Dosisescalatiestudie van WT1-gesensibiliseerde T-cellen voor residuele of recidiverende leukemie na allogene hematopoëtische progenitorceltransplantatie

Inclusiecriteria:

• Voorafgaand aan de behandeling kunnen sommige patiënten diagnostische en/of andere tests van hun WT1-maligne aandoeningen ondergaan om te bepalen of hun ziekte waarschijnlijk zal reageren op behandeling met WT1-specifieke T-cellen. Als alternatief kunnen bloedmonsters nodig zijn voor onderzoekstests om vast te stellen dat de WT1-specifieke T-cellen geen cellen bevatten die tegen de patiënt zouden kunnen reageren. Deze patiënten zullen een aparte toestemming voor de behandeling ondertekenen. Als wordt vastgesteld dat een patiënt in aanmerking komt voor en baat kan hebben bij infusies van WT1 CTL's, zal hij/zij doorgaan met het ondertekenen van de standaardbehandelingstoestemming voor MSKCC IRB # 07-055 en worden ingeschreven en behandeld tijdens de proef, als alle andere geschiktheid aan de criteria wordt voldaan.
• Patiënten die in aanmerking komen voor deze studie zijn onder meer patiënten met een pathologisch bevestigde diagnose van leukemie of myelodysplastisch syndroom (MDS) die, na een allogene hematopoëtische celtransplantatie, een recidief hebben gehad met leukemie, zoals morfologisch aangetoond op perifeer bloeduitstrijkje of beenmergaspiraat, of terugkerende aanhoudende minimale residuele ziekte zoals aangetoond door ten minste 2 opeenvolgende tests met een tussenpoos van ten minste 1 week die moleculair bewijs aantonen van residuele leukemie of MDS door middel van FISH of cytogenetica. Bovendien komen patiënten die een allogene hematopoëtische celtransplantatie zullen ondergaan als behandeling voor leukemie of myelodysplastisch syndroom met een verwacht risico op terugval na transplantatie van >30% in aanmerking voor het laten genereren van donor-afgeleide WT1-peptidespecifieke T-cellen voorafgaand tot of op het moment van transplantatie voor onmiddellijk gebruik na transplantatie op een zodanig moment dat de patiënt een minimale resterende ziekte of terugval blijkt te hebben. Dit omvat patiënten met AML of ALL die ongevoelig zijn voor primaire inductietherapie of in enig stadium later zijn dan de eerste terugval voor AML of ALL, CML in een secundaire chronische fase, versnelde ziekte of na behandeling voor blastaire crisis of RAEB- of RAEBT-stadia van MDS die niet reageerden op of terugkeerden na inductietherapie. Bovendien moet worden gedocumenteerd dat de leukemische of MDS-blasten van de patiënt het WT1-eiwit tot expressie brengen dat detecteerbaar is door immunohistopathologische analyse van diagnostische in paraffine ingebedde beenmergbiopten, verkregen bij de diagnose van terugval of van een type zijn waarvan bekend is dat het WT1 vaak met hoge frequentie tot expressie brengt. Expressie van WT1 zal worden beoordeeld door een wijziging van de techniek van Dupont en Soslow (36) en beoordeeld volgens een aanpassing van de Duitse immunoreactieve score (IRS), die het product is van subscores voor intensiteit van immunoreactiviteit (0-3+) en verdeling van immunoreactiviteit (0-4+). Voor deze studie zullen leukemische ontploffingen met IRS-scores van 4-12 als positief worden beschouwd.
• Een pathologisch bevestigde diagnose van leukemie of MDS.
• Patiënten die al een allogene hematopoëtische celtransplantatie hebben ondergaan en ofwel een gedocumenteerde recidief van leukemie of MDS hebben ofwel terugkerende aanhoudende minimale residuele ziekte hebben zoals gedocumenteerd door ten minste 2 opeenvolgende testen, gescheiden door 1 week, die moleculair bewijs van leukemie of MDS aantonen door FISH , cytogenetica of fluorescerende immunocytometrie.
• Patiënten die een allogene hematopoëtische celtransplantatie zullen ondergaan als behandeling voor leukemie of myelodysplastisch syndroom met een verwacht risico op terugval van meer dan 30%, komen in aanmerking voor donor-afgeleide WT1-peptide-gesensibiliseerde T-cellen die voorafgaand aan of op het moment van transplantatie worden gegenereerd voor onmiddellijk gebruik na transplantatie op het moment dat de patiënt een minimale restziekte of terugval blijkt te hebben. Dit omvat patiënten met:
• ALL, AML of MDS ongevoelig voor primaire inductietherapie
• ALL of AML in elk stadium later dan 1° terugval
• CML in 2° of meer chronische fase na chemotherapie
• CML in aanhoudende acceleratiefase of explosiecrisis
• MDS met een hoog risico (RAEB en RAEB+) dat niet heeft gereageerd of is teruggekeerd na inductiechemotherapie
• De leukemie of MDS-blasten van de patiënt moeten het WT1-eiwit tot expressie brengen dat detecteerbaar is door immunohistopathologische analyse, of; als er geen geschikt monster beschikbaar is om te testen, moet een vorm van leukemie (ALL, AML's anders dan M5) of MDS (2° MDS, RAEB, RAEBT) zijn waarvan bekend is dat het WT1 tot overexpressie brengt in een groot deel van de gevallen (>60 %). Voor patiënten die een gedocumenteerde recidief van leukemie of MDS ontwikkelen na transplantatie, moeten beenmergaspiraten, waar mogelijk, worden beoordeeld op het percentage blasten dat WT1 tot expressie brengt door middel van immunohistologie of FACS.
• De hematopoëtische celtransplantatiedonor van de patiënt moet instemmen met een 2-volume leukaferese of volbloeddonaties verkregen bij één aderlaten, in totaal ongeveer 250 ml waaruit de WT-1-specifieke T-cellen zullen worden gegenereerd die zullen worden gebruikt voor adoptieve overdracht
• KPS- of Lansky-score > of gelijk aan 40
• Adequate beenmerg-, nier- en leverfunctie op het moment van behandeling met WT1-specifieke T-cellen:
• Absoluut aantal neutrofielen (ANC) > of gelijk aan 1000/mm3, met of zonder G-CSF-ondersteuning.

Van deze vereiste kan worden afgezien als de patiënt een hematologische terugval van de ziekte heeft of als de patiënt nog niet is hersteld van chemotherapie.

• Bloedplaatjes > of gelijk aan 20.000/mm3. Van deze vereiste kan worden afgezien als de patiënt een hematologische terugval van de ziekte heeft of als de patiënt nog niet is hersteld van chemotherapie.
• Creatinine < dan of gelijk aan 2,0 mg/dL
• ALT, AST <3,0 en totaal bilirubine alle < 2,5 x de institutionele ULN
• Er zijn geen leeftijdsbeperkingen voor dit protocol.
• Patiënten met een terugval die ook in het CZS wordt gedetecteerd, kunnen volgens dit protocol worden behandeld. Als echter intrathecale chemotherapie wordt toegediend, mogen T-cellen pas ten minste 24 uur daarna worden toegediend.

Uitsluitingscriteria:

• Patiënten met actieve (graad 2-4) acute graft-versus-hostziekte (GVHD), chronische GVHD of een openlijke auto-immuunziekte (bijv. hemolytische anemie) waarvoor hoge doses glucocorticosteroïden (>0,5 mg/kg/dag prednison of een equivalent daarvan) nodig zijn als behandeling.
• Patiënten met andere aandoeningen die geen verband houden met terugval van leukemie (bijv. veno-occlusieve ziekte of ongecontroleerde bacteriële, virale of invasieve schimmelinfectie) die ook levensbedreigend zijn en die evaluatie van de effecten van een T-celinfusie onmogelijk maken.
• Patiënten die zwanger zijn.

Geschiktheid van donor voor donatie van bloedlymfocyten voor het genereren van van een donor afgeleide WT-1-specifieke T-cellen.

De geschiktheidscriteria voor de donor van bloed dat moet worden gebruikt om met WT1-peptide gesensibiliseerde T-cellen te genereren, zijn:

• De donor van WT-1-specifieke T.-lymfocyten zal dezelfde donor zijn die de hematopoëtische stamceltransplantatie (HSCT) van de patiënt heeft geleverd. Deze normale donoren zullen worden beoordeeld op bewijs van eerdere sensibilisatie voor EBV door middel van EBV-serologie. Als de donor seropositief is en donor-T-cellen zijn gesensibiliseerd met de met WT-1-peptide beladen EBV-getransformeerde B-cellen van de donor, zullen ook EBV-specifieke T-cellen worden gegenereerd uit seropositieve donoren die WT-1-specifieke T-cellen genereren, en hun groei en persistentie na overdracht zullen worden vergeleken met die van de WT 1-specifieke T-cellen.
• Aangezien de donor al een uitgebreide evaluatie van zijn/haar gezondheid heeft ondergaan om vast te stellen of hij/zij in aanmerking komt voor het doneren van de HSCT van de patiënt, zal de herevaluatie van deze bloeddonatie beperkt blijven tot een klinische geschiedenis, lichamelijk onderzoek en bloedonderzoek om zich te verzekeren tegen elke nieuwe aandoening. die, naar de mening van de arts van de donor, de donor beletten het vereiste bloed te doneren.
• Nieuwe gezondheidsproblemen die een transplantatiedonor zouden uitsluiten van een tweede bloeddonatie zijn beperkt, maar omvatten:
• Nieuw begin van een hiv-infectie
• Andere ongecontroleerde infectie die door bloedcellen op de patiënt kan worden overgedragen en die de patiënt een aanzienlijk verhoogd risico op ernstige morbiditeit of overlijden zou opleveren.
• Significante bloedarmoede met Hgb < dan of gelijk aan 10 gm/dl, aanhoudend sinds het tijdstip van de oorspronkelijke transplantatiedonatie.
• Geschiedenis van een hartinfarct of beroerte sinds de HSCT-donatie, wat het risico op bloeddonatie zou kunnen verhogen. Een potentiële donor zal worden geïnformeerd over de doeleinden van deze studie en de vereisten. Als hij/zij ermee instemt, wordt de donor gevraagd om twee bloedafnames te doen.
• Een eerste donatie van 25 ml bloed ontstold met heparine of ACD. Dit bloed wordt gebruikt om een ​​B-cellijn tot stand te brengen die getransfundeerd is en getransformeerd is met de B95.8-laboratoriumstammen van EBV. Deze EBV+ B-cellijn (EBVBLCL) zal worden gebruikt als een antigeenpresenterende cel. Wanneer geladen met de pool van WT-1-pentadecapeptiden, sensibiliseert de EBVBCLL op efficiënte wijze T-cellen van dezelfde donoren tegen zowel WT-1 als EBV.

Omdat het opzetten en testen van een EBV-getransformeerde B-cellijn die geschikt is voor gebruik als een antigeenpresenterende cel 4-5 weken in vitro-kweek vereist, is het belangrijk dat dit monster zo snel mogelijk wordt verkregen voor patiënten met een risico op terugval van leukemie. , aangezien terugval van de ziekte het vaakst optreedt 2-6 maanden na de transplantatie. Daarom moet dit bloedmonster, indien mogelijk, vóór de donatie van de hematopoëtische voorloperceltransplantatie van de donor worden afgenomen.

• Een donatie van ofwel een enkele standaard leukaferese met 2 bloedvolumes, verzameld in standaard ACD-anticoagulantia. Als het onmogelijk is om bij sommige donoren een leukaferese af te nemen, wordt een eenheid volbloed geaccepteerd door de AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility die de celproducten van klinische kwaliteit produceert onder GMP-voorwaarden in MSKCC) voor het genereren van een beperkt aantal T-cellen. Dit bloed is nodig voor isolatie van de T-cellen die moeten worden gesensibiliseerd met de pool van WT-1 15-meren geladen op autologe dendritische cellen of autologe EBVBLCL, en in vitro gepropageerd. Bovendien is het vereist om autologe voedingscellen te leveren die essentieel zijn om de groei van T-cellen te ondersteunen zonder het risico van het stimuleren van de groei van alloreactieve T-cellen die GVHD kunnen induceren.
• Deze donatie van een leukaferese of een eenheid bloed wordt verkregen van niet-verwante HSCT-donoren ten minste 2 weken na hun donatie van een HSCT, maar zo snel mogelijk daarna.

Naast het geven van schriftelijke toestemming voor deze donaties van bloed met als doel het genereren van WT-1-specifieke T-cellen voor mogelijk gebruik bij de behandeling van recidiverende leukemie of aanhoudende resterende ziekte die zich ontwikkelt bij de patiënt voor wie de donor een HSCT heeft verstrekt, elke donor wordt geïnformeerd over en gevraagd om afzonderlijke toestemming te geven voor elk van de volgende mogelijke toepassingen van de gedoneerde bloedcellen:

• Het gebruik van een fractie van de geïsoleerde cellen om immuun-T-cellen te genereren die specifiek zijn voor virussen, zoals het Epstein-Barr-virus (EBV) en het cytomegalovirus (CMV), die dodelijke infecties of lymfomen kunnen veroorzaken bij ontvangers van transplantaties. Dergelijke T-cellen zouden vervolgens onder afzonderlijke protocollen kunnen worden gebruikt om EBV-geassocieerde ziekten (IRB 95-024) te behandelen en/of om CMV-infecties (IRB 05-065) te behandelen bij de patiënt die de hematopoietische voorloperceltransplantatie van de donor ontvangt.

Instemming met deze aanvraag beperkt het aantal bloeddonaties dat van een donor zou worden verlangd, aangezien de witte bloedcellen die bij een leukaferese worden gedoneerd voldoende cellen zouden moeten leveren om immuun-T-cellen tegen WT-1, EBV en CMV te laten groeien.

De donatie van immuun-T-cellen specifiek voor EBV of CMV gegenereerd door de donor die niet worden gebruikt voor of vereist zijn door de patiënt voor wie ze oorspronkelijk bedoeld waren, aan een bank van immuuncellen die zal worden gestart en gecryopreserveerd onder GMP-voorwaarden in de Faciliteit voor adoptieve immuunceltherapie bij MSKCC, voor mogelijk gebruik bij de behandeling van andere patiënten met EBV-lymfomen of cytomegalovirusinfecties die HLA-allelen tot expressie brengen die door de donor worden gedeeld.