Ocena rezerwuaru wirusa HIV w ośrodkowym układzie nerwowym, skutków neurologicznych i neurokognitywnych oraz źródła nawrotu HIV w ośrodkowym układzie nerwowym

1. Kliniczne 1.1 Badanie neurologiczne: SEARCH wykorzystuje makroneurologiczne badanie HIV oparte na AIDS Clinical Trials Group (ACTG), oceniające przez lekarza objawy cech poznawczych typowych dla zaburzeń neuropoznawczych związanych z HIV (HAND) i neuropatii obwodowej.

   1.2 Ocena neuropsychologiczna: SEARCH wykorzystuje baterię neurokognitywną HIV, pierwotnie opracowaną przez Maja i in. zaprojektowany w celu zminimalizowania uprzedzeń kulturowych i przetestowany w Bangkoku. Wszyscy badani będą mieli pełną baterię SZUKAJ, jak wcześniej opublikowano, co pozwoli uniknąć oceny po procedurach inwazyjnych. Wszystkie testy są przeprowadzane przez certyfikowanych pielęgniarek-psychometrystów. Dane są porównywane z normatywnym zestawem 500 niezakażonych wirusem HIV, zdrowych, mieszkających w społeczności Tajów i stratyfikowane według wieku i poziomu wykształcenia w celu zdefiniowania standaryzowanych wyników z. Inwentarz psychiatryczny odzwierciedla ten, który był używany dla RV254 i ma szerokie dane dotyczące tajskiej ważności, a pielęgniarki przeprowadzające badania przeprowadzają ocenę funkcjonalną w oparciu o Kliniczną Skalę Demencji.

   1.3 Nakłucie lędźwiowe: Nakłucia lędźwiowe są wykonywane zgodnie ze standardowymi procedurami klinicznymi przy użyciu igły Sprotte® (ostrzowej) w celu zminimalizowania powikłań. Standardowe oceny płynu mózgowo-rdzeniowego i surowicy, białka i liczby komórek są zakończone, a około 20 cm3 jest zbierane i poddawane ultrawirowaniu. Osady komórkowe płynu mózgowo-rdzeniowego zostaną poddane kriokonserwacji do przyszłych potencjalnych badań, za zgodą podmiotu. Supernatanty dzieli się na porcje po 0,5 cm3 i zamraża do temperatury -80oC tego samego dnia. VDRL/RPR płynu mózgowo-rdzeniowego zostanie oceniony na początku badania u osób z pozytywnym wynikiem serologicznym w SEARCH 019 oraz w trakcie obserwacji, jeśli w SEARCH 019 zostanie zgłoszony nowy pozytywny wynik serologiczny lub jeśli pacjent był dodatni w płynie mózgowo-rdzeniowym na początku badania. W razie potrzeby zorganizowana zostanie hospitalizacja uczestnika z powodu wszelkich zdarzeń niepożądanych związanych z badaniami wymagającymi przyjęcia.

   1.4 Neuroobrazowanie: Badania obrazowe zostaną przeprowadzone w Szpitalu Uniwersyteckim Chulalongkorn, który znajduje się 100 metrów od TRCARC w Bangkoku. Badania te zajmą maksymalnie jedną godzinę czasu skanera MRI dla każdego pacjenta i mogą obejmować MRI mózgu, MRS, DTI i funkcjonalny MRI stanu spoczynku (fMRI). MRI i MRS to nieinwazyjne metody wykrywania patologii mózgu (MRI) i określania stężenia metabolitów mózgu (MRS) in vivo. DTI to czuła, nieinwazyjna technika rezonansu magnetycznego służąca do analizy trójwymiarowej dyfuzji wody w tkance mózgowej. Dyfuzja wody w mózgu jest wysoce zależna od podstawowej mikroarchitektury otaczającej tkanki, na którą wpływają zarówno normalne procesy fizjologiczne (takie jak starzenie), jak i miejscowe procesy chorobowe neuropatologiczne, takie jak te obserwowane przy zakażeniu wirusem HIV. Funkcjonalny MRI stanu spoczynku (fMRI) ujawnia wzorce aktywacji sieci mózgowych i jest czułą miarą funkcji mózgu przed zmianami strukturalnymi i anatomicznymi wykrytymi innymi metodami. Gadolin nie będzie wykorzystywany do celów badawczych.

2. Laboratorium (wszystkie dotyczące płynu mózgowo-rdzeniowego)

2.1 Pomiar rozpuszczalnych markerów: komercyjne zestawy ELISA (zestawy Human Quantikine ELISA; R&D Systems, Inc.) i testy Millipore Luminex zostaną użyte zgodnie z instrukcjami producenta w Yale Immune Monitoring Core Laboratory. Zmierzone zostaną rozpuszczalne biomarkery związane z aktywacją immunologiczną i zaburzeniami neurokognitywnymi, w tym neopteryna płynu mózgowo-rdzeniowego, MCP-1, sCD14, IL-6, sCD163 i IP-10.

2.2 Testy wirusologiczne płynu mózgowo-rdzeniowego: Standardowe oznaczanie ilościowe RNA HIV zostanie zakończone przy użyciu testu Roche COBAS/Amplicor HIV-1 Viral Load v2.0, z dolną granicą oznaczalności 20 cps/ml. Test pojedynczej kopii (SCA) Oznaczanie ilościowe RNA HIV w warunkach ART zostanie przeprowadzone przy użyciu 5-10 ml płynu mózgowo-rdzeniowego. Ponadto DNA HIV-DNA związane z komórkami (całkowite, zintegrowane i 2LTR kółka w całkowitych limfocytach T CD4+ zostanie ocenione w CRC-CHUM.

2.3 Repertuar TCR i awidność limfocytów T CD8+ specyficznych dla HIV w płynie mózgowo-rdzeniowym: Można je zmierzyć w podzbiorze próbek w VGTI na Florydzie. W celu oznaczenia repertuaru, grudki komórek CSF będą namnażane poliklonalnie, a repertuar TCR zostanie określony, a następnie sekwencjonowanie TCR, jak opisano wcześniej. W przypadku awidności TCR klony komórek T odpowiadające dominującym klonotypom będą generowane in vitro w celu zmierzenia ich wrażliwości funkcjonalnej. Klony limfocytów T CD8+ specyficzne dla HIV, wytworzone przez namnażanie w obecności PHA, IL-2 i napromienionych substancji odżywczych, zostaną zsekwencjonowane pod kątem ich TCR i zostaną przetestowane pod kątem ich funkcjonalnej wrażliwości na TCR.

2.4 Postępowanie z uczestnikami wznowienia ART: Jeśli zostanie podjęta decyzja o wznowieniu ART zgodnie z kryteriami wznowienia ART SEARCH 019, wówczas wizyta studyjna przed wznowieniem ART zostanie uznana za ostatnią wizytę w tym badaniu, a wszystkie procedury zaplanowane na koniec badania zostaną przeprowadzone na tej odwiedzać.