Angiogeneesi käyttäen VEGF-A165/bFGF-plasmidia perkutaanisesti annosteltuna ei-vaihtoehtoisille CAD-potilaille; kontrolloitu kokeilu (VIF-CAD)

Tutkimuksen tavoite:

Terapeuttisen angiogeneesin saavuttaminen geeniterapialla käyttämällä ihmisen VEGF-A165/bFGF:ää koodaavaa plasmidia injektoituna refraktaaristen sepelvaltimotautipotilaiden iskeemiseen sydänlihakseen käyttäen perkutaaniseen katetriin perustuvaa tekniikkaa – kaksoissokkoutettua lumekontrolloitua tutkimusta.

Suurta ryhmää potilaita, joilla on vaikeita pysyviä sepelvaltimotaudin oireita, ei voida hoitaa tehokkaasti nykyisillä menetelmillä - heitä kuvataan joskus "ei-vaihtoehto"-potilaiksi. Tällä hetkellä on ilmeistä, että lupaava nouseva hoito näille potilaille voisi olla neoangiogeneesin stimulointi iskeemisen sydänlihaksen alueella, mikä yleensä vaatii kasvutekijöiden käyttöä. Tätä lähestymistapaa testaavissa kokeissa on käytetty erilaisia ​​menetelmiä ja erilaisia ​​kasvutekijöitä. Kaksi tutkijoiden eniten kiinnostavaa ainetta ovat luonnollisesti FGF (fibroblastikasvutekijä) ja VEGF (vaskulaarinen endoteelikasvutekijä). Useita menetelmiä sekä eläin- että ihmiskokeissa on myös yritetty kuljettaa näitä aineita tehokkaasti kiinnostuksen kohteena olevalle alueelle ja varmistaa niiden pitkittynyt vaikutus kohdekudoksessa.

Perustutkimukset ovat paljastaneet, että angiogeenisten kasvutekijöiden tehokkaimmat muodot ovat perus-FGF (bFGF) ja VEGF-tyyppi A, erityisesti sen 165 aminohapon muodossa (VEGF-A 165). Tästä syystä suurin osa terapeuttisen angiogeneesin kliinisistä tutkimuksista tehdään käyttämällä yhtä näistä kahdesta kasvutekijästä. Tämä on tietojemme mukaan ensimmäinen kliininen tutkimus, jossa käytettiin bisistronista VEGF-A 165/bFGF -plasmidia.

Opintojen suunnittelu:

Tutkimuksen tavoitteena on saavuttaa terapeuttinen angiogeneesi geeniterapialla käyttämällä ihmisen VEGF-A165/bFGF:ää (pVIF) koodaavaa bikistronista plasmidia injektoituna iskeemiseen sydänlihakseen. Plasmidin kuljettamiseen käytetään perkutaanista katetripohjaista tekniikkaa (Myo-Star, Johnson & Johnson®). Tutkimus on suunniteltu kaksoissokkoutetuksi prospektiiviseksi lumekontrolloiduksi tutkimukseksi.

Potilaspopulaatio koostuu CCS III- ja CCS IV -sepelvaltimotautipotilaista, joita ei voida hoitaa millään tavanomaisilla revaskularisaatiomenetelmillä ("ei-vaihtoehto" -potilaat). Tutkimuksen aikana pyrimme analysoimaan terapeuttisen plasmidi-indusoidun angiogeneesin tehokkuutta sydänlihaksen perfuusion lisääntymisen ja kliinisten oireiden paranemisen kannalta. Myös plasmidin kuljetusmenetelmän toteutettavuus ja turvallisuus arvioidaan.

Selvitys suoritetaan Helsingin julistuksen 1964 mukaisesti myöhemmillä muutoksilla.

Potilaspopulaatio:

52 potilasta satunnaistetaan kahteen ryhmään suhteessa 2:1: ph-VEGF-A/FGF (pVIF) -hoitoryhmä (n = 34) ja lumeryhmä (n = 18). Analyysi tehdään hoitoaikeen perusteella.

Kaikki tutkimukseen osallistuvat potilaat saavat hoitavan lääkärin arvioiman optimaalisen lääketieteellisen hoidon. Lääketerapiaa pyritään muuttamaan opintojakson aikana vain selvistä syistä.

Opintojakso ja plasmiditerapia:

Tutkimuksessa käytetään paljaata plasmidia, joka koodaa ihmisen tai plaseboplasmidia. Prof. P. Janikin ryhmä, joka osallistuu tutkimukseen, syntetisoi plasmidin solubiologian laitoksella, Cancer Center, Varsova, Puola. VEGF-A165- ja bFGF-cDNA sisällytetään pSec-ekspressioplasmidiin yhdessä CMV-promoottorin ja zeosiiniresistenssigeenin kanssa ja monistetaan E. coli DH5a -kannassa. Plasmidi uutetaan Y. Isnerin kuvaaman ja FDA:n hyväksymän menetelmän mukaisesti. Se on myös saanut Puolan huumeinstituutin todistuksen ja kardiologian instituutin eettisen komitean hyväksynnän rajoitettuun kliiniseen käyttöön.

Plasmidi annetaan kokonaisannoksena 0,5 mg, 10 0,2 ml:n injektiota reversiibelin iskemian alueelle. Liuoksen ruiskuttaminen kuhunkin kymmeneen kohtaan iskeemisellä alueella kestää 20-40 sekuntia lihashäiriöiden minimoimiseksi. Tämä annostusohjelma näyttää tehokkaalta ja turvalliselta, kuten Sylvén et al., Laham et ai. ja Isner et ai.

Suostumuksensa jälkeen tutkimukseen osallistuvat potilaat valmistetaan tavalliseen invasiiviseen kardiologiaan. Standardiangiografia ja ventrikulografia suoritetaan ennen plasmidi-injektiohoitoa. Kiinnostuksen kohteena oleva iskeeminen alue tunnistetaan sisällyttämisen yhteydessä SPECT:llä. Myös sydämen ydinmagneettinen resonanssi (cNMR) adenosiinilla suoritetaan sydämen morfologian, toiminnan ja perfuusion arvioimiseksi. Seuraavaksi ruiskeet suoritetaan edellä kuvatun protokollan mukaisesti. Johnson&Johnson®:n (Myo-Star) toimittamia injektiokatetreja käytetään koko tutkimuksen ajan. Kunnollista sydänlihaksen neulan kiinnitystä seurataan röntgenkuvauksella ja EKG:llä (kammio ekstrasystolia).

Tavallinen varhainen turvallisuusseuranta injektiohoidon jälkeen sisältää peruslaboratorioparametrien (troponiini I, CK-MB, punasolut, elektrolyytit), elintoimintojen, kaikukuvauksen ja EKG:n arvioinnin. Sen tarkoituksena on diagnosoida mahdolliset injektion jälkeiset hoidon komplikaatiot, erityisesti vasemman kammion punktio tai suuri verenvuoto.

Seurantakäynnit tehdään kuukauden 4 ja 12 kohdalla injektiohoidon jälkeen.

Jokaiseen käyntiin sisältyy koko historia, fyysinen tutkimus, laboratorioarviointi, EKG ja rasitustesti. Dipyridamoli-stressi-SPECT ja kaikukardiografinen arviointi suoritetaan sisällyttämisen yhteydessä ja sitten kuukaudessa 4 - plasmidin ilmentymisen odotetun päättymisen jälkeen.

Viikkoina 1, 2, 4 ja 8 injektiohoidon jälkeen otetaan verinäytteitä plasman VEGF-A- ja bFGF-tasojen arvioimiseksi.

Ensisijaisesti sydänlihaksen perfuusion muutos levossa ja dipyridamoli-stressi-SPECT-arvioinnissa injektiohoidon jälkeen on tehon mitta. Myös rasitustoleranssin muutoksia seurataan useiden muiden teho- ja turvallisuusparametrien ohella.