Vurdering av HIV CNS-reservoaret, nevrologiske og nevro-kognitive effekter og kilde til rebound HIV i CNS

1. Klinisk 1.1 Nevrologisk undersøkelse: SEARCH benytter AIDS Clinical Trials Group (ACTG)-avledet HIV makronevrologisk undersøkelse, en lege vurdert symptomvurdering av kognitive trekk som er typiske for HIV-assosiert nevrokognitiv lidelse (HAND) og perifer nevropati.

   1.2 Nevropsykologiske vurderinger: SEARCH bruker det HIV-nevrokognitive batteriet som opprinnelig ble utviklet av Maj et al. designet for å minimere kulturell skjevhet og testet i Bangkok. Alle forsøkspersoner vil ha hele SEARCH-batteriet som tidligere publisert, og unngår evalueringer etter invasive prosedyrer. All testing gjennomføres av sertifiserte sykepleier-psykometrister. Data er sammenlignet med et normativt sett med 500 HIV-negative, sunne thaier som bor i lokalsamfunnet og stratifisert etter alder og utdanning for å definere standardiserte z-score. En psykiatrisk inventar speiler det som ble brukt for RV254 og har brede thailandske validitetsdata, og forskningssykepleiere utfører en funksjonsvurdering basert på Clinical Dementia Scale.

   1.3 Lumbalpunksjon: Lumbalpunksjoner utføres i henhold til standard kliniske prosedyrer ved å bruke en Sprotte® (blyantspiss) nål for å minimere komplikasjoner. Standardvurderinger av CSF og serum, protein og celletall fullføres og ca. 20cc samles og ultrasentrifugeres. Cellepelleter av CSF vil bli kryokonservert for fremtidige potensielle studier, med forsøkspersonens samtykke. Supernatanter deles inn i 0,5 cc alikvoter og fryses til -80oC samme dag. CSF VDRL/RPR vil bli vurdert ved baseline for de med positiv serologi i SEARCH 019 og i oppfølging hvis en ny positiv serologi er rapportert i SEARCH 019 eller hvis pasienten var CSF-positiv ved baseline. Sykehusinnleggelse for alle forskningsrelaterte uønskede hendelser som krever innleggelse vil bli arrangert, om nødvendig.

   1.4 Nevro-imaging: Bildestudier vil bli utført ved Chulalongkorn University Hospital som ligger 100 meter fra TRCARC i Bangkok. Disse studiene vil ta opptil én time maksimal MR-skannertid for hvert forsøksperson og kan inkludere hjerne-MR, MRS, DTI og hviletilstand funksjonell MR (fMRI). MR og MRS er ikke-invasive metoder for å oppdage hjernepatologi (MRI) og bestemme in vivo-konsentrasjonen av hjernemetabolitter (MRS). DTI er en sensitiv ikke-invasiv magnetisk resonansteknikk for å analysere den tredimensjonale diffusjonen av vann i hjernevev. Diffusjonen av vann i hjernen er svært avhengig av den underliggende mikroarkitekturen til det omkringliggende vevet, som påvirkes av både normale fysiologiske prosesser (som aldring) så vel som lokale nevropatologiske sykdomsprosesser, slik som de som sees med HIV-infeksjon. Hviletilstand funksjonell MR (fMRI) avslører mønstre for aktivering av hjernenettverk og er et sensitivt mål på hjernefunksjon før strukturelle og anatomiske endringer oppdaget av andre metoder. Gadolinium vil ikke bli brukt til forskningsformål.

2. Laboratorium (alt knyttet til CSF)

2.1 Måling av løselige markører: Kommersielle ELISA-sett (Human Quantikine ELISA-sett; R&D Systems, Inc.) og Millipore Luminex-analyser vil bli brukt i henhold til produsentens instruksjoner ved Yale Immune Monitoring Core Laboratory. Løselige biomarkører assosiert med immunaktivering og nevrokognitiv svekkelse vil bli målt, inkludert CSF neopterin, MCP-1, sCD14, IL-6, sCD163 og IP-10.

2.2 CSF-virologianalyser: HIV RNA-standardkvantifisering vil bli fullført ved bruk av Roche COBAS/Amplicor HIV-1 Viral Load v2.0-analyse, med en nedre grense for kvantifisering på 20 cps/ml. Single Copy Assay (SCA) Kvantifisering av HIV RNA i innstillingen av ART vil bli utført ved bruk av 5-10 ml CSF. I tillegg vil celleassosiert HIV-DNA (totale, integrerte og 2LTR-sirkler i totale CD4+ T-celler bli vurdert ved CRC-CHUM.

2.3 TCR-repertoar og aviditet av HIV-spesifikke CD8+ T-celler i CSF: Disse kan måles i en undergruppe av prøver ved VGTI Florida. For repertoaranalysen vil CSF-cellepellets bli polyklonalt utvidet, og TCR-repertoaret vil bli bestemt etterfulgt av TCR-sekvensering som tidligere beskrevet. For TCR-aviditet vil T-cellekloner som tilsvarer de dominerende klontypene bli generert in vitro for å måle deres funksjonelle sensitivitet. De HIV-spesifikke CD8+ T-celleklonene generert ved ekspansjon i nærvær av PHA, IL-2 og bestrålte matere vil bli sekvensert for deres TCR og vil bli testet for deres TCR funksjonelle sensitivitet.

2.4 Håndtering av forsøkspersoner som gjenopptar ART: Hvis beslutningen tas om å gjenoppta ART i henhold til SEARCH 019 ART gjenopptakelseskriterier, vil studiebesøket før ART gjenopptakelse anses som denne studiens siste besøk, og alle prosedyrer som er planlagt for slutten av studien vil bli utført ved det besøk.