Vurdering af HIV CNS Reservoir, neurologiske og neurokognitive effekter og kilde til rebound HIV i CNS

1. Klinisk 1.1 Neurologisk undersøgelse: SEARCH anvender den AIDS Clinical Trials Group (ACTG)-afledte HIV makroneurologisk undersøgelse, en læge vurderet symptomvurdering af kognitive træk, der er typiske for HIV-associeret neurokognitiv lidelse (HAND) og perifer neuropati.

   1.2 Neuropsykologiske vurderinger: SEARCH anvender det HIV-neurokognitive batteri oprindeligt udviklet af Maj et al. designet til at minimere kulturel skævhed og testet i Bangkok. Alle forsøgspersoner vil have det fulde SØG-batteri som tidligere offentliggjort, hvorved man undgår evalueringer efter invasive procedurer. Al test udføres af certificerede sygeplejerske-psykometrister. Data sammenlignes med et normativt sæt af 500 hiv-negative, sunde thailændere i lokalsamfundet og stratificeret efter alder og uddannelsesniveau for at definere standardiserede z-scores. En psykiatrisk opgørelse afspejler det, der blev brugt til RV254 og har brede thailandske validitetsdata, og forskningssygeplejersker udfører en funktionel vurdering baseret på Clinical Dementia Scale.

   1.3 Lumbalpunktur: Lumbalpunktur udføres i henhold til kliniske standardprocedurer ved hjælp af en Sprotte® (pencil-point) nål for at minimere komplikationer. Standardvurderinger af CSF og serum, protein og celletal er afsluttet, og ca. 20 cc opsamles og ultracentrifugeres. Cellepelleter af CSF vil blive kryokonserveret til fremtidige potentielle undersøgelser med forsøgspersonens samtykke. Supernatanter opdeles i 0,5 cc alikvoter og fryses til -80oC samme dag. CSF VDRL/RPR vil blive vurderet ved baseline for dem med positiv serologi i SEARCH 019 og i opfølgning, hvis en ny positiv serologi er rapporteret i SEARCH 019, eller hvis forsøgspersonen var CSF-positiv ved baseline. Indlæggelse af deltagere for eventuelle forskningsrelaterede uønskede hændelser, der kræver indlæggelse, vil blive arrangeret, hvis det er nødvendigt.

   1.4 Neuro-imaging: Billeddiagnostiske undersøgelser vil blive udført på Chulalongkorn Universitetshospital, som ligger 100 meter fra TRCARC i Bangkok. Disse undersøgelser vil tage op til en time maksimal MR-scannertid for hvert forsøgsperson og kan omfatte hjerne-MR, MRS, DTI og hviletilstand funktionel MR (fMRI). MRI og MRS er ikke-invasive metoder til at påvise hjernepatologi (MRI) og til at bestemme in vivo-koncentrationen af ​​hjernemetabolitter (MRS). DTI er en følsom ikke-invasiv magnetisk resonansteknik til at analysere den tredimensionelle diffusion af vand i hjernevæv. Diffusionen af ​​vand i hjernen er meget afhængig af den underliggende mikroarkitektur af det omgivende væv, som er påvirket af både normale fysiologiske processer (såsom aldring) såvel som lokale neuropatologiske sygdomsprocesser, såsom dem der ses med HIV-infektion. Hviletilstand funktionel MR (fMRI) afslører mønstre for aktivering af hjernenetværk og er et følsomt mål for hjernens funktion forud for strukturelle og anatomiske ændringer detekteret med andre metoder. Gadolinium vil ikke blive brugt til forskningsformål.

2. Laboratorium (alt relateret til CSF)

2.1 Måling af opløselige markører: Kommercielle ELISA-kits (Human Quantikine ELISA-kits; R&D Systems, Inc.) og Millipore Luminex-assays vil blive brugt efter producentens instruktioner på Yale Immune Monitoring Core Laboratory. Opløselige biomarkører forbundet med immunaktivering og neurokognitiv svækkelse vil blive målt, herunder CSF-neopterin, MCP-1, sCD14, IL-6, sCD163 og IP-10.

2.2 CSF-virologiassays: HIV RNA-standardkvantificering vil blive afsluttet ved brug af Roche COBAS/Amplicor HIV-1 Viral Load v2.0 assay med en nedre kvantificeringsgrænse på 20cps/ml. Single Copy Assay (SCA) Kvantificering af HIV RNA i ART-indstillingen vil blive udført med 5-10 ml CSF. Derudover vil celleassocieret HIV-DNA (total, integreret og 2LTR cirkler i total CD4+ T-celler blive vurderet ved CRC-CHUM.

2.3 TCR-repertoire og aviditet af HIV-specifikke CD8+ T-celler i CSF: Disse kan måles i en undergruppe af prøver ved VGTI Florida. Til repertoireassayet vil CSF-cellepelleter blive polyklonalt ekspanderet, og TCR-repertoiret vil blive bestemt efterfulgt af TCR-sekventering som tidligere beskrevet. For TCR-aviditet vil T-cellekloner svarende til de dominerende klontyper blive genereret in vitro for at måle deres funktionelle følsomhed. De HIV-specifikke CD8+ T-cellekloner genereret ved ekspansion i nærvær af PHA, IL-2 og bestrålede feedere vil blive sekventeret for deres TCR og vil blive testet for deres TCR funktionelle følsomhed.

2.4 Håndtering af forsøgspersoner, der genoptager ART: Hvis der træffes beslutning om at genoptage ART i henhold til SEARCH 019 ART-genoptagelseskriterierne, vil studiebesøget før ART-genoptagelsen blive betragtet som denne undersøgelses sidste besøg, og alle procedurer, der er planlagt til afslutningen af ​​undersøgelsen, vil blive udført på det tidspunkt besøg.