Essai d'escalade de dose de cellules T sensibilisées au WT1 pour la leucémie résiduelle ou récidivante après une greffe allogénique de cellules progénitrices hématopoïétiques

Critère d'intégration:

• Avant de recevoir un traitement, certains patients peuvent subir un diagnostic et/ou d'autres tests de leurs tumeurs malignes WT1 pour déterminer si leur maladie est susceptible de répondre au traitement avec des lymphocytes T spécifiques de WT1. Alternativement, des échantillons de sang peuvent être nécessaires pour des tests de recherche afin de vérifier que les lymphocytes T spécifiques au WT1 ne contiennent aucune cellule susceptible de réagir contre le patient. Ces patients signeront un consentement préalable au traitement séparé. S'il est déterminé qu'un patient sera admissible et pourrait bénéficier de perfusions de CTL WT1, il signera le consentement de traitement standard pour MSKCC IRB # 07-055 et sera inscrit et traité à l'essai, si toutes les autres conditions d'éligibilité critères sont remplis.
• Les patients éligibles pour cet essai incluront des patients avec un diagnostic pathologiquement confirmé de leucémie ou de syndrome myélodysplasique (SMD) qui, à la suite d'une allogreffe de cellules hématopoïétiques, ont rechuté avec une leucémie comme démontré morphologiquement sur un frottis sanguin périphérique ou une aspiration de moelle osseuse, ou ont une récidive persistante maladie résiduelle minimale démontrée par au moins 2 tests séquentiels séparés d'au moins 1 semaine démontrant des preuves moléculaires de leucémie résiduelle ou de SMD par FISH ou cytogénétique. De plus, les patients qui doivent recevoir une allogreffe de cellules hématopoïétiques pour le traitement d'une leucémie ou d'un syndrome myélodysplasique dont le risque de rechute post-greffe est > 30 % seront éligibles pour avoir des cellules T spécifiques du peptide WT1 dérivées du donneur générées avant avant ou au moment de la greffe pour une utilisation immédiate après la greffe à un moment où le patient présente une maladie résiduelle ou une rechute minimale. Cela inclut les patients atteints de LMA ou de LAL qui sont soit réfractaires au traitement d'induction primaire, soit à n'importe quel stade après la première rechute de la LMA ou de la LAL, de la LMC en phase chronique secondaire, d'une maladie accélérée ou après un traitement pour une crise blastique ou des stades AREB ou RAEBT de SMD qui n'ont pas répondu ou qui ont récidivé après le traitement d'induction. En outre, les blastes leucémiques ou MDS du patient doivent être documentés pour exprimer la protéine WT1 détectable par analyse immunohistopathologique de biopsies diagnostiques de moelle osseuse en paraffine, obtenues lors du diagnostic de rechute ou être d'un type connu pour exprimer couramment WT1 à haute fréquence. L'expression de WT1 sera évaluée par une modification de la technique de Dupont et Soslow (36) et graduée selon une adaptation du score immunoréactif allemand (IRS) qui est le produit de sous-scores pour l'intensité de l'immunoréactivité (0-3+) et distribution de l'immunoréactivité (0-4+). Pour cette étude, les blastes leucémiques avec des scores IRS de 4 à 12 seront considérés comme positifs.
• Un diagnostic pathologiquement confirmé de leucémie ou de SMD.
• Patients ayant déjà reçu une allogreffe de cellules hématopoïétiques et présentant soit une rechute documentée de leucémie ou de SMD, soit une maladie résiduelle minimale persistante récurrente, documentée par au moins 2 tests séquentiels, séparés d'une semaine, démontrant des preuves moléculaires de leucémie ou de SMD par FISH , la cytogénétique ou l'immunocytométrie fluorescente.
• Les patients qui doivent recevoir une allogreffe de cellules hématopoïétiques pour le traitement d'une leucémie ou d'un syndrome myélodysplasique présentant un risque de rechute attendu supérieur à 30 % seront éligibles pour avoir des cellules T sensibilisées au peptide WT1 dérivées du donneur générées avant ou au moment de la greffe pour une utilisation immédiate après la greffe à un moment où le patient présente une maladie résiduelle ou une rechute minimale. Cela inclut les patients avec :
• LAL, LAM ou SMD réfractaire au traitement d'induction primaire
• ALL ou AML à n'importe quel stade après 1° rechute
• LMC en phase chronique de 2° ou plus après chimiothérapie
• LMC en phase accélérée persistante ou en crise blastique
• SMD à haut risque (AREB et AREB+) qui n'a pas répondu ou qui a récidivé après une chimiothérapie d'induction
• Les blastes leucémiques ou SMD des patients doivent exprimer la protéine WT1 détectable par analyse immunohistopathologique, ou ; si un échantillon adéquat n'est pas disponible pour le test, , doit avoir une forme de leucémie (ALL, AMLs autres que M5) ou MDS (2° MDS, RAEB, RAEBT) connue pour surexprimer WT1 dans une forte proportion de cas (>60 %). Pour les patients qui développent une rechute documentée de leucémie ou de SMD après une greffe, les aspirations de moelle doivent être évaluées pour la proportion de blastes exprimant WT1 par immunohistologie ou FACS chaque fois que possible.
• Le donneur de greffe de cellules hématopoïétiques du patient doit consentir à une leucaphérèse en 2 volumes ou à des dons de sang total obtenus lors d'une phlébotomie qui totaliseront environ 250 ml à partir desquels les cellules T spécifiques WT-1 à utiliser pour le transfert adoptif seront générées
• Score KPS ou Lansky > ou égal à 40
• Fonctions médullaire, rénale et hépatique adéquates au moment du traitement avec des lymphocytes T spécifiques de WT1 :
• Nombre absolu de neutrophiles (ANC) > ou égal à 1000/mm3, avec ou sans support G-CSF.

Cette exigence peut être levée si le patient a une rechute hématologique de la maladie ou si le patient n'a pas encore récupéré les chiffres de la chimiothérapie.

• Plaquettes > ou égales à 20 000/mm3. Cette exigence peut être levée si le patient a une rechute hématologique de la maladie ou si le patient n'a pas encore récupéré les chiffres de la chimiothérapie.
• Créatinine < ou égale à 2,0 mg/dL
• ALT, AST < 3,0 et bilirubine totale tous < 2,5 x la LSN institutionnelle
• Il n'y a pas de limite d'âge pour ce protocole.
• Les patients présentant une rechute également détectée dans le SNC peuvent être traités selon ce protocole. Cependant, si une chimiothérapie intrathécale est administrée, les cellules T ne doivent pas être administrées avant au moins 24 heures après.

Critère d'exclusion:

• Patients atteints d'une maladie aiguë du greffon contre l'hôte (GVHD) active (grade 2-4), d'une GVHD chronique ou d'une maladie auto-immune manifeste (par ex. anémie hémolytique) nécessitant de fortes doses de glucocorticoïdes (>0,5 mg/kg/jour de prednisone ou son équivalent) comme traitement.
• Les patients atteints d'autres affections non liées à une rechute leucémique (par ex. maladie veino-occlusive ou infection bactérienne, virale ou fongique invasive non contrôlée) qui mettent également en jeu le pronostic vital et qui empêcheraient l'évaluation des effets d'une perfusion de lymphocytes T.
• Patientes enceintes.

Admissibilité des donneurs au don de lymphocytes sanguins pour la génération de cellules T spécifiques au WT-1 dérivées de donneurs.

Les critères d'éligibilité du donneur de sang à utiliser pour générer des lymphocytes T sensibilisés au peptide WT1 sont :

• Le donneur de lymphocytes T spécifiques de WT-1 sera le même donneur qui a fourni la greffe de cellules souches hématopoïétiques (GCSH) du patient. Ces donneurs normaux seront évalués pour la preuve d'une sensibilisation antérieure à l'EBV par sérologie EBV. Si le donneur est séropositif et que les lymphocytes T du donneur sont sensibilisés avec les lymphocytes B transformés par l'EBV chargés de peptides WT-1 du donneur, des lymphocytes T spécifiques à l'EBV seront également générés à partir de donneurs séropositifs générant des lymphocytes T spécifiques au WT-1, et leur la croissance et la persistance après le transfert seront comparées à celles des lymphocytes T spécifiques de WT 1 .
• Étant donné que le donneur aura déjà subi une évaluation approfondie de sa santé pour déterminer son admissibilité au don de la GCSH du patient, la réévaluation de ce don de sang se limitera à une histoire clinique, un examen physique et des tests sanguins pour s'assurer contre toute nouvelle condition. qui, de l'avis du médecin du donneur, l'empêchent de donner le sang requis.
• Les nouvelles conditions de santé qui excluraient un donneur de greffe d'un deuxième don de sang sont limitées, mais comprennent :
• Nouvelle apparition d'une infection à VIH
• Autre infection non maîtrisée qui pourrait être transmise au patient par les cellules sanguines et exposerait le patient à un risque accru significatif de morbidité grave ou de décès.
• Anémie significative avec Hb < ou égale à 10 g/dl, persistant depuis le moment du don de greffe initial.
• Antécédents d'infarctus du myocarde ou d'accident vasculaire cérébral depuis le moment du don de HSCT, ce qui pourrait augmenter le risque de don de sang. Un donateur potentiel sera informé des objectifs de cette étude et de ses exigences. S'il y consent, il sera demandé au donneur de fournir deux prélèvements sanguins.
• Un premier don de 25 ml de sang anticoagulé à l'héparine ou à l'ACD. Ce sang est utilisé pour établir une lignée cellulaire B transfusée transformée avec les souches de laboratoire B95.8 d'EBV. Cette lignée cellulaire EBV+ B/(EBVBLCL) sera utilisée comme cellule présentatrice d'antigène. Lorsqu'ils sont chargés avec le pool de pentadécapeptides WT-1, les EBVBLCL sensibilisent efficacement les cellules T des mêmes donneurs contre WT-1 ainsi que contre EBV.

Étant donné que l'établissement et le test d'une lignée de cellules B transformées par l'EBV pouvant être utilisée comme cellule présentatrice d'antigène nécessitent 4 à 5 semaines de culture in vitro, il est important que cet échantillon soit obtenu le plus tôt possible pour les patients à risque de rechute leucémique. , puisque la rechute de la maladie survient le plus souvent 2 à 6 mois après la greffe. En conséquence, cet échantillon de sang doit être obtenu auprès du donneur avant le don de la greffe de cellules progénitrices hématopoïétiques dans la mesure du possible.

• Un don d'une seule leucaphérèse standard de 2 volumes sanguins recueillie dans un anticoagulant ACD standard. S'il est impossible de collecter une leucaphérèse de certains des donneurs, une unité de sang total sera acceptée par l'AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility fabriquant les produits cellulaires de qualité clinique dans des conditions GMP dans MSKCC) pour la génération d'un nombre limité de Cellules T. Ce sang est nécessaire pour l'isolement des lymphocytes T à sensibiliser avec le pool de WT-1 15-mers chargés sur des cellules dendritiques autologues ou EBVBLCL autologues, et propagés in vitro. De plus, il est nécessaire de fournir des cellules nourricières autologues essentielles pour soutenir la croissance des lymphocytes T sans risquer de stimuler la croissance des lymphocytes T alloréactifs capables d'induire la GVHD.
• Ce don d'une leucaphérèse ou d'une unité de sang sera obtenu auprès de donneurs de HSCT non apparentés au moins 2 semaines après leur don d'une HSCT, mais le plus tôt possible par la suite.

En plus de fournir un consentement écrit à ces dons de sang dans le but de générer des lymphocytes T spécifiques de WT-1 pour une utilisation potentielle dans le traitement de la leucémie récurrente ou d'une maladie résiduelle persistante se développant chez le patient pour lequel le donneur a fourni une GCSH, chaque donneur sera informé et invité à fournir un consentement séparé pour chacune des applications potentielles suivantes des cellules sanguines données :

• L'utilisation d'une fraction des cellules isolées pour générer des lymphocytes T immunitaires spécifiques des virus, tels que le virus d'Epstein-Barr (EBV) et le cytomégalovirus (CMV), qui peuvent provoquer des infections mortelles ou des lymphomes chez les receveurs de greffe. Ces cellules T pourraient ensuite être utilisées, dans le cadre de protocoles distincts, pour traiter les maladies associées à l'EBV (IRB 95-024) et/ou pour traiter les infections à CMV (IRB 05-065) chez le patient recevant la greffe de cellules progénitrices hématopoïétiques du donneur.

Le consentement à cette demande limitera le nombre de dons de sang qui seraient exigés de tout donneur, puisque les globules blancs donnés lors d'une leucaphérèse devraient fournir suffisamment de cellules pour développer des lymphocytes T immunitaires contre le WT-1, l'EBV et le CMV.

Le don de lymphocytes T immunitaires spécifiques de l'EBV ou du CMV générés à partir du donneur qui ne sont pas utilisés ou requis par le patient auquel ils étaient initialement destinés à une banque de cellules immunitaires qui seront démarrées et maintenues cryopréservées dans des conditions GMP dans le Installation de thérapie cellulaire immunitaire adoptive au MSKCC, pour une utilisation potentielle dans le traitement d'autres patients atteints de lymphomes EBV ou d'infections à cytomégalovirus qui expriment les allèles HLA partagés par le donneur.