Sammenlignende virkninger af Azithromycin, Telithromycin og Levofloxacin på lægemiddelmetaboliserende enzymer

Specifikke mål

1. Hvad er formålet med denne undersøgelse? Hvilket spørgsmål er det designet til at besvare?

   At sammenligne virkningen af ​​azithromycin, telithromycin og levofloxacin på aktiviteten af ​​7 hepatiske lægemiddelmetaboliserende enzymer ved hjælp af Cooperstown 5+1 Cocktail.

   Baggrund

2. Hvorfor er denne undersøgelse vigtig?

Vi har tidligere vist, at en bred lægemiddelinteraktionsscreening kan udføres ved hjælp af enzymspecifikke prober såsom oral koffein for CYP1A2, N-acetyltrasferase-2 (NAT-2) og xanthinoxidase (XO), warfarin plus K-vitamin for CYP2C9, omeprazol for CYP 2C19, dextromethorphan for CYP2D6 og midazolam for CYP3A4/5. Denne kombination af prober er blevet valideret i Cooperstown 5+1 Cocktail (5+1).1 Brugen af ​​5+1 cocktail giver information om de lægemiddelmetaboliserende enzymer, der metaboliserer 90 % af hepatisk eliminerede lægemidler til en brøkdel af omkostningerne af de enkelte studier. Brug af en cocktail af biomarkører reducerer de samlede omkostninger ved lægemiddelinteraktionsscreening. FDA har indikeret, at brugen af ​​probelægemidler kan ske i stedet for specifikke lægemiddelinteraktionsundersøgelser.2 Dette strømliner påvisningen af ​​lægemiddelinteraktioner og reducerer omkostningerne. Det er dog vigtigt at kontrollere for genetisk polymorfi i lægemiddelinteraktionsforsøg, så den genetiske sammensætning ikke påvirker resultatet.

Eksperimentelt design og metoder 3) Beskriv i detaljer det eksperimentelle design og metodologi. Hvilke oplysninger vil blive indsamlet, og hvordan vil de blive indsamlet? Giv en beskrivelse af fagets deltagelse fra start til slut.

Forud for enhver procedure i undersøgelsen vil hver forsøgsperson give skriftligt informeret samtykke. Alle forsøgspersoner vil blive genotypet for CYP2D6, CYP2C9 og CYP2C19 efter at have opnået informeret samtykke til farmakogenomi. Dette er for at skelne dårlige metabolisatorer fra omfattende metabolisatorer.

Forundersøgelsesscreening vil blive udført inden for 4 uger efter den første undersøgelsesfase. Forsøgspersonerne vil gennemgå en komplet sygehistorie, social historie (inklusive medicin, alkohol og tobaksbrug), fysisk undersøgelse, standard 12-aflednings elektrokardiogram (EKG) og laboratoriescreening for at sikre, at inklusions- og eksklusionskriterier er opfyldt. De laboratoriescreeningsdata, der skal opnås, er: fuldstændig blodtælling, protrombintid (PT), internationalt normaliseret forhold (INR), makroskopisk og mikroskopisk urinanalyse, elektrolytter, blodurinstofnitrogen (BUN), serumkreatinin, aspartattransaminase (AST), alanin transaminase (ALT), total bilirubin og serumalbumin. Kvinder i den fødedygtige alder (defineret som præmenopausale uden nogen historie med hysterektomi eller tubal ligering) vil gennemgå en serumgraviditetstest under screeningsbesøget og en uringraviditetstest forud for hver fase af undersøgelsen. Efter tilmelding vil forsøgspersoner deltage i hver af de 4 undersøgelsesfaser i en tilfældig rækkefølge.

Undersøgelsesdesign og -procedurer Dette vil være et randomiseret, crossover, åbent studie. Forundersøgelsesscreening vil blive udført inden for 4 uger efter den første undersøgelsesfase. Screeningsbesøg vil involvere indhentning af informeret samtykke, sygehistorie, social historie, fysisk undersøgelse, EKG og laboratorietest. Efter tilmelding vil emner blive randomiseret (og derefter krydset over) til 4 faser som beskrevet i tabel 1.

Tabel 1. Studiedesign Undersøgelse af lægemidler og procedure Fase 1 (kontrol) Cooperstown 5+1 Cocktail alene. Cooperstown 5+1 Cocktail består af følgende komponenter:

1. Koffein (2 mg/kg oralt, afrundet til nærmeste 50 mg) med opsamling af en 12-timers urin.
2. Warfarin (10 mg + 10 mg vitamin K oralt) med opsamling af plasma over 96 timer. Plasmaopsamlingstider er 0, 3, 6, 12, 24, 36, 48, 72 og 96 timer efter dosering. INR vil blive kontrolleret efter 48 timer. Hvis INR er >1,7, vil 5 mg K-vitamin blive indgivet gennem munden dagligt, indtil INR er 1,2.
3. Omeprazol (40 mg oralt) med opsamling af en plasmaprøve 2 timer efter dosering.
4. Dextromethorphan (30 mg oralt) med opsamling af en 12-timers urin.

5. Midazolam (0,075 mg/kg oralt) med indsamling af 8 plasmaprøver over 6 timer (kun for fase 1) for at bestemme CYP3A-aktivitet (MDZ CL/F ml/min). Prøver udtages umiddelbart efter midazolamadministration (0 minut), derefter efter 5 minutter, 0,5, 1, 2, 4, 5 og 6 timer. Vejrtrækning, hjertefrekvens og iltmætning vil blive overvåget via pulsoximetri i de første 90 minutter efter midazolam-dosis.

   Fase 2 Azithromycin 500 mg qAM i 3 dage på tom mave. På dag 4 vil Cooperstown 5+1 Cocktail blive administreret med en fjerde dosis azithromycin givet 2 timer efter 5+1 administration.

   Fase 3 telithromycin 800 mg qAM i 3 dage på tom mave. På dag 4 vil Cooperstown 5+1 Cocktail blive administreret med en fjerde dosis telithromycin givet 2 timer efter 5+1 administration.

   Fase 4 Levofloxacin 750 mg qAM i 3 dage på tom mave. På dag 4 vil Cooperstown 5+1 Cocktail blive administreret med en fjerde dosis levofloxacin givet 2 timer efter 5+1 administration.

   Under azithromycin-, telithromycin- og levofloxacin-faserne vil plasmaprøver for midazolam blive indsamlet efter 0,25, 0,75, 1, 1,5, 2, 4, 6, 8, 10, 12 og 24 timer for at muliggøre tilstrækkelig prøveudtagning med lægemidler, der potentielt hæmmer CYP3A. 5+1 cocktailen vil blive indgivet på dag 4 efter minimum 8 timers faste.

   Forsøgspersonerne må ikke spise før 2 timer efter administration af undersøgelsesmedicin (5+1 cocktail eller antibiotikum).

   Udvaskningsperioder: En uge efter hver fase med undtagelse af azithromycinfasen er påkrævet for at sikre, at lægemidlet er fuldstændig elimineret fra kroppen. Tre uger efter azithromycinfasen er nødvendig, da azithromycin har en længere halveringstid.

   Prøveindsamling og analyse • Til koffeinfænotypebestemmelse vil forsøgspersoner opsamle al deres urin i 12 timer efter at have modtaget dosis for at bestemme CYP1A2-aktivitet [(AFMU+1X+1U)/17U], NAT-2 [AFMU/(AFMU+1X+) 1U)], og XO [1U/(1X+1U)]. Urin vil blive syrnet med ascorbinsyre (in vitro) for at forhindre AFMU-omdannelse.

   • Til warfarin-fænotypning vil der blive taget blodprøver 0, 3, 6, 12, 24, 36, 48, 72 og 96 timer efter administration af warfarin plus vitamin K for at bestemme CYP2C9-aktivitet (S-warfarin CL/F, ml/min. ). I de første 12 timer vil blod blive udtaget gennem et intravenøst ​​(IV) kateter. Herefter vil det være via venepunktur.

   • Til omeprazol-fænotypebestemmelse udtages en 15 ml blodprøve 2 timer efter den orale omeprazoldosis for at bestemme CYP2C19-aktivitet (OMP/5OH OMP).

   • Til dextromethorphan-fænotyping vil forsøgspersoner opsamle al deres urin i 12 timer efter at have modtaget dosis for at bestemme CYP2D6-aktivitet (DM/DX).

   • Til midazolam-fænotypning giver brug af oral midazolam en vurdering af hæmning af både tarm- og lever-CYP3A.

     • For fase 1 (5+1 cocktail alene), vil 8 blodprøver (10 ml hver) blive taget umiddelbart efter midazolam administration (0 minut), derefter efter 5 minutter, 0,5, 1, 2, 4, 5 og 6 timer for at bestemme CYP3A-aktivitet (MDZ CL/F, ml/min).
     • Under azithromycin-, telithromycin- og levofloxacin-faserne vil blodprøver blive udtaget efter 0,25, 0,75, 1, 1,5, 2, 4, 6, 8, 10, 12 og 24 timer (for at muliggøre tilstrækkelig prøveudtagning med lægemidler, der potentielt hæmmer CYP3A).
   • Alle blodprøver (undtagen 15 mL for omeprazol) vil blive opsamlet i to eksemplarer i 10 mL EDTA-holdige reagensglas og centrifugeret i 15 minutter ved 2800 rpm.
   • Plasma- og urinprøver vil blive frosset ved -80C indtil analyse.

   Dataanalyse • Koffeinfænotypebestemmelsesanalyse: Urinalikvoter vil blive analyseret for at bestemme urinkoncentrationen på 1U, 1X, 17U og AFMU. Urinalikvoter vil blive analyseret ved University of Missouri, Kansas City. Koffeindemethyleringsforhold vil blive brugt til at udtrykke CYP1A2-, NAT-2- og XO-aktivitet.

   • S- og R-warfarin-fænotypebestemmelse: S- og R-warfarin i plasma vil blive bestemt ved hjælp af højtydende væskekromatografi (HPLC)-analyse ved University of North Carolina, Chapel Hill. Warfarin-clearance vil blive bestemt ved hjælp af ikke-kompartmental analyse. WinNonlin® 3.1 vil blive brugt til farmakokinetiske analyser.

   • Omeprazol-fænotypebestemmelse: Blodprøver vil blive analyseret ved University of North Carolina, Chapel Hill, for at bestemme plasmakoncentrationer af OMP og 5OH OMP. Forholdet mellem OMP og 5OH OMP 2 timer efter den orale dosis af omeprazol vil blive brugt til at beskrive CYP2C19-aktivitet.

   • Dextromethorphan-fænotypebestemmelse: Urinalikvoter vil blive analyseret ved University of Missouri, Kansas City, for at bestemme urinkoncentrationer af DM/DX. Dextromethorphan metaboliske forhold vil blive brugt til at beskrive CYP2D6 aktivitet.

   • Midazolam-fænotypebestemmelse: Blodprøver vil blive analyseret for at bestemme plasmakoncentrationen af ​​midazolam, 1-hydroxymidazolam og 4-hydroxymidazolam. Analyser vil blive udført hos Oneida Research Services, Inc. ved hjælp af en proprietær LC/MS/MS-metode. Midazolam-clearance vil blive brugt til at afspejle CYP3A-aktivitet, og clearance vil blive bestemt ved at bruge non-compartmental analyse af midazolam-plasmakoncentration-tidsdata. WinNonlin® 3.1 vil blive brugt til farmakokinetiske analyser.

   Statistisk analyse

   • Prøvestørrelse: Ved at bruge =0,05, fire behandlingsfaser og =0,20 (styrke på 80%), vil en estimeret prøvestørrelse på seksten frivillige opdage en 25% forskel i metabolisme.
   • Data vil blive analyseret ved hjælp af FDA's standard bioækvivalenstest.3 Hvis lægemiddelfaserne falder uden for området 0,8-1,25 i forhold til kontrolfasen, vises BE ikke.

4) Hvis forskningen delvist er en behandlingsprotokol, skal du identificere, hvilke dele der er rutine, og hvilke dele der udelukkende udføres for forskning.

Denne undersøgelse er til forskningsformål.