阿奇霉素、泰利霉素和左氧氟沙星对药物代谢酶的比较作用

具体目标

1. 这项研究的目的是什么？ 它旨在回答什么问题？

   使用 Cooperstown 5+1 鸡尾酒比较阿奇霉素、泰利霉素和左氧氟沙星对 7 种肝脏药物代谢酶活性的影响。

   背景

2. 为什么这项研究很重要？

我们之前已经表明，可以使用酶特异性探针进行广泛的药物相互作用筛选，例如用于 CYP1A2 的口服咖啡因、N-乙酰转移酶-2 (NAT-2) 和黄嘌呤氧化酶 (XO)、用于 CYP2C9 的华法林加维生素 K、奥美拉唑用于 CYP 2C19，右美沙芬用于 CYP2D6，咪达唑仑用于 CYP3A4/5。 这种探针组合已在 Cooperstown 5+1 鸡尾酒 (5+1) 中得到验证。1 使用 5+1 鸡尾酒提供了有关药物代谢酶的信息，这些酶可以代谢 90% 的肝脏消除药物，而成本仅为一小部分的个别研究。 使用混合生物标志物可降低药物相互作用筛选的总体成本。 FDA 表示可以使用探针药物代替特定的药物相互作用研究。 2 这简化了药物相互作用的检测并降低了成本。 然而，重要的是在药物相互作用试验中控制遗传多态性，这样基因构成就不会影响结果。

实验设计和方法 3) 详细描述实验设计和方法。 将收集哪些信息以及如何收集？ 从开始到结束提供主题参与的描述。

在研究的任何程序之前，每个受试者都将提供书面知情同意书。 在获得药物基因组学的知情同意后，将对所有受试者进行 CYP2D6、CYP2C9 和 CYP2C19 的基因分型。 这是为了区分弱代谢者和强代谢者。

预研究筛选将在第一个研究阶段的 4 周内进行。 受试者将接受完整的病史、社会史（包括药物、酒精和烟草使用）、体格检查、标准 12 导联心电图 (ECG) 和实验室筛查，以确保符合纳入和排除标准。 需要获取的实验室筛查数据有：全血细胞计数、凝血酶原时间（PT）、国际标准化比值（INR）、肉眼和镜下尿液分析、电解质、血尿素氮（BUN）、血肌酐、天门冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶 (ALT)、总胆红素和血清白蛋白。 有生育能力的妇女（定义为没有子宫切除术或输卵管结扎病史的绝经前妇女）将在筛选访视期间进行血清妊娠试验，并在研究的每个阶段之前进行尿液妊娠试验。 注册后，受试者将以随机顺序参与 4 个研究阶段中的每一个阶段。

研究设计和程序 这将是一项随机、交叉、开放标签的研究。 预研究筛选将在第一个研究阶段的 4 周内进行。 筛查访问将涉及获得知情同意、病史、社会史、体格检查、心电图和实验室检查。 注册后，受试者将随机（然后交叉）到表 1 中所述的 4 个阶段。

表格1。 研究设计研究药物和程序第 1 阶段（对照）Cooperstown 5+1 鸡尾酒。 Cooperstown 5+1 鸡尾酒由以下成分组成：

1. 咖啡因（口服 2 mg/kg，四舍五入至最接近的 50 mg），收集 12 小时尿液。
2. 华法林（口服 10 毫克 + 10 毫克维生素 K），采集血浆超过 96 小时。 血浆收集时间为给药后 0、3、6、12、24、36、48、72 和 96 小时。 将在 48 小时检查 INR。 如果 INR >1.7，则每天口服 5 mg 维生素 K，直至 INR ≤1.2。
3. 奥美拉唑（口服 40 毫克），给药后 2 小时采集血浆样本。
4. 右美沙芬（口服 30 毫克），收集 12 小时尿液。

5. 咪达唑仑（口服 0.075 mg/kg），在 6 小时内收集 8 个血浆样本（仅用于第 1 阶段）以确定 CYP3A 活性（MDZ CL/F mL/min）。 在给予咪达唑仑后（0 分钟）立即抽取样品，然后在 5 分钟、0.5、1、2、4、5 和 6 小时抽取样品。 在服用咪达唑仑后的前 90 分钟内，将通过脉搏血氧仪监测呼吸、心率和氧饱和度。

   2 期阿奇霉素 500 mg qAM，空腹服用 3 天。 在第 4 天，库珀斯敦 5+1 鸡尾酒将在 5+1 给药后 2 小时给予第四剂阿奇霉素。

   第 3 期泰利霉素 800 mg qAM，空腹服用 3 天。 在第 4 天，库珀斯敦 5+1 鸡尾酒将在 5+1 给药后 2 小时与第四剂泰利霉素一起给药。

   4 期左氧氟沙星 750 mg qAM，空腹服用 3 天。 第 4 天，将在 5+1 给药后 2 小时给予 Cooperstown 5+1 鸡尾酒和第四剂左氧氟沙星。

   在阿奇霉素、泰利霉素和左氧氟沙星阶段，将在 0.25、0.75、1、1.5、2、4、6、8、10、12 和 24 小时收集咪达唑仑的血浆样本，以便使用可能有潜在风险的药物进行充分采样抑制 CYP3A。 5+1 鸡尾酒将在至少禁食 8 小时后的第 4 天给药。

   受试者在服用研究药物（5+1 鸡尾酒或抗生素）后 2 小时内不得进食。

   清除期：除阿奇霉素阶段外，每个阶段后一周需要确保药物从体内完全清除。 由于阿奇霉素的半衰期较长，因此需要阿奇霉素阶段后三周。

   样本采集和分析 • 对于咖啡因表型分析，受试者将在接受剂量后 12 小时内收集所有尿液以确定 CYP1A2 活性 [(AFMU+1X+1U)/17U]、NAT-2 [AFMU/(AFMU+1X+ 1U)]和XO[1U/(1X+1U)]。 尿液将用抗坏血酸（体外）酸化以防止 AFMU 转化。

   • 对于华法林表型分析，将在服用华法林加维生素 K 后 0、3、6、12、24、36、48、72 和 96 小时采集血样，以确定 CYP2C9 活性（S-华法林 CL/F，mL/min ). 在最初的 12 小时内，将通过静脉 (IV) 导管获取血液。 此后将通过静脉穿刺。

   • 对于奥美拉唑表型分析，在口服奥美拉唑剂量后2 小时抽取一份15 mL 血样以确定CYP2C19 活性(OMP/5OH OMP)。

   • 对于右美沙芬表型分析，受试者将在接受剂量后 12 小时内收集所有尿液以确定 CYP2D6 活性 (DM/DX)。

   • 对于咪达唑仑表型分析，使用口服咪达唑仑可以评估对肠道和肝脏 CYP3A 的抑制作用。

     • 对于第 1 阶段（仅 5+1 鸡尾酒），将在咪达唑仑给药后（0 分钟）立即获取 8 份血样（每份 10 mL），然后在 5 分钟、0.5、1、2、4、5 和 6 小时时测定CYP3A 活性（MDZ CL/F，mL/min）。
     • 在阿奇霉素、泰利霉素和左氧氟沙星阶段，将在 0.25、0.75、1、1.5、2、4、6、8、10、12 和 24 小时收集血样（以允许使用可能抑制药物的充分取样CYP3A）。
   • 所有血样（奥美拉唑的 15 mL 除外）将一式两份收集在含 EDTA 的 10 mL 试管中，并以 2800 rpm 离心 15 分钟。
   • 血浆和尿液样本将在 -80C 下冷冻直至分析。

   数据分析 • 咖啡因表型分析：将分析尿液等分试样以确定 1U、1X、17U 和 AFMU 的尿液浓度。 尿液等分试样将在堪萨斯城的密苏里大学进行分析。 咖啡因去甲基化比率将用于表达 CYP1A2、NAT-2 和 XO 活性。

   • S-和R-华法林表型分析：北卡罗来纳大学教堂山分校将利用高效液相色谱法(HPLC) 分析测定血浆中的S-和R-华法林。 将使用非隔室分析确定华法林清除率。 WinNonlin® 3.1 将用于药代动力学分析。

   • 奥美拉唑表型分析：血样将在北卡罗来纳大学教堂山分校进行分析，以确定 OMP 和 5OH OMP 的血浆浓度。 口服奥美拉唑后 2 小时的 OMP 和 5OH OMP 的比率将用于描述 CYP2C19 活性。

   • 右美沙芬表型分析：将在堪萨斯城的密苏里大学分析尿液等分试样，以确定 DM/DX 的尿液浓度。 右美沙芬代谢率将用于描述 CYP2D6 活性。

   • 咪达唑仑表型分析：将分析血样以确定咪达唑仑、1-羟基咪达唑仑和4-羟基咪达唑仑的血浆浓度。 分析将在 Oneida Research Services, Inc. 使用专有的 LC/MS/MS 方法进行。 咪达唑仑清除率将用于反映 CYP3A 活性，清除率将通过使用咪达唑仑血浆浓度-时间数据的非房室分析来确定。 WinNonlin® 3.1 将用于药代动力学分析。

   统计分析

   • 样本量：使用 =0.05、四个治疗阶段和 =0.20（80% 的功效），估计 16 名志愿者的样本量将检测到 25% 的新陈代谢差异。
   • 数据将使用 FDA 的标准生物等效性测试进行分析。 3 如果药物阶段相对于控制阶段落在 0.8-1.25 范围之外，则不会显示 BE。

4) 如果研究部分是治疗方案，请确定哪些部分是常规的，哪些部分仅用于研究。

这项研究是为了研究目的。