Evaluación del depósito del VIH en el SNC, efectos neurológicos y neurocognitivos y fuente de rebote del VIH en el SNC

1. Clínico 1.1 Examen neurológico: SEARCH emplea el examen macroneurológico del VIH derivado del AIDS Clinical Trials Group (ACTG), una evaluación de síntomas calificada por un médico de las características cognitivas típicas del trastorno neurocognitivo asociado al VIH (HAND) y la neuropatía periférica.

   1.2 Evaluaciones neuropsicológicas: SEARCH emplea la batería neurocognitiva del VIH desarrollada originalmente por Maj et al. diseñado para minimizar el sesgo cultural y probado en Bangkok. Todos los sujetos tendrán la batería SEARCH completa como se publicó anteriormente, evitando evaluaciones después de procedimientos invasivos. Todas las pruebas son realizadas por enfermeras-psicometristas certificadas. Los datos se comparan con un conjunto normativo de 500 tailandeses que viven en la comunidad, sanos y seronegativos al VIH, y se estratifican por edad y nivel educativo para definir puntuaciones z estandarizadas. Un inventario psiquiátrico refleja el utilizado para RV254 y tiene datos de amplia validez tailandesa, y las enfermeras de investigación realizan una evaluación funcional basada en la Escala de demencia clínica.

   1.3 Punción lumbar: las punciones lumbares se realizan según los procedimientos clínicos estándar con una aguja Sprotte® (punta de lápiz) para minimizar las complicaciones. Se completan las evaluaciones estándar de LCR y suero, proteína y recuento de células y se recolectan y ultracentrifugan aproximadamente 20 cc. Los sedimentos de células de LCR se crioconservarán para futuros estudios potenciales, con el consentimiento del sujeto. Los sobrenadantes se dividen en alícuotas de 0,5 cc y se congelan a -80 °C el mismo día. CSF VDRL/RPR se evaluará al inicio para aquellos con serología positiva en SEARCH 019 y en el seguimiento si se informa una nueva serología positiva en SEARCH 019 o si el sujeto fue positivo en LCR al inicio. Si es necesario, se organizará la hospitalización del participante por cualquier evento adverso relacionado con la investigación que requiera admisión.

   1.4 Neuroimagen: los estudios de imagen se realizarán en el Hospital Universitario de Chulalongkorn, que se encuentra a 100 metros del TRCARC en Bangkok. Estos estudios tardarán hasta una hora como máximo en el tiempo del escáner MRI para cada sujeto y pueden incluir MRI cerebral, MRS, DTI y MRI funcional en estado de reposo (fMRI). MRI y MRS son métodos no invasivos para detectar patología cerebral (MRI) y para determinar la concentración in vivo de metabolitos cerebrales (MRS). DTI es una técnica de resonancia magnética no invasiva sensible para analizar la difusión tridimensional del agua dentro del tejido cerebral. La difusión de agua dentro del cerebro depende en gran medida de la microarquitectura subyacente del tejido circundante, que se ve afectada tanto por procesos fisiológicos normales (como el envejecimiento) como por procesos de enfermedades neuropatológicas locales, como las que se observan con la infección por VIH. La resonancia magnética funcional en estado de reposo (fMRI) revela patrones de activación de las redes cerebrales y es una medida sensible de la función cerebral antes de los cambios estructurales y anatómicos detectados por otros métodos. El gadolinio no se utilizará con fines de investigación.

2. Laboratorio (todo lo relacionado con LCR)

2.1 Medición de marcadores solubles: Los kits ELISA comerciales (kits ELISA Human Quantikine; R&D Systems, Inc.) y los ensayos Millipore Luminex se utilizarán siguiendo las instrucciones del fabricante en el Laboratorio central de monitorización inmunitaria de Yale. Se medirán los biomarcadores solubles asociados con la activación inmunitaria y el deterioro neurocognitivo, incluidos la neopterina del LCR, MCP-1, sCD14, IL-6, sCD163 e IP-10.

2.2 Ensayos de virología en LCR: La cuantificación estándar del ARN del VIH se completará con el ensayo Roche COBAS/Amplicor HIV-1 Viral Load v2.0, con un límite inferior de cuantificación de 20 cps/mL. La cuantificación del ARN del VIH en el ensayo de copia única (SCA) en el entorno de ART se realizará utilizando 5-10 ml de LCR. Además, el ADN-VIH asociado a células (círculos total, integrado y 2LTR en células T CD4+ totales) se evaluará en CRC-CHUM.

2.3 Repertorio de TCR y avidez de células T CD8+ específicas del VIH en LCR: Estos pueden medirse en un subconjunto de muestras en VGTI Florida. Para el ensayo de repertorio, los sedimentos de células de LCR se expandirán policlonalmente y el repertorio de TCR se determinará seguido de la secuenciación de TCR como se describió anteriormente. Para la avidez de TCR, se generarán in vitro clones de células T correspondientes a los clonotipos dominantes para medir su sensibilidad funcional. Los clones de células T CD8+ específicas del VIH generados por expansión en presencia de PHA, IL-2 y alimentadores irradiados se secuenciarán para determinar su TCR y se evaluará su sensibilidad funcional para TCR.

2.4 Manejo de sujetos que reanudan el TAR: si se toma la decisión de reiniciar el TAR según los criterios de reanudación del TAR de SEARCH 019, la visita del estudio antes de la reanudación del TAR se considerará la visita final de este estudio y todos los procedimientos programados para el final del estudio se realizarán en ese momento. visita.