Влияние пародонтологического лечения на воспалительные белки при заболеваниях пародонта

Новые сведения о первой линии иммунного ответа на сигналы инфекции и стресса на клеточном уровне свидетельствуют об участии цитоплазматических нуклеотидсвязывающих доменоподобных рецепторов, содержащих мультибелковые комплексы, называемые инфламмасомами. Инфламмасомы играют ключевую роль во врожденном иммунитете, регулируя созревание провоспалительных цитокинов интерлейкинов 1бета и 18. Воспаление зависит от сборки сенсора, например, белка, содержащего пириновый домен семейства nod-рецепторов (NLRP), с адаптером, ассоциированным с апоптозом пятнышкообразным белком, содержащим домен рекрутирования каспазы (ASC), позволяющий рекрутировать и активировать воспалительную каспаза-1. Хотя были описаны различные воспаления, наиболее интенсивно изучался мультибелковый комплекс NLRP3/ASC/каспаза-1, известный как воспаление NLRP3.

Размер выборки был рассчитан на основе предыдущего исследования, посвященного уровням белков комплекса воспалительных заболеваний при заболеваниях пародонта. значение=0,05, и 83% мощности. Таким образом, в выборку исследования вошли в общей сложности 45 пациентов (15 пациентов с пародонтологически здоровыми, 15 с гингивитом, 15 с пародонтитом стадии III степени C). Клиническое пародонтологическое обследование всего рта включало измерение глубины зондирования (PPD), уровня клинического прикрепления (CAL), наличия кровотечения при зондировании (BOP), десневого индекса (GI) и индекса зубного налета (PI) в 6 участках на зуб, за исключением третьи моляры. Наличие и тип потери альвеолярной кости оценивались на цифровой панорамной рентгенограмме у каждого участника, которая при необходимости дополнялась периапикальными рентгенограммами. Пародонтальный статус каждого пациента оценивался одним калиброванным пародонтологом с помощью ручного датчика. Диагноз пародонтита или здоровья пародонта был установлен в соответствии с данными Всемирного семинара по классификации заболеваний и состояний пародонта и периимплантатов 2017 года. У здоровых пародонтологов (n=15) в контрольной группе не было участков с PD >3 мм и CAL >2 мм, а также не было рентгенологических признаков потери альвеолярной кости. ПБП составлял <10% во всей полости рта. Здоровая группа также не имела в анамнезе пародонтита. Пациенты с гингивитом имели ПД<3 мм, пародонт интактный, рентгенологически отсутствие деструкции альвеолярной кости и BOP>10%. У пациента стадии III степени C наблюдалась клиническая потеря прикрепления (CAL) ≥ 5, рентгенологическая потеря костной массы (RBL), распространяющаяся на среднюю треть корня и далее, потеря ≤ 4 зубов из-за пародонтита, процент потери костной массы по возрасту> 1.

Лечение Набранные пациенты с пародонтитом и гингивитом получали традиционное квадрантное масштабирование и планирование корня (SRP). SRP выполнялся одним и тем же врачом с использованием ультразвуковых насадок и ручных пародонтальных кюрет. Повторные оценки проводились через 1 и 3 месяца после завершения SRP. Никакого пародонтологического вмешательства не проводилось у пациентов с пародонтологически здоровым контролем.

Отбор проб слюны и сыворотки. Всего 5 мл нестимулированной цельной слюны собирали методом пассивного слюнотечения между 9:00 и 10:00 утра. Участникам посоветовали избегать употребления пищи в течение трех часов перед сбором образцов. Участники сидели вертикально и собирали слюну в течение 5 минут с инструкциями собирать слюну на дне рта и пассивно спускать ее в стерильный стеклянный стакан. Образцы слюны центрифугировали при 5000 об/мин в течение 10 минут при комнатной температуре, супернатанты собирали и хранили при -80°С. Из локтевой ямки методом венепункции было собрано 5 мл крови. Сыворотку из крови выделяли центрифугированием при 3000 об/мин в течение 20 мин с последующим быстрым переносом ее в стерильную полипропиленовую пробирку и хранением при -80°С.

Биомаркерный иммуноанализ: Образцы сыворотки и слюны на содержание IL-1beta, IL-18, NLRP3, ASC и каспазы-1 измеряли с помощью ELISA с использованием коммерческих наборов.

Статистический анализ. Все статистические анализы проводились с использованием стандартного пакета статистического программного обеспечения. Для внутригрупповых сравнений, если данные обычно не были нарушены, использовали тест Фридмана и тест Данна с поправкой Бонферрони для анализа изменений между исходным уровнем и через 1 и 3 месяца после лечения. Для межгрупповых сравнений используйте U-критерий Манна-Уитни для нормально и ненормально нарушенных данных. Тест ранговой корреляции Спирмена использовался для выявления корреляций биохимических показателей с клиническими параметрами и друг с другом в группе больных до и после лечения. Все тесты проводились при уровне значимости P <0,05.