Bedömning av HIV CNS-reservoaren, neurologiska och neurokognitiva effekter och källan till återhämtning av HIV i CNS

1. Klinisk 1.1 Neurologisk undersökning: SEARCH använder den AIDS Clinical Trials Group (ACTG)-härledd HIV makroneurologisk undersökning, en läkare bedömd symptombedömning av kognitiva egenskaper som är typiska för HIV-associerad neurokognitiv störning (HAND) och perifer neuropati.

   1.2 Neuropsykologiska bedömningar: SEARCH använder det neurokognitiva HIV-batteriet som ursprungligen utvecklades av Maj et al. designad för att minimera kulturell fördom och testad i Bangkok. Alla försökspersoner kommer att ha hela SEARCH-batteriet som tidigare publicerats, och undviker utvärderingar efter invasiva procedurer. Alla tester genomförs av legitimerade sjuksköterskor-psykometrister. Data jämförs med en normativ uppsättning av 500 HIV-negativa, friska thailändare som bor i samhället och stratifieras efter ålder och utbildningsnivå för att definiera standardiserade z-poäng. En psykiatrisk inventering speglar det som användes för RV254 och har breda thailändska validitetsdata, och forskningssjuksköterskor utför en funktionsbedömning baserad på Clinical Dementia Scale.

   1.3 Lumbalpunktion: Lumbalpunktion utförs enligt kliniska standardprocedurer med en Sprotte®-nål för att minimera komplikationer. Standardbedömningar av CSF och serum, protein och cellantal är klara och cirka 20 cc samlas in och ultracentrifugeras. Cellpellets av CSF kommer att kryokonserveras för framtida potentiella studier, med försökspersonens samtycke. Supernatanter delas upp i 0,5 cc alikvoter och fryses till -80oC samma dag. CSF VDRL/RPR kommer att bedömas vid baslinjen för de med positiv serologi i SEARCH 019 och i uppföljning om en ny positiv serologi rapporteras i SEARCH 019 eller om patienten var CSF-positiv vid baslinjen. Sjukhusinläggning för deltagare för eventuella forskningsrelaterade biverkningar som kräver intagning kommer att ordnas vid behov.

   1.4 Neuro-imaging: Avbildningsstudier kommer att utföras på Chulalongkorn University Hospital som ligger 100 meter från TRCARC i Bangkok. Dessa studier kommer att ta upp till en timmes maximala MRT-skannertid för varje försöksperson och kan inkludera hjärn-MRT, MRS, DTI och funktionell MRT i vilotillstånd (fMRI). MRT och MRS är icke-invasiva metoder för att upptäcka hjärnpatologi (MRT) och för att bestämma in vivo-koncentrationen av hjärnans metaboliter (MRS). DTI är en känslig icke-invasiv magnetisk resonansteknik för att analysera den tredimensionella diffusionen av vatten i hjärnvävnad. Diffusionen av vatten i hjärnan är starkt beroende av den underliggande mikroarkitekturen hos den omgivande vävnaden, som påverkas av både normala fysiologiska processer (såsom åldrande) såväl som lokala neuropatologiska sjukdomsprocesser, såsom de som ses med HIV-infektion. Funktionell MRT i vilotillstånd (fMRI) avslöjar mönster för aktivering av hjärnnätverk och är ett känsligt mått på hjärnans funktion före strukturella och anatomiska förändringar som upptäcks med andra metoder. Gadolinium kommer inte att användas för forskningsändamål.

2. Laboratorium (alla relaterade till CSF)

2.1 Mätning av lösliga markörer: Kommersiella ELISA-kit (Human Quantikine ELISA-kit; R&D Systems, Inc.) och Millipore Luminex-analyser kommer att användas enligt tillverkarens instruktioner vid Yale Immune Monitoring Core Laboratory. Lösliga biomarkörer associerade med immunaktivering och neurokognitiv försämring kommer att mätas, inklusive CSF-neopterin, MCP-1, sCD14, IL-6, sCD163 och IP-10.

2.2 CSF-virologianalyser: HIV RNA-standardkvantifiering kommer att slutföras med Roche COBAS/Amplicor HIV-1 Viral Load v2.0-analysen, med en nedre kvantifieringsgräns på 20 cps/ml. Single Copy Assay (SCA) Kvantifiering av HIV RNA i ART-miljön kommer att utföras med 5-10 ml CSF. Dessutom kommer cellassocierat HIV-DNA (totalt, integrerat och 2LTR-cirklar i totalt CD4+ T-celler att bedömas vid CRC-CHUM.

2.3 TCR-repertoar och aviditet av HIV-specifika CD8+ T-celler i CSF: Dessa kan mätas i en undergrupp av prover vid VGTI Florida. För repertoaranalysen kommer CSF-cellpellets att expanderas polyklonalt, och TCR-repertoaren kommer att bestämmas följt av TCR-sekvensering som tidigare beskrivits. För TCR-aviditet kommer T-cellkloner som motsvarar de dominerande klontyperna att genereras in vitro för att mäta deras funktionella känslighet. De HIV-specifika CD8+ T-cellsklonerna som genereras genom expansion i närvaro av PHA, IL-2 och bestrålade matare kommer att sekvenseras för deras TCR och kommer att testas för deras TCR funktionella känslighet.

2.4 Hantering av försökspersoner som återupptar ART: Om beslutet fattas att återuppta ART enligt SEARCH 019 ART-återupptagandekriterierna, kommer studiebesöket före ART-återupptagandet att betraktas som det här studiens sista besök och alla procedurer som är schemalagda för studiens slut kommer att utföras vid det besök.