HIV:n keskushermoston säiliön, neurologisten ja neurokognitiivisten vaikutusten ja rebound-HI-viruksen lähteen arviointi keskushermostossa

1. Kliininen 1.1 Neurologinen tutkimus: SEARCH käyttää AIDS Clinical Trials Group (ACTG) -peräistä HIV-makroneurologista tutkimusta, lääkärin arvioimaa oireiden arviointia kognitiivisista piirteistä, jotka ovat tyypillisiä HIV:hen liittyvälle neurokognitiiviselle häiriölle (HAND) ja perifeeriselle neuropatialle.

   1.2 Neuropsykologiset arvioinnit: SEARCH käyttää HIV:n neurokognitiivista paristoa, jonka alun perin ovat kehittäneet Maj et al. suunniteltu minimoimaan kulttuurinen harha ja testattu Bangkokissa. Kaikilla koehenkilöillä on täysi SEARCH-akku, kuten aiemmin on julkaistu, välttäen invasiivisten toimenpiteiden jälkeisiä arviointeja. Kaikki testit suorittavat sertifioidut sairaanhoitaja-psykometrit. Tietoja verrataan 500 HIV-negatiivisen, terveen, yhteisössä asuvan thaimaalaisen normatiiviseen joukkoon ja ositettu iän ja koulutustason mukaan standardoitujen z-pisteiden määrittämiseksi. Psykiatrinen kartoitus heijastaa RV254:ssä käytettyä ja laajaa thaimaalaista validiteettitietoa, ja tutkimushoitajat suorittavat toiminnallisen arvioinnin kliinisen dementia-asteikon perusteella.

   1.3 Lannepunktio: Lannepunktiot suoritetaan kliinisten standarditoimenpiteiden mukaisesti käyttämällä Sprotte®-neulaa (kynäkärkinen) komplikaatioiden minimoimiseksi. Aivo-selkäydinnesteen ja seerumin, proteiinien ja solujen lukumäärän standardiarvioinnit saatetaan päätökseen ja noin 20 cm3 kerätään ja ultrasentrifugoidaan. CSF-solupelletit kylmäsäilytetään tulevia mahdollisia tutkimuksia varten koehenkilön suostumuksella. Supernatantit jaetaan 0,5 cc:n eriin ja pakastetaan -80 oC:seen samana päivänä. CSF VDRL/RPR arvioidaan lähtötilanteessa niille, joilla on positiivinen serologia SEARCH 019:ssä, ja seurannassa, jos SEARCH 019:ssä ilmoitetaan uusi positiivinen serologia tai jos kohde oli CSF-positiivinen lähtötilanteessa. Osallistujien sairaalahoito mahdollisten tutkimukseen liittyvien haittatapahtumien vuoksi, jotka edellyttävät vastaanottoa, järjestetään tarvittaessa.

   1.4 Neurokuvantaminen: Kuvantamistutkimukset suoritetaan Chulalongkorn University Hospitalissa, joka sijaitsee 100 metrin päässä TRCARC:sta Bangkokissa. Nämä tutkimukset kestävät enintään yhden tunnin MRI-skannausajan kullekin kohteelle ja voivat sisältää aivojen MRI:n, MRS:n, DTI:n ja lepotilan toiminnallisen MRI:n (fMRI). MRI ja MRS ovat ei-invasiivisia menetelmiä aivopatologian (MRI) havaitsemiseksi ja aivojen metaboliittien (MRS) in vivo -pitoisuuden määrittämiseksi. DTI on herkkä ei-invasiivinen magneettiresonanssitekniikka, jolla analysoidaan veden kolmiulotteista diffuusiota aivokudoksessa. Veden diffuusio aivoissa riippuu suuresti ympäröivän kudoksen taustalla olevasta mikroarkkitehtuurista, johon vaikuttavat sekä normaalit fysiologiset prosessit (kuten ikääntyminen) että paikalliset neuropatologiset sairausprosessit, kuten HIV-infektion yhteydessä havaitut. Lepotilan toiminnallinen MRI (fMRI) paljastaa aivoverkostojen aktivaatiomalleja ja on herkkä aivojen toiminnan mitta ennen muilla menetelmillä havaittuja rakenteellisia ja anatomisia muutoksia. Gadoliniumia ei käytetä tutkimustarkoituksiin.

2. Laboratorio (kaikki liittyvät CSF:ään)

2.1 Liukoisten markkerien mittaus: Kaupallisia ELISA-pakkauksia (Human Quantikine ELISA -sarjat; R&D Systems, Inc.) ja Millipore Luminex -määrityksiä käytetään valmistajan ohjeiden mukaisesti Yale Immune Monitoring Core Laboratoryssa. Immuuniaktivaatioon ja neurokognitiiviseen heikkenemiseen liittyvät liukoiset biomarkkerit mitataan, mukaan lukien CSF-neopteriini, MCP-1, sCD14, IL-6, sCD163 ja IP-10.

2.2 CSF-virologia-määritykset: HIV-RNA:n standardikvantitointi suoritetaan Roche COBAS/Amplicor HIV-1 Viral Load v2.0 -määrityksen avulla, kvantitoinnin alarajalla 20 cps/ml. Single Copy Assay (SCA) HIV-RNA:n kvantitointi ART:n yhteydessä suoritetaan käyttämällä 5-10 ml CSF:ää. Lisäksi soluun liittyvä HIV-DNA (kokonais-, integroitunut ja 2LTR-ympyrät CD4+-T-solujen kokonaismäärässä arvioidaan CRC-CHUM:ssa.

2.3 HIV-spesifisten CD8+ T-solujen TCR-valikoima ja aviditeetti CSF:ssä: Nämä voidaan mitata näytteiden osajoukosta VGTI Floridassa. Repertuaarimääritystä varten CSF-solupelletit laajennetaan polyklonaalisesti, ja TCR-valikoima määritetään, mitä seuraa TCR-sekvensointi, kuten aiemmin on kuvattu. TCR-aviditeettia varten T-solukloonit, jotka vastaavat hallitsevia klonotyyppejä, luodaan in vitro niiden toiminnallisen herkkyyden mittaamiseksi. HIV-spesifiset CD8+ T-solukloonit, jotka on tuotettu laajentamalla PHA:n, IL-2:n ja säteilytettyjen syöttöaineiden läsnä ollessa, sekvensoidaan TCR:n suhteen ja niiden TCR:n toiminnallinen herkkyys testataan.

2.4 ART-hoitoa jatkavien koehenkilöiden hallinta: Jos ART-hoito päätetään aloittaa uudelleen SEARCH 019 ART:n jatkamiskriteerien mukaisesti, opintokäyntiä ennen ART-hoidon jatkamista pidetään tämän tutkimuksen viimeisenä vierailuna ja kaikki tutkimuksen päättymiseen suunnitellut toimenpiteet suoritetaan kyseisessä vaiheessa. vierailla.