ADNc de Mycobacterium tuberculosis no plasma antes da broncoscopia

A tuberculose (TB) continua a ser um desafio global de saúde, particularmente na Ásia Oriental. De acordo com o Relatório Global da TB da Organização Mundial da Saúde (OMS) em 2024, mais de 10 milhões de pessoas contraíram TB em 2023, com 1,25 milhões de mortes atribuídas à doença. A Índia, a Indonésia e a China suportam o maior fardo, enquanto Hong Kong mantém uma incidência intermédia, com uma média de 3.200 novos casos anualmente.<\/p>

A tuberculose pulmonar (TBP) é a forma mais comum de doença tuberculosa ativa. O diagnóstico normalmente baseia-se na deteção do Mycobacterium tuberculosis (MTB) no escarro através de microscopia de esfregaço, cultura ou reação em cadeia da polimerase (PCR). No entanto, o esfregaço de escarro tem sensibilidade limitada, a cultura requer 6-8 semanas, e a produção de escarro é frequentemente difícil em certos doentes. A TBP pode apresentar características radiológicas heterogéneas, por vezes mimetizando malignidade, levando à broncoscopia com lavado broncoalveolar (LBA) em doentes com esfregaço negativo. O fluido do LBA (FLBA) é então testado através de cultura de MTB, PCR e citologia. A broncoscopia, embora informativa, é invasiva e apresenta riscos para doentes idosos ou com comorbilidades cardiopulmonares. A interrupção temporária de anticoagulantes orais, agora amplamente prescritos, pode levar a complicações cardioembólicas, contribuindo para até 2,6% dos eventos de acidente vascular cerebral. Atrasos no agendamento da broncoscopia e na espera pelos resultados da cultura de MTB do LBA dificultam ainda mais o diagnóstico atempado. Os marcadores inflamatórios sanguíneos são inespecíficos. Estas limitações sublinham a necessidade de uma ferramenta de diagnóstico não invasiva, rápida e precisa para a TBP.<\/p>

Os avanços na tecnologia de sequenciação oferecem novas possibilidades diagnósticas. Quando as bactérias morrem, os seus fragmentos de ADN entram na corrente sanguínea como ADN livre de células (ADNlc). A deteção de ADNlc microbiano no plasma, combinada com bioinformática, fornece um método minimamente invasivo para identificar patógenos diretamente, superando a hemocultura ou marcadores substitutos. O ADNlc do MTB no plasma é uma ferramenta de diagnóstico emergente. O Teste IntelliGenome CRISPR-TB no Sangue pode detetar ADNlc do MTB e o seu estudo marcante focou-se em populações pediátricas e VIH-positivas. No entanto, a sua aplicação clínica permanece limitada, sem validação em regiões de fardo intermédio como Hong Kong, onde a prevalência do VIH é baixa.<\/p>

O investigador desenvolveu um novo ensaio de sequenciação direcionada de ADNlc do MTB. O ensaio utiliza sequenciação baseada no genoma completo para enriquecer o ADNlc do MTB, seguida de filtragem bioinformática para remover ADN humano, distinguindo MTB de Mycobacterium não tuberculoso (MNT), e excluindo contaminantes microbianos. Seria necessário um estudo prospetivo para confirmar a precisão diagnóstica e utilidade clínica deste novo ensaio de sequenciação. Os investigadores colocam a hipótese de que a sequenciação direcionada de ADNlc do MTB no plasma não é inferior à cultura de MTB do LBA e PCR em doentes com esfregaço negativo submetidos a broncoscopia.<\/p>