Beoordeling van het hiv-CZS-reservoir, neurologische en neurocognitieve effecten en bron van rebound HIV in het CZS

1. Klinisch 1.1 Neurologisch onderzoek: SEARCH maakt gebruik van de AIDS Clinical Trials Group (ACTG)-afgeleid HIV-macroneurologisch onderzoek, een door een arts beoordeelde symptomenbeoordeling van cognitieve kenmerken die kenmerkend zijn voor HIV-geassocieerde neurocognitieve stoornis (HAND) en perifere neuropathie.

   1.2 Neuropsychologische beoordelingen: SEARCH maakt gebruik van de hiv-neurocognitieve batterij die oorspronkelijk is ontwikkeld door Maj et al. ontworpen om culturele vooringenomenheid te minimaliseren en getest in Bangkok. Alle proefpersonen hebben de volledige SEARCH-batterij zoals eerder gepubliceerd, waardoor evaluaties na invasieve procedures worden vermeden. Alle testen worden uitgevoerd door gediplomeerde verpleegkundig psychometristen. De gegevens worden vergeleken met een normatieve set van 500 hiv-negatieve, gezonde, thuiswonende Thais en gestratificeerd naar leeftijd en opleidingsniveau om gestandaardiseerde z-scores te definiëren. Een psychiatrische inventaris weerspiegelt die gebruikt voor RV254 en heeft brede Thaise validiteitsgegevens, en onderzoeksverpleegkundigen voeren een functionele beoordeling uit op basis van de Clinical Dementia Scale.

   1.3 Lumbale punctie: Lumbale punctie wordt uitgevoerd volgens standaard klinische procedures met behulp van een Sprotte®-naald (potloodpunt) om complicaties te minimaliseren. Standaardbeoordelingen van CSF en serum-, eiwit- en celtelling worden voltooid en ongeveer 20 cc wordt verzameld en ultragecentrifugeerd. Celpellets van CSF zullen worden ingevroren voor toekomstige potentiële studies, met toestemming van de proefpersoon. Supernatanten worden verdeeld in aliquots van 0,5 cc en op dezelfde dag ingevroren tot -80oC. CSF VDRL/RPR zal worden beoordeeld bij baseline voor degenen met positieve serologie in SEARCH 019 en in de follow-up als een nieuwe positieve serologie wordt gemeld in SEARCH 019 of als de proefpersoon CSF-positief was bij baseline. Indien nodig wordt ziekenhuisopname van de deelnemer geregeld voor onderzoeksgerelateerde bijwerkingen die opname vereisen.

   1.4 Neuro-imaging: Imaging-onderzoeken zullen worden uitgevoerd in het Chulalongkorn University Hospital, op 100 meter van het TRCARC in Bangkok. Deze onderzoeken nemen maximaal één uur MRI-scannertijd in beslag voor elk onderwerp en kunnen hersen-MRI, MRS, DTI en functionele MRI in rusttoestand (fMRI) omvatten. MRI en MRS zijn niet-invasieve methoden om hersenpathologie (MRI) op te sporen en om de in vivo concentratie van hersenmetabolieten (MRS) te bepalen. DTI is een gevoelige niet-invasieve magnetische resonantietechniek om de driedimensionale diffusie van water in hersenweefsel te analyseren. De diffusie van water in de hersenen is sterk afhankelijk van de onderliggende microarchitectuur van het omringende weefsel, die wordt beïnvloed door zowel normale fysiologische processen (zoals veroudering) als lokale neuropathologische ziekteprocessen, zoals die worden gezien bij HIV-infectie. Resting state functionele MRI (fMRI) onthult activeringspatronen van hersennetwerken en is een gevoelige maatstaf voor de hersenfunctie voorafgaand aan structurele en anatomische veranderingen die door andere methoden worden gedetecteerd. Gadolinium zal niet worden gebruikt voor onderzoeksdoeleinden.

2. Laboratorium (allemaal met betrekking tot CSF)

2.1 Meting van oplosbare markers: commerciële ELISA-kits (Human Quantikine ELISA-kits; R&D Systems, Inc.) en Millipore Luminex-assays zullen worden gebruikt volgens de instructies van de fabrikant in het Yale Immune Monitoring Core Laboratory. Oplosbare biomarkers geassocieerd met immuunactivering en neurocognitieve stoornissen zullen worden gemeten, waaronder CSF-neopterine, MCP-1, sCD14, IL-6, sCD163 en IP-10.

2.2 CSF-virologietesten: HIV-RNA-standaardkwantificering zal worden voltooid met behulp van de Roche COBAS/Amplicor HIV-1 Viral Load v2.0-assay, met een ondergrens voor kwantificering van 20 cps/ml. Single Copy Assay (SCA) HIV-RNA-kwantificering in de setting van ART zal worden uitgevoerd met 5-10 ml CSF. Daarnaast zullen cel-geassocieerde HIV-DNA (totaal, geïntegreerd en 2LTR-cirkels in totaal CD4+ T-cellen worden beoordeeld bij CRC-CHUM.

2.3 TCR-repertoire en gretigheid van HIV-specifieke CD8+ T-cellen in CSF: deze kunnen worden gemeten in een subset van monsters bij VGTI Florida. Voor de repertoire-assay zullen CSF-celpellets polyklonaal worden geëxpandeerd en zal het TCR-repertoire worden bepaald, gevolgd door TCR-sequencing zoals eerder beschreven. Voor TCR-aviditeit zullen T-celklonen overeenkomend met de dominante clonotypes in vitro gegenereerd worden om hun functionele gevoeligheid te meten. De HIV-specifieke CD8+ T-celklonen die worden gegenereerd door expansie in aanwezigheid van PHA, IL-2 en bestraalde feeders zullen worden gesequenced op hun TCR en zullen worden getest op hun TCR-functionele gevoeligheid.

2.4 Beheer van proefpersonen die ART hervatten: Als de beslissing wordt genomen om ART opnieuw te starten volgens SEARCH 019 ART-hervattingscriteria, wordt het studiebezoek vóór hervatting van ART beschouwd als het laatste bezoek van deze studie en zullen alle procedures die zijn gepland voor het einde van de studie op dat moment worden uitgevoerd bezoek.