Valutazione del serbatoio dell'HIV nel sistema nervoso centrale, effetti neurologici e neurocognitivi e fonte di rimbalzo dell'HIV nel sistema nervoso centrale

1. Clinica 1.1 Esame neurologico: SEARCH utilizza l'esame macroneurologico dell'HIV derivato dall'ACTG (AIDS Clinical Trials Group), una valutazione dei sintomi valutati dal medico delle caratteristiche cognitive tipiche del disturbo neurocognitivo associato all'HIV (HAND) e della neuropatia periferica.

   1.2 Valutazioni neuropsicologiche: SEARCH impiega la batteria neurocognitiva dell'HIV originariamente sviluppata da Maj et al. progettato per ridurre al minimo i pregiudizi culturali e testato a Bangkok. Tutti i soggetti avranno la batteria RICERCA completa come precedentemente pubblicata, evitando valutazioni a seguito di procedure invasive. Tutti i test sono completati da psicometristi infermieri certificati. I dati vengono confrontati con un set normativo di 500 thailandesi HIV-negativi, sani, residenti in comunità e stratificati per età e livello di istruzione per definire punteggi z standardizzati. Un inventario psichiatrico rispecchia quello usato per RV254 e ha ampi dati di validità thailandesi, e gli infermieri di ricerca eseguono una valutazione funzionale basata sulla scala della demenza clinica.

   1.3 Puntura lombare: le punture lombari vengono completate secondo le procedure cliniche standard utilizzando un ago Sprotte® (a punta di matita) per ridurre al minimo le complicanze. Le valutazioni standard del liquido cerebrospinale e del siero, delle proteine ​​e della conta cellulare sono completate e circa 20 cc vengono raccolti e ultracentrifugati. I pellet cellulari di CSF saranno crioconservati per futuri potenziali studi, con il consenso del soggetto. I supernatanti vengono divisi in aliquote da 0,5 cc e congelati a -80°C lo stesso giorno. CSF VDRL/RPR sarà valutato al basale per quelli con sierologia positiva in SEARCH 019 e nel follow-up se viene segnalata una nuova sierologia positiva in SEARCH 019 o se il soggetto era CSF positivo al basale. Se necessario, sarà organizzato il ricovero ospedaliero del partecipante per eventuali eventi avversi correlati alla ricerca che richiedono il ricovero.

   1.4 Neuro-imaging: gli studi di imaging saranno eseguiti presso il Chulalongkorn University Hospital che si trova a 100 metri dal TRCARC di Bangkok. Questi studi richiederanno fino a un'ora di scansione MRI massima per ogni soggetto e possono includere MRI cerebrale, MRS, DTI e MRI funzionale a riposo (fMRI). MRI e MRS sono metodi non invasivi per rilevare la patologia cerebrale (MRI) e per determinare la concentrazione in vivo dei metaboliti cerebrali (MRS). DTI è una tecnica di risonanza magnetica sensibile non invasiva per analizzare la diffusione tridimensionale dell'acqua all'interno del tessuto cerebrale. La diffusione dell'acqua all'interno del cervello dipende fortemente dalla microarchitettura sottostante del tessuto circostante, che è influenzato sia dai normali processi fisiologici (come l'invecchiamento) sia dai processi patologici neuropatologici locali, come quelli osservati con l'infezione da HIV. La risonanza magnetica funzionale dello stato di riposo (fMRI) rivela modelli di attivazione delle reti cerebrali ed è una misura sensibile della funzione cerebrale prima dei cambiamenti strutturali e anatomici rilevati da altri metodi. Il gadolinio non verrà utilizzato per scopi di ricerca.

2. Laboratorio (tutti relativi a CSF)

2.1 Misurazione dei marcatori solubili: i kit ELISA commerciali (kit ELISA Human Quantikine; R&D Systems, Inc.) ei test Millipore Luminex verranno utilizzati seguendo le istruzioni del produttore presso lo Yale Immune Monitoring Core Laboratory. Saranno misurati i biomarcatori solubili associati all'attivazione immunitaria e al deterioramento neurocognitivo, tra cui neopterina CSF, MCP-1, sCD14, IL-6, sCD163 e IP-10.

2.2 Saggi virologici del liquido cerebrospinale: la quantificazione standard dell'HIV RNA sarà completata utilizzando il test Roche COBAS/Amplicor HIV-1 Viral Load v2.0, con un limite inferiore di quantificazione di 20 cps/mL. Single Copy Assay (SCA) La quantificazione dell'HIV RNA nell'ambito della ART sarà eseguita utilizzando 5-10 ml di CSF. Inoltre, l'HIV-DNA associato alle cellule (cerchi totali, integrati e 2LTR nelle cellule T CD4 + totali sarà valutato presso CRC-CHUM.

2.3 Repertorio TCR e avidità delle cellule T CD8+ specifiche dell'HIV nel liquido cerebrospinale: questi possono essere misurati in un sottogruppo di campioni presso il VGTI Florida. Per l'analisi del repertorio, i pellet cellulari di CSF saranno espansi policlonalmente e il repertorio del TCR sarà determinato seguito dal sequenziamento del TCR come descritto in precedenza. Per l'avidità del TCR, cloni di cellule T corrispondenti ai clonotipi dominanti saranno generati in vitro per misurarne la sensibilità funzionale. I cloni di cellule T CD8+ HIV-specifici generati dall'espansione in presenza di PHA, IL-2 e feeders irradiati saranno sequenziati per il loro TCR e testati per la loro sensibilità funzionale al TCR.

2.4 Gestione dei soggetti che riprendono l'ART: se viene presa la decisione di riprendere l'ART secondo i criteri di ripresa dell'ART di SEARCH 019, allora la visita di studio prima della ripresa dell'ART sarà considerata la visita finale di questo studio e tutte le procedure programmate per la fine dello studio saranno condotte in quella visita.