Эндокринные разрушители в слюне, выделяемой из шин при бруксизме.

ОПИСАНИЕ:

Это проспективное аналитическое наблюдательное аналитическое экспериментальное пилотное исследование с целью анализа веществ, вызывающих особую озабоченность, и эндокринных разрушителей, обнаруженных в слюне, выделяемой обычными стоматологическими устройствами, до и после вмешательства. Таким образом, это будут парные образцы, где контрольная группа будет одним и тем же субъектом, что сводит к минимуму независимые переменные: pH слюны, микробиом, слюноотделение, привычки, износ окклюзии, эрозию под воздействием внешних факторов и слюну.

Забор слюны будет осуществляться согласно общепринятому протоколу РД 1716/2011. Контейнеры для слюны будут соответствовать требованиям ISO 6717:2021. Они должны быть упакованы и транспортированы в соответствии с протоколом Приказа JUS/1291/2010 от 13 мая. Все образцы должны быть идентифицированы по номеру, присвоенному добровольцу, времени, материалу и типу производства (обработанные, механические или напечатанные) и отправлены в Химический институт энергетики и окружающей среды (IQUEMA). Университета Кордовы, где они будут проанализированы группой SAC для последующей статистической обработки и интерпретации.

НАСЕЛЕНИЕ И ВЫБОРОЧНЫЙ РАСЧЕТ. Образец будет получен от пациентов, зарегистрированных в базе данных поликлиники Европейского университета Мадрида, которые запросят шину типа Мичиган для лечения бруксизма, изготовленную из акрила, изготовленную двумя обычными способами: напечатанным или инъекционным. , в соответствии с критериями включения и исключения, указанными в Приложении I. Поскольку образцы обрабатываются с помощью инновационной методики в области стоматологии, например суперрастворителей, это пилотное исследование, в котором формируются две группы по 15 участников в каждой, в зависимости от процесса изготовления шины: инъекционный или печатный, всего 30 волонтеров.

ПЕРИОД ИССЛЕДОВАНИЯ Ожидается, что набор участников будет завершен в январе 2024 года, а сбор образцов - в сентябре 2024 года.

НАБОР ВОЛОНТЕРОВ:

Исследовательские группы будут сформированы в соответствии с требованиями и критериями включения. Каждый из субъектов будет проинформирован о цели и методологии проекта посредством информационного документа для волонтеров (Приложение II) и должен подписать форму информированного согласия, предоставленную для этой цели (Приложение III); они могут уйти в отставку в любое время для участия в проекте. Данные участников будут храниться в медицинской карте с индивидуальным номером ключа в соответствии с положениями действующего Органического закона 3/2018 от 5 декабря о защите персональных данных.

Назначения будут производиться следующим образом:

ПРИЕМ 1: У пациента собирают обычный компьютеризированный анамнез, в котором собираются данные об общем состоянии здоровья, рото-лицевой области, пищевых привычках и гигиенических привычках. Подробно объясняем, в чем состоит лечение: Релаксационная шина типа Мичиган (устройство для предотвращения стирания зубов из-за бруксизма). Каждое вмешательство регулируется научными и деонтологическими критериями с соблюдением всех этических правил исследования. Ниже приводится подробное описание исследования, его продолжительности и методологии. Будут объяснены четыре момента сбора слюны: до, во время, через 3 и 6 месяцев после установки, а именно:

• Момент 0: день приема, до вмешательства.
• Время 1: день приема, установка устройства.
• Временной момент 2: 3 месяца после установки устройства.
• Время 3: 6 месяцев после лечения.

Информация и информированное согласие будут предоставлены.

Приём 2: Подготовка и изготовление моделей для шины Мичиганского типа по общепринятому протоколу данного лечения.

ВСТРЕЧА 3: Модели будут собраны в артикуляторе для отправки и запроса на изготовление шины с указанием, будет ли она вставлена ​​или напечатана.

ВНИМАНИЕ 4: Для этого в устройстве будет взят образец слюны. После проверки правильности прилегания и фиксации аппарат будет установлен и с помощью наконечника, обычных акриловых и полировальных боров будет произведена окклюзионная корректировка. После завершения процедуры необходимо взять новый образец слюны. Образцы должны быть идентифицированы кодом, присвоенным пациенту, и храниться в соответствии с общепринятыми стандартами. Запись на прием будет назначена через 6 месяцев для продолжения исследования и в соответствии со сроками проверки надлежащего здоровья полости рта.

ПРИЕМ 5: Будет проведен внутриротовой осмотр, проверяющий здоровье полости рта и состояние шины с соответствующими корректировками в соответствии с общепринятым протоколом. Будет взят новый образец слюны. Пациент будет осмотрен через 3 месяца.

ПРИЕМ 6: Будет проведен внутриротовой осмотр, проверяющий здоровье полости рта и состояние шины с соответствующими корректировками в соответствии с общепринятым протоколом. Будет взят новый образец слюны. Период сбора образцов для этого субъекта закончится.

Ранее в лаборатории будут идентифицированы вещества, выделяемые конкретным материалом, из которого изготовлены устройства. Причиной этого является очень динамичный характер рынка стоматологических материалов. С этой целью растворы будут проанализированы с помощью жидкостной хроматографии с масс-спектрометром (LC-HRMS). Идентификация присутствующих соединений будет основана на подходе ненаправленного скрининга подозреваемых, сравнивающем результаты, полученные в ходе анализов, с уже существующими для соединений, включенных в список подозрительных. Этот список будет составлен на основе информации, собранной в ходе обзора литературы, среди других источников. Таким образом, он будет варьироваться от соединений, присутствие которых ожидается, например тех, которые указаны производителем, до новых соединений, которые могут присутствовать в зависимости от условий хранения, использования и т. д. Для идентификации будут использоваться статистические и хемометрические методы для установления корреляции между аналитическими сигналами, полученными с помощью LC-HRMS, и информацией (например, массы, структура, масс-спектры и т. д.), доступные в библиографии и общедоступных спектрофотометрических библиотеках (например, Масс Банк). На втором этапе соединения, выявленные на первом этапе, будут расставлены по приоритету в соответствии с уровнем их идентификации, частотой обнаружения, токсичностью (если она известна) и наличием аналитических стандартов. Наконец, будет проведена количественная оценка этих соединений.

Таким образом, зная возможные выявленные элементы, можно обработать образцы слюны. Это осуществляют с использованием летучего супрамолекулярного растворителя, спонтанно синтезированного добавлением гексанола и тетрагидрофурана. Методика, которой необходимо следовать, такая же, как описано ранее на этапе in vitro.

Зависимые переменные: вещества, вызывающие особую озабоченность, и вещества, нарушающие работу эндокринной системы. Независимые переменные: обычное место жительства, тип производства (печатное или инжекционное), время, возраст, тип полимеризации.

После идентификации и количественного определения обнаруженных веществ данные будут собраны в базе данных с информацией о добровольцах (ПРИЛОЖЕНИЕ IV).

Наконец, результаты будут проанализированы и сопоставлены с результатами, полученными на этапе экспериментальной лаборатории, а также с возможными участвующими переменными: возрастом, типом производства и привычками участника.