Effect van parodontale behandeling op inflammasoomeiwitten bij parodontitis

Nieuwe inzichten in de eerste lijn van de immuunrespons op infectie- en stresssignalen op cellulair niveau hebben de deelname gerapporteerd van cytoplasmatische nucleotide-bindende domeinachtige receptoren die multi-eiwitcomplexen bevatten die inflammasomen worden genoemd. De inflammasomen spelen een sleutelrol bij de aangeboren immuniteit door de rijping van pro-inflammatoire cytokines van de interleukine 1beta en 18 te reguleren. Het inflammasoom is afhankelijk van de assemblage van een sensor, bijvoorbeeld een knikachtig receptorfamilie-pyrinedomeinbevattend eiwit (NLRP), met een adapter, apoptose-geassocieerd vlekachtig eiwit dat een caspase-rekruteringsdomein (ASC) bevat, waardoor rekrutering en activering van een inflammatoire stof mogelijk is. caspase-1. Hoewel er verschillende inflammasomen zijn beschreven, is het NLRP3/ASC/caspase-1 multi-eiwitcomplex, bekend als NLRP3-inflammasoom, het meest intensief bestudeerd.

De steekproefgrootte werd berekend op basis van een eerder onderzoek naar niveaus van inflammasoomcomplexeiwitten bij parodontale ziekten. Om schattingen op een optimaal nauwkeurigheidsniveau te houden, de impact van uitsluitingen en uitval te minimaliseren, en significante verschillen in resultaten vast te stellen met een betrouwbaarheidsniveau van 95%, heeft alfa waarde=0,05, en 83% power. Daarom omvatte de onderzoeksgroep in totaal 45 patiënten (15 parodontaal gezonde, 15 gingivitis, 15 fase III graad C parodontitis). Het klinische parodontale onderzoek van de hele mond omvatte het meten van de sondediepte (PPD), het klinische hechtingsniveau (CAL), de aanwezigheid van bloedingen bij sonderen (BOP), de gingivale index (GI) en de plaque-index (PI) op 6 plaatsen per tand, behalve de derde kiezen. De aanwezigheid en het type alveolair botverlies werden bij elke deelnemer beoordeeld op de digitale panoramische röntgenfoto, die indien nodig werd aangevuld met periapicale röntgenfoto's. De parodontale status van elke patiënt werd geëvalueerd door een enkele gekalibreerde parodontoloog met een handmatige sonde. De diagnose parodontitis of parodontale gezondheid werd vastgesteld volgens de World Workshop on Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases and Condities van 2017. Parodontaal gezonde individuen (n=15) in de controlegroep hadden geen plaatsen met PD >3 mm en CAL >2 mm en ook geen radiografisch bewijs van alveolair botverlies. BOP was <10% in de hele mond. De gezonde groep vertoonde ook geen voorgeschiedenis van parodontitis. Patiënten met gingivitis hadden een PD≤3 mm, intact parodontium, geen vernietiging van het alveolaire bot op röntgenfoto’s en een BOP>10%. Stadium III graad C-patiënt had klinisch hechtingsverlies (CAL) ≥ 5, radiografisch botverlies (RBL) dat zich uitstrekte tot het middelste derde deel van de wortel en verder, ≤ 4 tandverlies als gevolg van parodontitis, het percentage botverlies per leeftijd is > 1.

Behandeling De gerekruteerde parodontitis- en gingivitispatiënten kregen conventionele kwadrant-scaling en rootplanning (SRP). SRP werd uitgevoerd door dezelfde arts met behulp van ultrasone inserts en handmatige parodontale curettes. Herevaluaties werden uitgevoerd 1 en 3 maanden na voltooiing van het SRP. Bij de parodontaal gezonde controles werd geen parodontale interventie uitgevoerd.

Speeksel- en serummonstername Tussen 9.00 en 10.00 uur werd in totaal 5 ml ongestimuleerd speeksel verzameld via de passieve kwijlmethode. De deelnemers werd geadviseerd om drie uur vóór de monstername geen voedsel te consumeren. De deelnemers zaten rechtop en speeksel werd gedurende een periode van 5 minuten verzameld met instructies om speeksel in de mondbodem te verzamelen en het passief in een steriele glazen beker te laten kwijlen. De speekselmonsters werden gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur bij 5000 rpm gecentrifugeerd en de supernatanten werden verzameld en bij -80°C bewaard. Er werd in totaal 5 ml bloed uit de antecubitale fossa verzameld door middel van een venapunctiemethode. Serum werd uit het bloed geïsoleerd door 20 minuten centrifugeren bij 3000 rpm, gevolgd door snelle overdracht naar een steriele polypropyleenbuis en opslag bij -80°C.

Biomarker-immunoassays: Serum- en speekselmonsters van IL-1beta, IL-18, NLRP3, ASC en Caspase-1 werden gemeten met ELISA met behulp van commerciële kits.

Statistische analyse Alle statistische analyses zijn uitgevoerd met het standaard statistische softwarepakket. Voor de intragroepvergelijkingen werden, als de gegevens normaal gesproken niet verstoord waren, de Friedman-test en de Dunn-test met de Bonferroni-correctie gebruikt om de verandering tussen de uitgangswaarde en 1 maand en 3 maanden na de behandeling te analyseren. Voor vergelijkingen tussen groepen wordt de Mann-Whitney U-test uitgevoerd voor normaal en niet-normaal verstoorde gegevens. De Spearman's rangcorrelatietest werd gebruikt om de correlaties van biochemische parameters met klinische parameters en elkaar in de zieke groep voor en na de behandeling te detecteren. Alle tests werden uitgevoerd op een significantieniveau van P <0,05.