Doseeskaleringsforsøk av WT1-sensibiliserte T-celler for gjenværende eller tilbakefallende leukemi etter allogen hematopoietisk stamcelletransplantasjon

Inklusjonskriterier:

• Før de mottar behandling, kan noen pasienter gjennomgå diagnostisk og/eller annen testing av WT1-maligniteter for å avgjøre om deres sykdom sannsynligvis vil reagere på behandling med WT1-spesifikke T-celler. Alternativt kan det være nødvendig med blodprøver for forskningstester for å fastslå at de WT1-spesifikke T-cellene ikke inneholder noen celler som kan reagere mot pasienten. Disse pasientene vil signere et eget samtykke før behandling. Hvis det fastslås at en pasient vil kvalifisere for og kan ha nytte av infusjoner av WT1 CTL, vil han/hun fortsette å signere standard behandlingssamtykke for MSKCC IRB # 07-055 og bli registrert og behandlet på prøve, hvis alle andre kvalifikasjoner kriterier er oppfylt.
• Pasienter som er kvalifisert for denne studien vil inkludere pasienter med en patologisk bekreftet diagnose av leukemi eller myelodysplastisk syndrom (MDS) som, etter en allogen hematopoietisk celletransplantasjon, har fått tilbakefall med leukemi som påvist morfologisk på perifert blodutstryk eller benmargsaspirat, eller har tilbakevendende vedvarende. minimal gjenværende sykdom som demonstrert ved minst 2 sekvensielle tester atskilt med minst 1 uke som viser molekylære bevis på gjenværende leukemi eller MDS av FISH eller cytogenetikk. I tillegg vil pasienter som skal motta en allogen hematopoetisk celletransplantasjon som behandling for en leukemi eller myelodysplastisk syndrom som har en forventet risiko for tilbakefall etter transplantasjon på >30 %, være kvalifisert til å få donoravledede WT1-peptidspesifikke T-celler generert før til eller på tidspunktet for transplantasjon for umiddelbar bruk etter transplantasjon på et slikt tidspunkt at pasienten viser seg å ha minimal gjenværende sykdom eller tilbakefall. Dette inkluderer pasienter med AML eller ALL som enten er refraktære overfor primær induksjonsterapi eller er på et hvilket som helst stadium senere enn første tilbakefall for AML eller ALL, KML i en sekundær kronisk fase, akselerert sykdom eller etter behandling for blast krise eller RAEB eller RAEBT stadier av MDS som ikke har respondert på eller gjentatt etter induksjonsterapi. Videre bør pasientens leukemi- eller MDS-blaster dokumenteres for å uttrykke WT1-proteinet som kan påvises ved immunhistopatologisk analyse av diagnostiske parafininnstøpte margbiopsier, oppnådd ved diagnose av tilbakefall eller være av en type kjent for å ofte uttrykke WT1 ved høy frekvens. Uttrykk av WT1 vil bli vurdert ved en modifikasjon av teknikken til Dupont og Soslow (36) og gradert i henhold til en tilpasning av den tyske immunoreaktive poengsummen (IRS) som er produktet av subscores for intensiteten av immunreaktivitet (0-3+) og fordeling av immunreaktivitet (0-4+). For denne studien vil leukemieksplosjoner med IRS-score på 4-12 anses som positive.
• En patologisk bekreftet diagnose av leukemi eller MDS.
• Pasienter som allerede har mottatt en allogen hematopoetisk celletransplantasjon og har enten dokumentert tilbakefall av leukemi eller MDS eller har tilbakevendende vedvarende minimal gjenværende sykdom som dokumentert ved minst 2 sekvensielle tester, adskilt med 1 uke, som viser molekylære bevis på leukemi eller MDS av FISH , cytogenetikk eller fluorescerende immunocytometri.
• Pasienter som skal motta en allogen hematopoetisk celletransplantasjon som behandling for en leukemi eller myelodysplastisk syndrom som har en forventet risiko for tilbakefall på over 30 %, vil være kvalifisert til å få donor-avledede WT1-peptid-sensibiliserte T-celler generert før eller på tidspunktet for transplantasjonen. for umiddelbar bruk etter transplantasjon på et slikt tidspunkt at pasienten viser seg å ha minimal gjenværende sykdom eller tilbakefall. Dette inkluderer pasienter med:
• ALL, AML eller MDS motstandsdyktig mot primær induksjonsterapi
• ALL eller AML på et hvilket som helst stadium senere enn 1° tilbakefall
• KML i 2° eller mer kronisk fase etter kjemoterapi
• CML i vedvarende akselerert fase eller eksplosjonskrise
• Høyrisiko MDS (RAEB og RAEB+) som ikke har respondert eller har gjentatt seg etter induksjonskjemoterapi
• Pasientenes leukemi- eller MDS-blaster må uttrykke WT1-proteinet som kan påvises ved immunhistopatologisk analyse, eller; hvis en tilstrekkelig prøve ikke er tilgjengelig for testing, må , ha en form for leukemi (ALL, andre AML enn M5) eller MDS (2° MDS, RAEB, RAEBT) kjent for å overuttrykke WT1 i en høy andel av tilfellene (>60 %). For pasienter som utvikler et dokumentert tilbakefall av leukemi eller MDS etter transplantasjon, bør margaspirater evalueres for andelen blaster som uttrykker WT1 ved immunhistologi eller FACS når det er mulig.
• Pasientens hematopoetiske celletransplantasjonsdonor må samtykke til en 2-volums leukaferese eller fullblodsdonasjoner oppnådd ved én flebotomi som totalt vil utgjøre ca. 250 ml hvorfra de WT-1-spesifikke T-cellene som skal brukes til adoptivoverføring vil bli generert
• KPS eller Lansky score > eller lik 40
• Tilstrekkelig benmarg-, nyre- og leverfunksjon ved behandlingstidspunktet med WT1-spesifikke T-celler:
• Absolutt nøytrofiltall (ANC) > eller lik 1000/mm3, med eller uten G-CSF-støtte.

Dette kravet kan fravikes hvis pasienten har hematologisk tilbakefall av sykdom eller hvis pasienten ennå ikke har gjenopprettet tallene fra kjemoterapi.

• Blodplater > eller lik 20 000/mm3. Dette kravet kan fravikes hvis pasienten har hematologisk tilbakefall av sykdom eller hvis pasienten ennå ikke har gjenopprettet antall fra kjemoterapi.
• Kreatinin < enn eller lik 2,0 mg/dL
• ALAT, ASAT <3,0 og total bilirubin alle < 2,5 x institusjonell ULN
• Det er ingen aldersbegrensninger for denne protokollen.
• Pasienter med tilbakefall også oppdaget i CNS kan behandles på denne protokollen. Imidlertid, hvis intratekal kjemoterapi administreres, bør T-celler ikke administreres før minst 24 timer etterpå.

Ekskluderingskriterier:

• Pasienter med aktiv (grad 2-4) akutt graft vs. vert sykdom (GVHD), kronisk GVHD eller en åpenbar autoimmun sykdom (f.eks. hemolytisk anemi) som krever høye doser glukokortikosteroid (>0,5 mg/kg/dag prednison eller tilsvarende) som behandling.
• Pasienter med andre tilstander som ikke er relatert til leukemi tilbakefall (f. veno-okklusiv sykdom eller ukontrollert bakteriell, viral eller invasiv soppinfeksjon) som også er livstruende og som vil utelukke evaluering av effekten av en T-celleinfusjon.
• Pasienter som er gravide.

Donor berettiget til donasjon av blodlymfocytter for generering av donoravledede WT-1-spesifikke T-celler.

Kvalifikasjonskriteriene for blodgiveren som skal brukes til å generere WT1-peptidsensibiliserte T-celler er:

• Donoren av WT-1-spesifikke T. lymfocytter vil være den samme giveren som ga pasientens hematopoietiske stamcelletransplantasjon (HSCT). Disse normale donorene vil bli evaluert for bevis på tidligere sensibilisering for EBV ved EBV-serologi. Hvis giveren er seropositiv, og donor-T-celler er sensibilisert med donorens WT-1-peptidladede EBV-transformerte B-celler, vil EBV-spesifikke T-celler også genereres fra seropositive donorer som genererer WT-1-spesifikke T-celler, og deres vekst og utholdenhet etter overføring vil bli sammenlignet med den for de WT 1-spesifikke T-cellene.
• Siden giveren allerede vil ha gjennomgått en omfattende evaluering av hans/hennes helse for å fastslå kvalifikasjonen til å donere pasientens HSCT, vil reevaluering for denne bloddonasjonen være begrenset til en klinisk historie, fysisk undersøkelse og blodprøver for å sikre mot enhver ny tilstand som etter giverens leges oppfatning utelukker giveren fra å gi det nødvendige blodet.
• Nye helsetilstander som vil utelukke en transplantasjonsgiver fra en ny bloddonasjon er begrenset, men inkluderer:
• Ny oppstart av en HIV-infeksjon
• Annen ukontrollert infeksjon som kan overføres til pasienten med blodceller og vil gi pasienten betydelig økt risiko for alvorlig sykelighet eller død.
• Betydelig anemi med Hgb < enn eller lik 10 gm/dl, vedvarer siden den opprinnelige transplantasjonsdonasjonen.
• Anamnese med hjerteinfarkt eller hjerneslag siden tidspunktet for HSCT-donasjon som kan øke risikoen for bloddonasjon. En perspektivgiver vil bli informert om formålet med denne studien og dens krav. Dersom han/hun samtykker, vil giveren bli bedt om å gi to blodprøver.
• En første donasjon av 25 ml blod antikoagulert med heparin eller ACD. Dette blodet brukes til å etablere en B-cellelinje transfundert transformert med B95.8-laboratoriestammene av EBV. Denne EBV+ B-cellelinjen/(EBVBLCL) vil bli brukt som en antigenpresenterende celle. Når den er lastet med poolen av WT-1-pentadekapeptider, sensibiliserer EBVBLCL effektivt T-celler fra de samme giverne mot WT-1 så vel som EBV.

Fordi etablering og testing av en EBV-transformert B-cellelinje som er egnet for bruk som en antigenpresenterende celle krever 4-5 ukers in vitro-kultur, er det viktig at denne prøven tas så tidlig som mulig for pasienter med risiko for tilbakefall av leukemi. , siden tilbakefall av sykdommen oftest forekommer 2-6 måneder etter transplantasjon. Følgelig bør denne blodprøven innhentes fra giveren før donasjon av den hematopoetiske progenitorcelletransplantasjonen når det er mulig.

• En donasjon av enten en enkelt standard 2 blodvolum leukaferese samlet i standard ACD antikoagulant. Hvis det er umulig å samle en leukaferese fra noen av donorene, vil en enhet fullblod bli akseptert av AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility som produserer celleprodukter av klinisk kvalitet under GMP-betingelser i MSKCC) for generering av et begrenset antall T-celler. Dette blodet er nødvendig for isolering av T-cellene for å bli sensibilisert med poolen av WT-1 15-merer lastet på autologe dendrittiske celler eller autologe EBVBLCL, og forplantet in vitro. I tillegg er det nødvendig å tilveiebringe autologe fødeceller som er essensielle for å opprettholde T-cellevekst uten risiko for å stimulere veksten av alloreaktive T-celler som er i stand til å indusere GVHD.
• Denne donasjonen av en leukaferese eller en blodenhet vil bli innhentet fra ubeslektede HSCT-givere minst 2 uker etter deres donasjon av en HSCT, men så snart som mulig.

I tillegg til å gi skriftlig samtykke til disse bloddonasjonene med det formål å generere WT-1-spesifikke T-celler for potensiell bruk i behandlingen av tilbakevendende leukemi eller vedvarende gjenværende sykdom som utvikles hos pasienten som giveren har gitt en HSCT for, hver giver vil bli informert om og bedt om å gi separat samtykke til hver av følgende potensielle anvendelser av blodcellene som doneres:

• Bruk av en brøkdel av cellene isolert for å generere immun-T-celler spesifikke for virus, slik som Epstein-Barr-virus (EBV) og cytomegalovirus (CMV), som kan forårsake dødelige infeksjoner eller lymfomer hos transplanterte mottakere. Slike T-celler kan deretter brukes, under separate protokoller, for å behandle EBV-assosierte sykdommer (IRB 95-024) og/eller for å behandle CMV-infeksjoner (IRB 05-065) hos pasienten som mottar donorens hematopoetiske stamcelletransplantasjon.

Samtykke til denne søknaden vil begrense antallet bloddonasjoner som vil kreves av enhver donor, siden de hvite cellene donert i en leukaferese bør gi nok celler til å dyrke immune T-celler mot WT-1, EBV og CMV.

Donasjon av immune T-celler spesifikke for EBV eller CMV generert fra giveren som ikke brukes til eller kreves av pasienten som de opprinnelig var ment for, til en bank av immunceller som vil bli startet og vedlikeholdt kryokonservert under GMP-forhold i Adoptive Immune Cell Therapy Facility ved MSKCC, for potensiell bruk i behandling av andre pasienter med EBV-lymfomer eller cytomegalovirusinfeksjoner som uttrykker HLA-alleler som deles av giveren.