Posouzení rezervoáru HIV CNS, neurologických a neurokognitivních účinků a zdroje rebound fenoménu HIV v CNS

1. Klinické 1.1 Neurologické vyšetření: SEARCH využívá makroneurologické vyšetření HIV odvozené od AIDS Clinical Trials Group (ACTG), lékař hodnocené symptomy hodnocení kognitivních rysů typických pro HIV-asociovanou neurokognitivní poruchu (HAND) a periferní neuropatii.

   1.2 Neuropsychologická hodnocení: SEARCH využívá neurokognitivní baterii HIV původně vyvinutou Majem et al. navrženo tak, aby minimalizovalo kulturní zaujatost a testováno v Bangkoku. Všechny subjekty budou mít úplnou baterii SEARCH, jak byla dříve publikována, a vyhnou se tak hodnocení po invazivních postupech. Veškeré testování provádí certifikovaná sestra-psychometristka. Data jsou porovnána s normativním souborem 500 HIV negativních, zdravých Thajců žijících v komunitě a stratifikována podle věku a dosaženého vzdělání, aby bylo možné definovat standardizované z-skóre. Psychiatrický inventář zrcadlí, který se používal pro RV254 a má široké thajské údaje o platnosti, a výzkumné sestry provádějí funkční hodnocení na základě klinické škály demence.

   1.3 Lumbální punkce: Lumbální punkce se provádí standardními klinickými postupy s použitím jehly Sprotte® (bod tužky), aby se minimalizovaly komplikace. Standardní hodnocení CSF a séra, proteinů a počtu buněk je dokončeno a je odebráno přibližně 20 cm3 a ultracentrifugováno. Buněčné pelety CSF budou kryokonzervovány pro budoucí potenciální studie se souhlasem subjektu. Supernatanty se rozdělí na 0,5 cc alikvoty a ve stejný den se zmrazí na -80 °C. CSF VDRL/RPR bude vyhodnocena na začátku u pacientů s pozitivní sérologií ve SEARCH 019 a v následném sledování, pokud je nová pozitivní sérologie hlášena ve SEARCH 019 nebo pokud byl subjekt na začátku pozitivní CSF. V případě potřeby bude zajištěna hospitalizace účastníka pro jakékoli nežádoucí příhody související s výzkumem vyžadující přijetí.

   1.4 Neurozobrazování: Zobrazovací studie budou prováděny v Univerzitní nemocnici Chulalongkorn, která je 100 metrů od TRCARC v Bangkoku. Tyto studie zaberou maximálně jednu hodinu MRI skenování každého subjektu a mohou zahrnovat MRI mozku, MRS, DTI a funkční MRI v klidovém stavu (fMRI). MRI a MRS jsou neinvazivní metody pro detekci mozkové patologie (MRI) a pro stanovení in vivo koncentrace mozkových metabolitů (MRS). DTI je citlivá neinvazivní technika magnetické rezonance k analýze trojrozměrné difúze vody v mozkové tkáni. Difúze vody v mozku je vysoce závislá na základní mikroarchitektuře okolní tkáně, která je ovlivněna jak normálními fyziologickými procesy (jako je stárnutí), tak i lokálními neuropatologickými chorobnými procesy, jako jsou ty, které lze pozorovat u infekce HIV. Funkční MRI v klidovém stavu (fMRI) odhaluje vzorce aktivace mozkových sítí a je citlivým měřítkem funkce mozku před strukturálními a anatomickými změnami detekovanými jinými metodami. Gadolinium nebude použito pro výzkumné účely.

2. Laboratoř (vše týkající se CSF)

2.1 Měření rozpustných markerů: Komerční soupravy ELISA (soupravy Human Quantikine ELISA; R&D Systems, Inc.) a testy Millipore Luminex budou použity podle pokynů výrobce v laboratoři Yale Immune Monitoring Core Laboratory. Budou měřeny rozpustné biomarkery spojené s imunitní aktivací a neurokognitivní poruchou, včetně neopterinu CSF, MCP-1, sCD14, IL-6, sCD163 a IP-10.

2.2 Virologické testy CSF: Standardní kvantifikace HIV RNA bude dokončena pomocí testu Roche COBAS/Amplicor HIV-1 Viral Load v2.0 se spodním limitem kvantifikace 20 cps/ml. Single Copy Assay (SCA) Kvantifikace HIV RNA v nastavení ART bude provedena s použitím 5-10 ml CSF. Navíc HIV-DNA spojená s buňkami (celkové, integrované a 2LTR kruhy v celkových CD4+ T buňkách budou hodnoceny v CRC-CHUM.

2.3 Repertoár TCR a avidita HIV-specifických CD8+ T buněk v CSF: Ty lze měřit v podskupině vzorků na VGTI Florida. Pro test repertoáru budou pelety buněk CSF polyklonálně expandovány a bude stanoven repertoár TCR následovaný sekvenováním TCR, jak bylo popsáno dříve. Pro aviditu TCR budou in vitro vytvořeny klony T buněk odpovídající dominantním klonotypům pro měření jejich funkční citlivosti. HIV-specifické CD8+ T buněčné klony vytvořené expanzí v přítomnosti PHA, IL-2 a ozářených živičů budou sekvenovány na jejich TCR a budou testovány na jejich funkční citlivost TCR.

2.4 Řízení subjektů, které obnovují ART: Pokud je rozhodnuto znovu zahájit ART podle kritérií pro obnovení ART SEARCH 019, bude studijní návštěva před obnovením ART považována za poslední návštěvu této studie a všechny procedury naplánované na konec studie budou provedeny tehdy. návštěva.