIVOS ESPECÍFICOS E JUSTIFICATIVA

Os objetivos primários específicos deste projeto são i) investigar a prevalência de distúrbios relacionados ao RYR1 em dois países diferentes, o Reino Unido e a Holanda; ii) delinear a frequência relativa de subgrupos específicos (em particular miopatias congênitas versus hipertermia maligna) dentro do grupo geral de distúrbios relacionados ao RYR1; e iii) estabelecer correlações genótipo-fenótipo para subgrupos específicos de miopatias relacionadas ao RYR1 e distúrbios relacionados.

Embora não seja o objetivo principal deste estudo, o pesquisador de pós-doutorado designado também será convidado a contribuir para outros trabalhos em andamento sobre distúrbios relacionados ao RYR1 do departamento.

i) Prevalência de doenças relacionadas com o RYR1: Presume-se que as mutações no RYR1 sejam uma das causas genéticas mais comuns de doenças neuromusculares não distróficas, no entanto, existem actualmente apenas alguns estudos que relatam a prevalência destas condições comuns. Além disso, estes estudos são regionalmente limitados e têm mais de 10 anos, não refletindo mudanças recentes e diferenças regionais na prática diagnóstica. Um estudo colaborativo internacional centrado na prevalência de doenças relacionadas com o RYR1 é, portanto, muito necessário e oportuno.

ii) Frequência de subgrupos específicos de doenças relacionadas a RyR1: Nas últimas duas décadas, o espectro de distúrbios relacionados a Ryr1 evoluiu continuamente, abrangendo uma ampla gama de condições, incluindo várias miopatias congênitas (em particular, doença central, CCD Miopatia multi-minicore, mmd; ) miopatias. Atualmente, não há dados sobre a frequência desses subgrupos específicos, e um estudo específico que aborda essa falha é urgentemente necessário.

iii) Correlações genótipo-fenótipo em distúrbios relacionados ao RYR1: A definição de correlações genótipo-fenótipo ajudará a elucidar ainda mais a complexa relação entre os fenótipos MHS e CM relacionados ao RYR1 e fornecerá a base para pesquisas futuras, incluindo estudos funcionais. As análises específicas a serem realizadas focarão, por exemplo, nas variantes RYR1 implicadas na síndrome de King-Denborough (KDS), uma miopatia rara associada a características dismórficas e profunda suscetibilidade à hipertermia maligna (MHS), e na p.Thr4288_Ala4290dup, uma variante RYR1 encontrado com frequência detectável em indivíduos de ascendência africana em bancos de dados de variação genômica, frequentemente associados ao aumento da capacidade atlética. RYR1 p.Thr4288_Ala4290dup também foi encontrado em indivíduos com mialgia/rabdomiólise por esforço (ERM) e hipertermia maligna (HM), mas atualmente não está claro se esta observação reflete uma associação causal ou apenas a frequência relativamente alta desta variante em certas populações. Para resolver esta questão, compararemos a frequência de p.Thr4288_Ala4290dup nos conjuntos de dados obtidos em i) e ii) com a sua frequência populacional.

4. Dados preliminares/de suporte

i) Prevalência de distúrbios relacionados a Ryr1: atualmente existe apenas um estudo dos Estados Unidos, indicando a prevalência de miopatias congênitas relacionadas a Ryr1 como 1 em 90000 em uma população pediátrica representativa (Amburgey et al., Ann Neurol 2011; 70: 662-665); É provável que isso seja subestimado, considerando que este estudo de mais de 10 anos de idade precede a introdução generalizada do sequenciamento da próxima geração em diagnósticos clínicos e não leva em consideração apresentações como MH ou manifestações relacionadas ao MH (como como Miligia/rabdomiólise esforçados e miopatia axial de início tardio) que só foram reconhecidas na última década. Um estudo mais recente do Reino Unido indica mutações no RyR1 como a causa genética identificável mais comum de miopatias congênitas [Maggi et al., Neurology 2015; 84: 28-35], mas não comenta sua prevalência geral.

ii) Frequência de subgrupos específicos de doenças relacionadas ao RYR1: Atualmente, há apenas um estudo do Reino Unido sobre a frequência de miopatias congênitas (MCs) específicas relacionadas ao RYR1, sugerindo que a Doença do Núcleo Central (CCD) e a Doença Multi-minicore (MmD ) (as "miopatias centrais") são mais comuns, enquanto outras, como a miopatia centronuclear (CNM) e a desproporção congênita do tipo de fibra (CFTD), são menos frequentes [Maggi et al., Neurologia 2015;84:28-35]. Atualmente, não há informações sobre a frequência relativa dos fenótipos de MC versus hipertermia maligna, e de manifestações associadas à HM que surgiram mais recentemente, como mialgia/rabdomiólise por esforço e miopatia axial de início tardio.

iii) Correlações genótipo-fenótipo em distúrbios relacionados ao RYR1: A definição de correlações genótipo-fenótipo ajudará a elucidar ainda mais a complexa relação entre os fenótipos MHS e CM relacionados ao RYR1 e fornecerá a base para pesquisas futuras, incluindo estudos funcionais. As análises específicas a serem realizadas focarão, por exemplo, nas variantes RYR1 implicadas na síndrome de King-Denborough (KDS), uma miopatia rara associada a características dismórficas e profunda suscetibilidade à hipertermia maligna (MHS), e na p.Thr4288_Ala4290dup, uma variante RYR1 encontrado com frequência detectável em indivíduos de ascendência africana em bancos de dados de variação genômica, frequentemente associados ao aumento da capacidade atlética. O RYR1 também foi encontrado em indivíduos com mialgia/rabdomiólise por esforço (ERM) e hipertermia maligna (HM), mas atualmente não está claro se esta observação reflete uma associação causal ou apenas a frequência relativamente alta desta variante em certas populações. Para resolver esta questão, compararemos a frequência de p.Thr4288_Ala4290dup nos conjuntos de dados obtidos em i) e ii) com a sua frequência populacional.

V. DESCRIÇÃO DETALHADA DO PROJETO

1) PLANO EXPERIMENTAL E MÉTODOS:

A) Descrição do estudo:

i) Prevalência de distúrbios relacionados a RyR1: Para determinar a prevalência de distúrbios relacionados a Ryr1, coletaremos dados demográficos, genéticos, clínicos e patológicos de pacientes diagnosticados e revisados ​​em dois países diferentes, o Reino Unido e a Holanda, com populações de 67 e 17 milhões, respectivamente. Os países acima serão incluídos com base na disponibilidade de a) testes centralizados de ryr1 com cobertura em toda a população e/ou na presença de centros de especialização nacional para b) miopatias congênitas e hipertermia maligna (MH) com bancos de dados/registros de pacientes com população em toda a população cobertura.

Os critérios de inclusão para pacientes são a) a presença de (uma) mutação(ões) inequivocamente patogênica(s) de RYR1, b) características clínicas de um distúrbio reconhecido relacionado ao RYR1 (ou seja, miopatia congênita, HM ou fenótipos relacionados), c) pelo menos um especialista avaliação em um dos centros nacionais de especialização ed) ser residente em um dos países participantes. Os critérios para o diagnóstico de miopatia congênita são a presença de características clínicas sugestivas e achados de biópsia muscular de suporte, ou a presença de achados histopatológicos de suporte em um parente de primeiro grau com características clínicas semelhantes e o mesmo genótipo RYR1. Os critérios para o diagnóstico de suscetibilidade à HM são características clínicas sugestivas de hipertermia maligna (conforme definido por um escore diagnóstico de Larach) e/ou um teste IVCT/CHCT positivo, ou um parente com história de HM e o mesmo genótipo RYR1. Os critérios de exclusão serão um diagnóstico clínico de miopatia congênita ou hipertermia maligna sem nenhuma das evidências de suporte descritas acima, ou não ser residente em um dos países participantes.

Recolha de dados: Para cada paciente, iremos recolher os seguintes dados de bases de dados/registos já existentes nos centros participantes: Idade ao diagnóstico, sexo e genótipo RYR1. Também coletaremos detalhes sobre o diagnóstico específico relacionado ao RYR1, categorizado como Doença do Núcleo Central (CCD), Doença Multi-minicore (MmD), Miopatia Centronuclear (CNM), Desproporção do Tipo de Fibra Congênita (CFTD), Síndrome de King-Denborough (KDS ), miopatia congênita com características histopatológicas inespecíficas (SMNS), suscetibilidade à hipertermia maligna (SMH) e rabdomiólise/mialgia por esforço (ERM). Nos casos com mais de um diagnóstico de distúrbios relacionados ao RYR1 (por exemplo, CCD e HM), ambos os diagnósticos serão registrados. Os dados serão coletados para todos os pacientes que atendem aos critérios de inclusão atendidos em um dos centros participantes durante um período de 10 anos, entre 01/01/2011 a 31/12/20. Todos os dados serão armazenados de forma anonimizada em um servidor seguro na King's College University, em Londres. Um pró-forma padronizado de coleta de dados foi discutido e acordado que será fornecido separadamente.

Análise estatística e epidemiológica: as prevalências de pontos para cada país serão calculadas com base no número de pacientes vivos no 31.12.2020, em comparação com o número nacional de população. Em países onde mais de um banco de dados/registro de base populacional que captura distúrbios relacionados a RyR1, também realizaremos uma abordagem de captura de captura de fonte múltipla (conforme descrito em detalhes por Deenen et al., Neurology 2014; 83: 1056-59 ), uma abordagem adequada para corrigir indivíduos sintomáticos que pode não ter sido capturada em nenhum dos bancos/registros interrogados. As taxas serão calculadas nas coortes anuais para o período de observação e serão expressas por 100.000 pessoas por ano. As taxas serão apresentadas para a coorte geral e subgrupos especificados, cada um estratificado por idade e sexo. Todas as incidências serão ajustadas pela idade usando métodos diretos para a população padrão europeia de 2013. O IC 95% será estimado assumindo uma distribuição de Poisson para o número de eventos.

ii) Frequência de subgrupos específicos de doenças relacionadas a RyR1: com base nos dados obtidos em i), também calcularemos a frequência de subgrupos específicos de distúrbios relacionados a Ryr1, incluindo as várias miopatias congênitas (CCD, MMD, CNM, CFTD, CMNs) e hipertermia maligna (MH). Para cada paciente, o diagnóstico clínico e histopatológico será verificado pela revisão das notas clínicas e pela biópsia muscular original sempre que possível.

iii) correlações genótipo-fenótipo em distúrbios relacionados a RyR1: publicamos anteriormente a maior série de pacientes com KDS relacionados a RyR1 até agora, indicando que o KDS é uma miopatia única intimamente ligada a mutações ryr1 associadas ao MH, mas com o modo preciso de A herança atualmente não resolvida [Dowling et al., Neuromuscul Disord 2011; 21: 420-427]. Posteriormente, identificamos mais de 10 pacientes adicionais com KDS relacionados a RyR1 e encontramos uma associação aparente com o domínio central do RyR1 MH Hotspot mutacional (Fernandez-Garcia et al., Manuscrito em preparação), uma observação que precisa ser validada em conjuntos de dados maiores .

O RYR1 p.Thr4288_Ala4290dup foi relatado anteriormente em associação com reações de MH, frequentemente em indivíduos portadores de pelo menos uma variante adicional de RYR1 [Levano et al., Hum Mutat 2008;30:590-8; Sambuughin et al., Clin Genet 2009;76:564-68]. Também encontramos RYR1 p.Thr4288_Ala4290dup em uma coorte de pacientes que apresentam mialgia/rabdomiólise por esforço associada a RYR1, frequentemente associada a uma capacidade atlética aparentemente aprimorada [Dlamini et al. Neuromuscul Disord 2013;23:540-48], uma associação que ainda não foi mais explorada.

B) Considerações éticas, requisitos regulamentares e protocolo de gestão de dados:

O estudo recebeu aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa Preliminar (REC) pelo King's College London Rec, aguardando algumas emendas menores (KCL Ethics Ref: LRS/DP-22/23-36029).

Um protocolo de gerenciamento de dados foi desenvolvido pelo gerenciador de dados designado para o estudo. Os dados retrospectivos coletados do Reino Unido (Guy's & St Thomas 'NHS Foundation Trust, Londres, Great Ormond Street Children's Hospital, Londres e o Centro Nacional de Hipertermia Maligno, Leeds) e a Holanda (Centro Médico da Universidade de Radboud, Nijmegen) não serão ter identificadores de pacientes diretos ou pseudônimos de pacientes que permitam a re-identificação do paciente. Os dados desses centros serão anonimizados. Os dados coletados serão de até 1000 pacientes e transferidos de cada centro através de um método criptografado protegido, como email criptografado, dependendo do tamanho do documento que está sendo transferido. Um contrato de compartilhamento de dados será feito com cada centro detalhando os itens de dados a serem compartilhados, que os dados serão anonimizados e o modo de transferência. Não haverá transferência de dados do Centro de Estudo (Kings College London, KCL) para terceiros. O estudo ocorrerá por dois anos e seus dados serão retidos e arquivados em conformidade com o cronograma de retenção de dados da KCL por 10 anos. Através do KCL RESAS (Sistema de Aplicação de Gerenciamento de Ética em Pesquisa), o estudo será registrado no KDPR (King's Data Protection Register) em conformidade com a Lei de Proteção de Dados do Reino Unido de 2018.