WT1 致敏 T 细胞治疗异基因造血祖细胞移植后残留或复发白血病的剂量递增试验

纳入标准：

• 在接受治疗之前，一些患者可能会对其 WT1 恶性肿瘤进行诊断和/或其他测试，以确定他们的疾病是否可能对 WT1 特异性 T 细胞治疗产生反应。 或者，研究测试可能需要血液样本，以确定 WT1 特异性 T 细胞不包含任何可能对患者产生反应的细胞。 这些患者将签署单独的治疗前同意书。 如果确定患者有资格并可能受益于 WT1 CTL 的输注，他/她将继续签署 MSKCC IRB # 07-055 的标准治疗同意书，并在所有其他资格条件下参加试验并接受治疗符合标准。
• 符合该试验条件的患者将包括经病理学确诊为白血病或骨髓增生异常综合征 (MDS) 的患者，这些患者在接受同种异体造血细胞移植后，外周血涂片或骨髓抽吸物的形态学证实白血病复发，或反复出现持续性白血病通过至少 2 次相隔至少 1 周的连续测试证明微小残留病，通过 FISH 或细胞遗传学证明残留白血病或 MDS 的分子证据。 此外，接受同种异体造血细胞移植治疗白血病或骨髓增生异常综合征且预计移植后复发风险 >30% 的患者将有资格在之前生成供体来源的 WT1 肽特异性 T 细胞或在移植时立即使用，以便在发现患者有最小残留疾病或复发时移植后立即使用。 这包括初次诱导治疗难治或处于 AML 或 ALL 首次复发之后的任何阶段的 AML 或 ALL 患者、处于继发性慢性期的 CML、加速性疾病或治疗后的急变期或 RAEB 或 RAEBT 阶段对诱导治疗无反应或复发的 MDS。 此外，应记录患者的白血病或 MDS 母细胞表达 WT1 蛋白，该蛋白可通过诊断性石蜡包埋骨髓活检的免疫组织病理学分析检测到，在诊断复发时获得，或者属于已知通常以高频率表达 WT1 的类型。 WT1 的表达将通过 Dupont 和 Soslow (36) 技术的改进进行评估，并根据德国免疫反应评分 (IRS) 的改编进行分级，IRS 是免疫反应强度子评分的乘积 (0-3+) 和免疫反应分布 (0-4+)。 对于这项研究，IRS 评分为 4-12 的白血病母细胞将被视为阳性。
• 经病理证实的白血病或 MDS 诊断。
• 已经接受同种异体造血细胞移植并且有记录的白血病或 MDS 复发或有复发性持续性微小残留病的患者，至少有 2 次连续测试记录，间隔 1 周，通过 FISH 证明白血病或 MDS 的分子证据，细胞遗传学或荧光免疫细胞术。
• 接受同种异体造血细胞移植治疗预期复发风险超过 30% 的白血病或骨髓增生异常综合征的患者将有资格在移植前或移植时产生供体来源的 WT1 肽致敏 T 细胞移植后立即使用，以便发现患者有微小的残留病灶或复发。 这包括患有以下疾病的患者：
• 初始诱导治疗难治的 ALL、AML 或 MDS
• 任何阶段的 ALL 或 AML 复发超过 1°
• 化疗后 2° 或更大慢性期的 CML
• CML 处于持续加速期或急变期
• 诱导化疗无效或复发的高危 MDS（RAEB 和 RAEB+）
• 患者的白血病或 MDS 母细胞必须表达可通过免疫组织病理学分析检测到的 WT1 蛋白，或者；如果没有足够的样本用于检测，则必须患有一种白血病（ALL、除 M5 以外的 AML）或 MDS（2° MDS、RAEB、RAEBT），已知在大部分病例（>60）中过度表达 WT1 %)。 对于移植后发生白血病或 MDS 复发的患者，应尽可能通过免疫组织学或 FACS 评估骨髓抽吸物中表达 WT1 的原始细胞的比例。
• 患者的造血细胞移植供体必须同意在一次静脉切开术中获得 2 体积的白细胞分离术或全血捐赠，总共约 250 毫升，从中将产生用于过继转移的 WT-1 特异性 T 细胞
• KPS 或 Lansky 分数 > 或等于 40
• 在用 WT1 特异性 T 细胞治疗时有足够的骨髓、肾和肝功能：
• 中性粒细胞绝对计数 (ANC) > 或等于 1000/mm3，有或没有 G-CSF 支持。

如果患者有血液学疾病复发或患者尚未从化疗中恢复计数，则可以免除此要求。

• 血小板 > 或等于 20,000/mm3。 如果患者有血液学疾病复发或患者尚未从化疗中恢复计数，则可以免除此要求。
• 肌酐 < 或等于 2.0mg/dL
• ALT、AST <3.0 和总胆红素均 < 2.5 x 机构 ULN
• 此协议没有年龄限制。
• 在 CNS 中也检测到复发的患者可以按照该方案进行治疗。 然而，如果正在进行鞘内化疗，则 T 细胞至少应在其后 24 小时内给药。

排除标准：

• 患有活动性（2-4 级）急性移植物抗宿主病 (GVHD)、慢性 GVHD 或明显的自身免疫性疾病（例如 溶血性贫血）需要大剂量糖皮质激素（>0.5 mg/kg/天泼尼松或其等效物）作为治疗。
• 患有与白血病复发无关的其他疾病的患者（例如 静脉闭塞性疾病或不受控制的细菌、病毒或侵袭性真菌感染），它们也会危及生命，并且会妨碍对 T 细胞输注效果的评估。
• 怀孕的患者。

捐献血液淋巴细胞以产生供体衍生的 WT-1 特异性 T 细胞的供体资格。

用于生成 WT1 肽致敏 T 细胞的献血者的资格标准是：

• WT-1 特异性 T 淋巴细胞的供体将与提供患者造血干细胞移植 (HSCT) 的供体相同。 这些正常供体将通过 EBV 血清学评估之前对 EBV 致敏的证据。 如果供体是血清反应阳性的，并且供体 T 细胞被供体载有 WT-1 肽的 EBV 转化的 B 细胞致敏，则 EBV 特异性 T 细胞也将从产生 WT-1 特异性 T 细胞的血清阳性供体产生，并且它们将转移后的生长和持久性与 WT 1 特异性 T 细胞进行比较。
• 由于捐献者已经对他/她的健康状况进行了广泛的评估，以确定是否有资格捐献患者的 HSCT，因此对此次献血的重新评估将仅限于临床病史、体格检查和血液检查，以确保不会出现任何新情况捐献者的医生认为，这会阻止捐献者捐献所需的血液。
• 将移植捐赠者排除在第二次献血之外的新健康状况是有限的，但包括：
• 新发的 HIV 感染
• 其他不受控制的感染，可以通过血细胞传播给患者，并使患者出现严重发病或死亡的风险显着增加。
• Hgb < 或等于 10 gm/dl 的显着贫血，自最初移植捐赠时起一直存在。
• 自 HSCT 捐献后有心肌梗塞或中风病史，这可能会增加献血的风险。 有希望的捐助者将被告知本研究的目的及其要求。 如果他/她同意，捐赠者将被要求提供两次血液样本。
• 首次捐献 25ml 用肝素或 ACD 抗凝的血液。 该血液用于建立用 B95.8 实验室 EBV 菌株输血转化的 B 细胞系。 该 EBV+ B 细胞系/ (EBVBLCL) 将用作抗原呈递细胞。 当加载 WT-1 十五肽库时，EBVBLCL 有效地使来自相同供体的 T 细胞对 WT-1 和 EBV 敏感。

因为适合用作抗原呈递细胞的 EBV 转化 B 细胞系的建立和测试需要 4-5 周的体外培养，所以对于有白血病复发风险的患者，尽早获得该样本很重要，因为疾病复发最常发生在移植后 2-6 个月。 因此，该血样应尽可能在捐赠造血祖细胞移植物之前从捐赠者处获得。

• 在标准 ACD 抗凝剂中收集的单个标准 2 血体积白细胞分离术的捐献。 如果无法从一些捐献者那里采集白细胞分离术，一个单位的全血将被 AICTF（过继免疫细胞治疗机构在 MSKCC 的 GMP 条件下生产临床级细胞产品）接受，用于生成数量有限的T 细胞。 需要这种血液来分离 T 细胞，这些 T 细胞会被负载在自体树突细胞或自体 EBVBLCL 上的 WT-1 15 聚体池致敏，并在体外繁殖。 此外，需要提供维持 T 细胞生长所必需的自体饲养细胞，而没有刺激能够诱导 GVHD 的同种异体反应性 T 细胞生长的风险。
• 这种白细胞去除术或单位血液的捐赠将在无关的 HSCT 捐赠者捐赠 HSCT 后至少 2 周从无关的 HSCT 捐赠者处获得，但此后应尽可能快。

除了为这些献血提供书面同意以产生 WT-1 特异性 T 细胞以潜在用于治疗复发性白血病或在献血者已为其提供 HSCT 的患者中发展的持续性残留疾病外，每位捐献者将被告知并要求他们分别同意捐献的血细胞的以下潜在应用：

• 使用一部分分离的细胞来产生针对病毒的免疫 T 细胞，例如 Epstein-Barr 病毒 (EBV) 和巨细胞病毒 (CMV)，这些病毒可以在移植接受者中引起致命的感染或淋巴瘤。 然后，根据不同的方案，此类 T 细胞可用于治疗接受供体造血祖细胞移植的患者的 EBV 相关疾病 (IRB 95-024) 和/或治疗 CMV 感染 (IRB 05-065)。

同意此申请将限制任何捐献者所需的献血次数，因为在白细胞分离术中捐献的白细胞应提供足够的细胞来生长针对 WT-1、EBV 和 CMV 的免疫 T 细胞。

将供体产生的 EBV 或 CMV 特异性免疫 T 细胞捐赠给免疫细胞库，这些免疫细胞将在 GMP 条件下启动和维持冷冻保存MSKCC 的过继免疫细胞治疗设施，可能用于治疗其他 EBV 淋巴瘤或巨细胞病毒感染患者，这些患者表达供体共享的 HLA 等位基因。