DNA libero del MTB nel plasma prima della broncoscopia

La tubercolosi (TB) rimane una sfida sanitaria globale, in particolare nell'Asia orientale. Secondo il Rapporto Globale sulla TB dell'Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) del 2024, oltre 10 milioni di persone hanno contratto la TB nel 2023, con 1,25 milioni di morti attribuite alla malattia. India, Indonesia e Cina sopportano il carico più elevato, mentre Hong Kong mantiene un'incidenza intermedia, con una media di 3.200 nuovi casi all'anno.<\/p>

La tubercolosi polmonare (PTB) è la forma più comune di malattia tubercolare attiva. La diagnosi si basa tipicamente sul rilevamento di Mycobacterium tuberculosis (MTB) nell'espettorato tramite microscopia a striscio, coltura o reazione a catena della polimerasi (PCR). Tuttavia, lo striscio di espettorato ha una sensibilità limitata, la coltura richiede 6-8 settimane e la produzione di espettorato è spesso difficile in alcuni pazienti. La PTB può presentare caratteristiche radiologiche eterogenee, a volte simulando una neoplasia, portando alla broncoscopia con lavaggio broncoalveolare (BAL) in pazienti con striscio negativo. Il fluido BAL (BALF) viene quindi testato tramite coltura MTB, PCR e citologia. La broncoscopia, sebbene informativa, è invasiva e comporta rischi per i pazienti anziani o con comorbilità cardiopolmonari. L'interruzione temporanea degli anticoagulanti orali, ora ampiamente prescritti, può portare a complicazioni cardioemboliche, contribuendo fino al 2,6% degli eventi di ictus. I ritardi nella programmazione della broncoscopia e nell'attesa dei risultati della coltura MTB su BALF ostacolano ulteriormente una diagnosi tempestiva. I marker infiammatori ematici sono aspecifici. Queste limitazioni sottolineano la necessità di uno strumento diagnostico non invasivo, rapido e accurato per la PTB.<\/p>

I progressi nella tecnologia di sequenziamento offrono nuove possibilità diagnostiche. Quando i batteri muoiono, i loro frammenti di DNA entrano nel flusso sanguigno come DNA libero (cfDNA). Il rilevamento del cfDNA microbico nel plasma, combinato con la bioinformatica, fornisce un metodo minimamente invasivo per identificare direttamente i patogeni, superando la coltura ematica o i marker surrogati. Il cfDNA MTB plasmatico è uno strumento diagnostico emergente. Il Test Ematico IntelliGenome CRISPR-TB può rilevare il cfDNA MTB e il suo studio di riferimento si è concentrato su popolazioni pediatriche e sieropositive per HIV. Tuttavia, la sua applicazione clinica rimane limitata, senza validazione in regioni a carico intermedio come Hong Kong, dove la prevalenza dell'HIV è bassa.<\/p>

Il ricercatore ha sviluppato un nuovo saggio di sequenziamento mirato per cfDNA MTB. Il saggio utilizza il sequenziamento basato sull'intero genoma per arricchire il cfDNA MTB, seguito da filtraggio bioinformatico per rimuovere il DNA umano, distinguere MTB dai micobatteri non tubercolari (NTM) ed escludere contaminanti microbici. Uno studio prospettico sarebbe necessario per confermare l'accuratezza diagnostica e l'utilità clinica di questo nuovo saggio di sequenziamento. I ricercatori ipotizzano che il sequenziamento mirato del cfDNA MTB plasmatico non sia inferiore alla coltura MTB su BALF e alla PCR in pazienti diagnostici con striscio negativo sottoposti a broncoscopia.<\/p>