Dosiseskaleringsforsøg med WT1-sensibiliserede T-celler for resterende eller recidiverende leukæmi efter allogen hæmatopoietisk stamcelletransplantation

Inklusionskriterier:

• Inden de modtager behandling, kan nogle patienter gennemgå diagnostisk og/eller anden test af deres WT1-maligniteter for at afgøre, om deres sygdom sandsynligvis vil reagere på behandling med WT1-specifikke T-celler. Alternativt kan der kræves blodprøver til forskningstest for at sikre, at de WT1-specifikke T-celler ikke indeholder celler, der kan reagere mod patienten. Disse patienter vil underskrive et særskilt forudgående samtykke. Hvis det fastslås, at en patient vil kvalificere sig til og kan drage fordel af infusioner af WT1 CTL'er, vil han/hun fortsætte med at underskrive standardbehandlingstilladelsen for MSKCC IRB # 07-055 og blive tilmeldt og behandlet på forsøg, hvis alle andre kvalificerede kriterier er opfyldt.
• Patienter, der er kvalificerede til dette forsøg, vil omfatte patienter med en patologisk bekræftet diagnose af leukæmi eller myelodysplastisk syndrom (MDS), som efter en allogen hæmatopoietisk celletransplantation har fået tilbagefald med leukæmi som påvist morfologisk på udstrygning af perifert blod eller knoglemarvsaspirat, eller har tilbagevendende vedvarende. minimal resterende sygdom som påvist ved mindst 2 sekventielle tests adskilt af mindst 1 uge, der viser molekylært bevis for resterende leukæmi eller MDS af FISH eller cytogenetik. Derudover vil patienter, der skal modtage en allogen hæmatopoietisk celletransplantation som behandling for leukæmi eller myelodysplastisk syndrom, der har en forventet risiko for tilbagefald efter transplantation på >30 %, være berettiget til at få donorafledte WT1-peptidspecifikke T-celler genereret før til eller på tidspunktet for transplantation til umiddelbar brug efter transplantation på et sådant tidspunkt, at patienten viser sig at have minimal resterende sygdom eller tilbagefald. Dette omfatter patienter med AML eller ALL, der enten er refraktære over for primær induktionsterapi eller er på et hvilket som helst stadium senere end første tilbagefald for AML eller ALL, CML i en sekundær kronisk fase, accelereret sygdom eller efter behandling for blast-krise eller RAEB- eller RAEBT-stadier af MDS, som ikke har reageret på eller er gentaget efter induktionsbehandling. Endvidere bør patientens leukæmi- eller MDS-blaster dokumenteres til at udtrykke det WT1-protein, der kan påvises ved immunhistopatologisk analyse af diagnostiske paraffinindlejrede marvbiopsier, opnået ved diagnose af tilbagefald eller være af en type, der er kendt for almindeligvis at udtrykke WT1 ved høj frekvens. Ekspression af WT1 vil blive vurderet ved en modifikation af teknikken fra Dupont og Soslow (36) og bedømt efter en tilpasning af den tyske immunoreaktive score (IRS), som er produktet af subscores for intensiteten af ​​immunreaktivitet (0-3+) og fordeling af immunreaktivitet (0-4+). For denne undersøgelse vil leukæmi-blaster med IRS-score på 4-12 blive betragtet som positive.
• En patologisk bekræftet diagnose af leukæmi eller MDS.
• Patienter, der allerede har modtaget en allogen hæmatopoietisk celletransplantation og enten har et dokumenteret tilbagefald af leukæmi eller MDS eller har tilbagevendende vedvarende minimal resterende sygdom som dokumenteret ved mindst 2 sekventielle tests, adskilt af 1 uge, der viser molekylært bevis for leukæmi eller MDS af FISH , cytogenetik eller fluorescerende immunocytometri.
• Patienter, der skal modtage en allogen hæmatopoietisk celletransplantation som behandling for leukæmi eller myelodysplastisk syndrom, der har en forventet risiko for tilbagefald på over 30 %, vil være berettiget til at få donor-afledte WT1-peptid-sensibiliserede T-celler genereret før eller på tidspunktet for transplantationen til øjeblikkelig brug efter transplantation på et sådant tidspunkt, at patienten viser sig at have minimal resterende sygdom eller tilbagefald. Dette omfatter patienter med:
• ALL, AML eller MDS modstandsdygtig over for primær induktionsterapi
• ALL eller AML på et hvilket som helst stadium senere end 1° tilbagefald
• CML i 2° eller mere kronisk fase efter kemoterapi
• CML i vedvarende accelereret fase eller blast krise
• Højrisiko MDS (RAEB og RAEB+), som ikke har reageret eller er vendt tilbage efter induktionskemoterapi
• Patienternes leukæmi eller MDS-blaster skal udtrykke WT1-proteinet, der kan påvises ved immunhistopatologisk analyse, eller; hvis en passende prøve ikke er tilgængelig til testning, skal have en form for leukæmi (ALL, andre AML'er end M5) eller MDS (2° MDS, RAEB, RAEBT), der vides at overudtrykke WT1 i en høj andel af tilfældene (>60 %). For patienter, som udvikler et dokumenteret tilbagefald af leukæmi eller MDS efter transplantation, bør marvaspirater evalueres for andelen af ​​blaster, der udtrykker WT1, ved immunhistologi eller FACS, når det er muligt.
• Patientens hæmatopoietiske celletransplantationsdonor skal give samtykke til en 2 volumen leukaferese eller fuldblodsdonationer opnået ved én flebotomi, som i alt vil udgøre ca. 250 ml, hvorfra de WT-1 specifikke T-celler, der skal bruges til adoptiv overførsel, vil blive genereret
• KPS eller Lansky score > eller lig med 40
• Tilstrækkelig knoglemarvs-, nyre- og leverfunktion på tidspunktet for behandling med WT1-specifikke T-celler:
• Absolut neutrofiltal (ANC) > eller lig med 1000/mm3, med eller uden G-CSF-understøttelse.

Dette krav kan fraviges, hvis patienten har et hæmatologisk tilbagefald af sygdommen, eller hvis patienten endnu ikke er genvundet fra kemoterapi.

• Blodplader > eller lig med 20.000/mm3. Dette krav kan fraviges, hvis patienten har et hæmatologisk tilbagefald af sygdommen, eller hvis patienten endnu ikke er genvundet fra kemoterapi.
• Kreatinin < end eller lig med 2,0 mg/dL
• ALT, ASAT <3,0 og total bilirubin alle < 2,5 x den institutionelle ULN
• Der er ingen aldersbegrænsninger for denne protokol.
• Patienter med tilbagefald også påvist i CNS kan behandles efter denne protokol. Men hvis der administreres intratekal kemoterapi, bør T-celler ikke administreres før mindst 24 timer derefter.

Ekskluderingskriterier:

• Patienter med aktiv (grad 2-4) akut graft vs. host sygdom (GVHD), kronisk GVHD eller en åbenlys autoimmun sygdom (f.eks. hæmolytisk anæmi), der kræver høje doser af glukokortikosteroid (>0,5 mg/kg/dag prednison eller tilsvarende) som behandling.
• Patienter med andre tilstande, der ikke er relateret til leukæmi-tilbagefald (f. veno-okklusiv sygdom eller ukontrolleret bakteriel, viral eller invasiv svampeinfektion), som også er livstruende, og som ville udelukke evaluering af virkningerne af en T-celle-infusion.
• Patienter, der er gravide.

Donorberettigelse til donation af blodlymfocytter til generering af donorafledte WT-1-specifikke T-celler.

Berettigelseskriterierne for donoren af ​​blod, der skal bruges til at generere WT1-peptid-sensibiliserede T-celler er:

• Donoren af ​​WT-1-specifikke T. lymfocytter vil være den samme donor, som leverede patientens hæmatopoietiske stamcelletransplantation (HSCT). Disse normale donorer vil blive evalueret for tegn på forudgående sensibilisering over for EBV ved EBV-serologi. Hvis donoren er seropositiv, og donor-T-celler sensibiliseres med donorens WT-1-peptidfyldte EBV-transformerede B-celler, vil EBV-specifikke T-celler også blive genereret fra seropositive donorer, der genererer WT-1-specifikke T-celler, og deres vækst og persistens efter overførsel vil blive sammenlignet med de WT 1 specifikke T-celler.
• Da donoren allerede vil have gennemgået en omfattende evaluering af hans/hendes helbred for at fastslå berettigelsen til at donere patientens HSCT, vil revurdering af denne bloddonation være begrænset til en klinisk historie, fysisk undersøgelse og blodprøver for at sikre mod enhver ny tilstand som efter donors læges opfattelse udelukker donoren fra at donere det nødvendige blod.
• Nye helbredstilstande, der ville udelukke en transplantationsdonor fra en anden bloddonation, er begrænsede, men inkluderer:
• Ny indtræden af ​​en HIV-infektion
• Anden ukontrolleret infektion, som kunne overføres til patienten af ​​blodceller og ville placere patienten i betydeligt øget risiko for alvorlig morbiditet eller død.
• Betydelig anæmi med Hgb < end eller lig med 10 gm/dl, vedvarende siden tidspunktet for den oprindelige transplantationsdonation.
• Anamnese med myokardieinfarkt eller slagtilfælde siden tidspunktet for HSCT-donation, hvilket kan øge risikoen for bloddonation. En perspektivdonor vil blive informeret om formålet med denne undersøgelse og dens krav. Hvis han/hun giver sit samtykke, vil donoren blive bedt om at give to blodprøver.
• En indledende donation af 25 ml blod antikoaguleret med heparin eller ACD. Dette blod bruges til at etablere en B-cellelinje transfunderet transformeret med B95.8-laboratoriestammerne af EBV. Denne EBV+ B-cellelinje/(EBVBLCL) vil blive brugt som en antigen-præsenterende celle. Når den er fyldt med poolen af ​​WT-1-pentadecapeptider, sensibiliserer EBVBLCL effektivt T-celler fra de samme donorer mod WT-1 såvel som EBV.

Fordi etablering og afprøvning af en EBV-transformeret B-cellelinje, der er egnet til brug som en antigen-præsenterende celle, kræver 4-5 ugers in vitro-dyrkning, er det vigtigt, at denne prøve udtages så tidligt som muligt for patienter med risiko for leukæmi-tilbagefald , da sygdomstilbagefald oftest forekommer 2-6 måneder efter transplantation. Derfor bør denne blodprøve indhentes fra donoren før donation af den hæmatopoietiske progenitorcelletransplantation, når det er muligt.

• En donation af enten en enkelt standard 2-blodvolumen leukaferese opsamlet i standard ACD-antikoagulant. Hvis det er umuligt at indsamle en leukaferese fra nogle af donorerne, vil en enhed fuldblod blive accepteret af AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility, der fremstiller celleprodukter af klinisk kvalitet under GMP-betingelser i MSKCC) til generering af et begrænset antal T-celler. Dette blod er påkrævet for isolering af T-cellerne for at blive sensibiliseret med poolen af ​​WT-1 15-merer påført autologe dendritiske celler eller autologe EBVBLCL og formeret in vitro. Derudover er det nødvendigt at tilvejebringe autologe fødeceller, der er essentielle for at opretholde T-cellevækst uden risiko for at stimulere væksten af ​​alloreaktive T-celler, der er i stand til at inducere GVHD.
• Denne donation af en leukaferese eller en blodenhed vil blive opnået fra ikke-beslægtede HSCT-donorer mindst 2 uger efter deres donation af en HSCT, men så hurtigt som muligt.

Ud over at give skriftligt samtykke til disse donationer af blod med det formål at generere WT-1-specifikke T-celler til potentiel brug i behandlingen af ​​tilbagevendende leukæmi eller vedvarende restsygdom, der udvikler sig hos den patient, for hvem donoren har givet en HSCT, hver donor vil blive informeret om og bedt om at give separat samtykke til hver af følgende potentielle anvendelser af de donerede blodceller:

• Brugen af ​​en brøkdel af cellerne isoleret til at generere immun-T-celler, der er specifikke for vira, såsom Epstein-Barr-virus (EBV) og cytomegalovirus (CMV), der kan forårsage dødelige infektioner eller lymfomer hos transplanterede modtagere. Sådanne T-celler kunne derefter anvendes under separate protokoller til behandling af EBV-associerede sygdomme (IRB 95-024) og/eller til behandling af CMV-infektioner (IRB 05-065) hos patienten, der modtager donorens hæmatopoietiske progenitorcelletransplantation.

Samtykke til denne ansøgning vil begrænse antallet af bloddonationer, der ville være påkrævet af enhver donor, eftersom de hvide blodlegemer, der doneres i en leukaferese, skulle give nok celler til at dyrke immune T-celler mod WT-1, EBV og CMV.

Donation af immun-T-celler, der er specifikke for EBV eller CMV genereret fra donoren, og som ikke bruges til eller kræves af den patient, som de oprindeligt var beregnet til, til en bank af immunceller, som vil blive startet og vedligeholdt kryokonserveret under GMP-betingelser i Adoptiv immuncelleterapifacilitet ved MSKCC, til potentiel brug i behandlingen af ​​andre patienter med EBV-lymfomer eller cytomegalovirusinfektioner, der udtrykker HLA-alleler, der deles af donoren.