使用 VEGF-A165/bFGF 质粒经皮递送在无选择 CAD 患者中的血管生成；对照试验 (VIF-CAD)

研究目的：

使用基于经皮导管的技术将编码人 VEGF-A165/bFGF 的质粒注射到难治性冠状动脉疾病患者的缺血心肌中，通过基因疗法实现治疗性血管生成 - 双盲安慰剂对照研究。

大量具有严重持续性冠状动脉疾病症状的患者无法使用当今可用的方法进行有效治疗——他们有时被描述为“别无选择”的患者。 目前很明显，对这些患者而言，一种有前途的新兴疗法可能是刺激缺血心肌区域的新血管生成，这通常需要使用生长因子。 在测试这种方法的实验中使用了不同的方法和不同的生长因子。 引起研究人员最大兴趣的两种药物自然是 FGF（成纤维细胞生长因子）和 VEGF（血管内皮生长因子）。 在动物和人体实验中，还尝试了多种方法将这些药物有效地输送到感兴趣的区域，并确保它们在目标组织中的长期作用。

基础研究表明，最有效的血管生成生长因子形式是碱性 FGF (bFGF) 和 A 型 VEGF，尤其是其 165 氨基酸形式 (VEGF-A 165) 因此，大多数关于治疗性血管生成的临床研究都已完成使用这两种生长因子中的一种。 据我们所知，这是第一项使用双顺反子 VEGF-A 165/bFGF 质粒的临床研究。

学习规划：

该研究的目的是通过基因疗法实现治疗性血管生成，使用编码人 VEGF-A165/bFGF (pVIF) 的双顺反子质粒注射到缺血心肌中。 一种基于经皮导管的技术（Myo-Star, Johnson & Johnson®）用于质粒递送。 该研究计划作为一项双盲前瞻性安慰剂对照试验。

患者群体将包括不能用任何标准血运重建方法治疗的 CCS III 和 CCS IV 冠状动脉疾病患者（“无选择”患者）。 在研究过程中，我们将尝试分析治疗性质粒诱导的血管生成在增加心肌灌注和改善临床症状方面的功效。 还将评估质粒递送方法的可行性和安全性。

该研究将根据 1964 年赫尔辛基宣言及其后的修正案进行。

患者人群：

52 名患者将按 2:1 的比例随机分为两组：ph-VEGF-A/FGF (pVIF) 治疗组 (n=34) 和安慰剂组 (n=18)。 分析将在意向治疗的基础上进行。

所有参加研究的患者都将接受由主治医师判断的最佳药物治疗。 仅出于明确的原因，将努力在学习课程期间修改药物疗法。

学习课程和质粒疗法：

研究中将使用编码人质粒或安慰剂质粒的裸质粒。 该质粒将由共同参与该研究的 P. Janik 教授团队在波兰华沙癌症中心细胞生物学系合成。 VEGF-A165 和 bFGF cDNA 与 CMV 启动子和 zeocin 抗性基因一起被整合到 pSec 表达质粒中，并在大肠杆菌 DH5α 菌株中扩增。 根据 Y. Isner 描述并经 FDA 批准的方法提取质粒。 它还获得了波兰药物研究所的证书和心脏病研究所伦理委员会的认可，用于有限的临床试验。

质粒将以 0.5 mg 的总剂量给予，10 次注射到可逆性局部缺血区域，每次 0.2 ml。 将溶液注射到缺血区十个点中的每一个点的过程将需要 20 到 40 秒，以最大限度地减少肌肉破坏。 这种剂量方案似乎有效且安全，正如 Sylvén 等人、Laham 等人的著作中所记载的那样。和伊斯内尔等人。

在同意参加试验后，符合条件的患者将准备好接受标准的侵入性心脏病学手术。 标准血管造影术和脑室造影术将在质粒注射治疗之前进行。 感兴趣的缺血区域将在 SPECT 纳入时确定。 还将进行带有腺苷的心脏核磁共振 (cNMR) 以评估心脏形态、功能和灌注。 接下来，将根据上述协议执行注射。 在整个研究过程中将使用由 Johnson&Johnson® (Myo-Star) 提供的导管提供的注射导管。 将通过射线照相和 ECG（心室期外收缩）监测正确的心肌针固定。

注射治疗后标准的早期安全性随访将包括评估基本实验室参数（肌钙蛋白 I、CK-MB、RBC、电解质）、生命体征、回声图评估和 ECG。 其目的是诊断可能的注射治疗后并发症，尤其是左心室穿刺或大出血。

将在注射治疗后第 4 个月和第 12 个月进行随访。

每次访问都将包括完整的病史、体格检查、实验室评估、心电图和运动测试。 双嘧达莫应激 SPECT 和超声心动图评估将在纳入时进行，然后在第 4 个月（质粒表达预期终止后的时间）进行。

在注射治疗后第 1、2、4、8 周，将获得血液样本以评估血浆 VEGF-A 和 bFGF 水平。

首先，静息时心肌灌注的变化和注射治疗后双嘧达莫负荷 SPECT 评估将是疗效的衡量标准。 还将监测运动耐量的变化以及许多其他功效和安全参数。