Ensayo de aumento de dosis de células T sensibilizadas con WT1 para leucemia residual o recidivante después de trasplante alogénico de células progenitoras hematopoyéticas

Criterios de inclusión:

• Antes de recibir tratamiento, algunos pacientes pueden someterse a pruebas de diagnóstico y/u otras pruebas de sus tumores malignos WT1 para determinar si es probable que su enfermedad responda al tratamiento con células T específicas de WT1. Alternativamente, se pueden requerir muestras de sangre para pruebas de investigación para determinar que las células T específicas de WT1 no contengan ninguna célula que pueda reaccionar contra el paciente. Estos pacientes firmarán un consentimiento previo al tratamiento por separado. Si se determina que un paciente calificará y podría beneficiarse de las infusiones de CTL WT1, él/ella firmará el consentimiento de tratamiento estándar para MSKCC IRB n.° 07-055 y será inscrito y tratado en el ensayo, si todos los demás requisitos de elegibilidad se cumplen los criterios.
• Los pacientes elegibles para este ensayo incluirán pacientes con un diagnóstico patológicamente confirmado de leucemia o síndrome mielodisplásico (SMD) que, después de un alotrasplante de células hematopoyéticas, hayan recaído con leucemia como se demuestra morfológicamente en frotis de sangre periférica o aspirado de médula ósea, o tienen leucemia persistente recurrente. enfermedad residual mínima demostrada por al menos 2 pruebas secuenciales separadas por al menos 1 semana que demuestre evidencia molecular de leucemia residual o MDS por FISH o citogenética. Además, los pacientes que vayan a recibir un alotrasplante de células hematopoyéticas como tratamiento para una leucemia o un síndrome mielodisplásico que tenga un riesgo esperado de recaída después del trasplante de >30 % serán elegibles para que se generen antes células T específicas del péptido WT1 derivadas de un donante. para o en el momento del trasplante para uso inmediato después del trasplante en el momento en que se descubra que el paciente tiene una enfermedad residual mínima o una recaída. Esto incluye pacientes con LMA o LLA que es refractaria a la terapia de inducción primaria o que se encuentra en cualquier etapa posterior a la primera recaída de LMA o LLA, LMC en una fase crónica secundaria, enfermedad acelerada o después del tratamiento para crisis blástica o estadios de RAEB o RAEBT de MDS que no respondieron o recurrieron después de la terapia de inducción. Además, se debe documentar que los blastos leucémicos o SMD del paciente expresan la proteína WT1 detectable por análisis inmunohistopatológico de biopsias de médula ósea incrustadas en parafina, obtenidas en el diagnóstico de recaída o ser de un tipo conocido por expresar comúnmente WT1 con alta frecuencia. La expresión de WT1 se evaluará mediante una modificación de la técnica de Dupont y Soslow (36) y se calificará de acuerdo con una adaptación de la puntuación inmunorreactiva alemana (IRS), que es el producto de las subpuntuaciones de intensidad de inmunorreactividad (0-3+) y distribución de la inmunorreactividad (0-4+). Para este estudio, los blastos leucémicos con puntajes IRS de 4 a 12 se considerarán positivos.
• Un diagnóstico patológicamente confirmado de leucemia o SMD.
• Pacientes que ya han recibido un alotrasplante de células hematopoyéticas y tienen una recaída documentada de leucemia o MDS o tienen enfermedad residual mínima persistente documentada por al menos 2 pruebas secuenciales, separadas por 1 semana, que demuestran evidencia molecular de leucemia o MDS por FISH , citogenética o inmunocitometría fluorescente.
• Los pacientes que van a recibir un alotrasplante de células hematopoyéticas como tratamiento para una leucemia o un síndrome mielodisplásico que tiene un riesgo esperado de recaída superior al 30 % serán elegibles para que se generen células T sensibilizadas con el péptido WT1 derivadas del donante antes o en el momento del trasplante. para uso inmediato después del trasplante en el momento en que se encuentre que el paciente tiene una enfermedad residual mínima o una recaída. Esto incluye pacientes con:
• ALL, AML o MDS refractarios a la terapia de inducción primaria
• ALL o AML en cualquier etapa posterior a la 1° recaída
• LMC en 2° o mayor fase crónica después de quimioterapia
• LMC en fase acelerada persistente o crisis blástica
• MDS de alto riesgo (RAEB y RAEB+) que no ha respondido o ha reaparecido después de la quimioterapia de inducción
• Los blastos de leucemia o MDS de los pacientes deben expresar la proteína WT1 detectable por análisis inmunohistopatológico, o; si no se dispone de una muestra adecuada para la prueba, debe tener una forma de leucemia (LLA, AML distintas de M5) o MDS (2° MDS, RAEB, RAEBT) conocida por sobreexpresar WT1 en una alta proporción de casos (>60 %). Para los pacientes que desarrollan una recaída documentada de leucemia o SMD después del trasplante, se debe evaluar la proporción de blastos que expresan WT1 en los aspirados de médula mediante inmunohistología o FACS siempre que sea posible.
• El donante del trasplante de células hematopoyéticas del paciente debe dar su consentimiento para una leucaféresis de 2 volúmenes o donaciones de sangre completa obtenidas en una flebotomía que totalizarán aproximadamente 250 ml a partir de los cuales se generarán las células T específicas de WT-1 que se utilizarán para la transferencia adoptiva.
• Puntuación KPS o Lansky > o igual a 40
• Función adecuada de la médula ósea, renal y hepática en el momento del tratamiento con células T específicas de WT1:
• Recuento absoluto de neutrófilos (RAN) > o igual a 1000/mm3, con o sin apoyo de G-CSF.

Este requisito puede no aplicarse si el paciente tiene una recaída hematológica de la enfermedad o si el paciente aún no ha recuperado los recuentos de la quimioterapia.

• Plaquetas > o igual a 20.000/mm3. Este requisito puede no aplicarse si el paciente tiene una recaída hematológica de la enfermedad o si el paciente aún no ha recuperado los recuentos de la quimioterapia.
• Creatinina < o igual a 2,0 mg/dL
• ALT, AST <3,0 y bilirrubina total todos <2,5 x el ULN institucional
• No hay restricciones de edad para este protocolo.
• Los pacientes con recaída también detectada en el SNC pueden ser tratados con este protocolo. Sin embargo, si se administra quimioterapia intratecal, las células T no deben administrarse hasta al menos 24 horas después.

Criterio de exclusión:

• Pacientes con enfermedad de injerto contra huésped (GVHD) aguda activa (grado 2-4), GVHD crónica o una enfermedad autoinmune manifiesta (p. anemia hemolítica) que requieren altas dosis de glucocorticosteroides (> 0,5 mg/kg/día de prednisona o su equivalente) como tratamiento.
• Pacientes con otras afecciones no relacionadas con la recaída leucémica (p. enfermedad venooclusiva o infección fúngica invasiva, viral o bacteriana no controlada) que también son potencialmente mortales y que impedirían la evaluación de los efectos de una infusión de células T.
• Pacientes que están embarazadas.

Elegibilidad de los donantes para la donación de linfocitos sanguíneos para la generación de células T específicas de WT-1 derivadas de donantes.

Los criterios de elegibilidad para que el donante de sangre se utilice para generar células T sensibilizadas con el péptido WT1 son:

• El donante de linfocitos T específicos de WT-1 será el mismo donante que proporcionó el trasplante de células madre hematopoyéticas (TPH) del paciente. Estos donantes normales serán evaluados en busca de evidencia de sensibilización previa al EBV por serología de EBV. Si el donante es seropositivo y los linfocitos T del donante se sensibilizan con los linfocitos B transformados con EBV cargados con el péptido WT-1 del donante, también se generarán linfocitos T específicos para EBV a partir de donantes seropositivos que generan linfocitos T específicos para WT-1, y sus el crecimiento y la persistencia después de la transferencia se compararán con los de las células T específicas de WT 1.
• Dado que el donante ya se habrá sometido a una evaluación exhaustiva de su salud para determinar la elegibilidad para donar el HSCT del paciente, la reevaluación para esta donación de sangre se limitará a un historial clínico, un examen físico y análisis de sangre para asegurarse contra cualquier condición nueva. que, en opinión del médico del donante, impiden que el donante done la sangre requerida.
• Las nuevas condiciones de salud que excluirían a un donante de trasplante de una segunda donación de sangre son limitadas, pero incluyen:
• Nueva aparición de una infección por VIH
• Otra infección no controlada que podría transmitirse al paciente a través de las células sanguíneas y colocaría al paciente en un riesgo significativamente mayor de morbilidad grave o muerte.
• Anemia significativa con Hgb < o igual a 10 gm/dl, persistente desde el momento de la donación original del trasplante.
• Antecedentes de infarto de miocardio o accidente cerebrovascular desde el momento de la donación de HSCT que podrían aumentar el riesgo de donación de sangre. Se informará a un posible donante sobre los propósitos de este estudio y sus requisitos. Si él / ella da su consentimiento, se le pedirá al donante que proporcione dos muestras de sangre.
• Una donación inicial de 25ml de sangre anticoagulada con heparina o ACD. Esta sangre se usa para establecer una línea de células B transfundida transformada con las cepas de laboratorio B95.8 de EBV. Esta línea de células B EBV+/ (EBVBLCL) se utilizará como célula presentadora de antígeno. Cuando se carga con el grupo de pentadecapéptidos WT-1, el EBVBLCL sensibiliza de manera eficiente las células T de los mismos donantes contra WT-1 y EBV.

Debido a que el establecimiento y la prueba de una línea de células B transformadas con EBV adecuada para su uso como célula presentadora de antígenos requiere de 4 a 5 semanas de cultivo in vitro, es importante que esta muestra se obtenga lo antes posible para pacientes con riesgo de recaída leucémica. , ya que la recaída de la enfermedad ocurre con mayor frecuencia de 2 a 6 meses después del trasplante. En consecuencia, esta muestra de sangre debe obtenerse del donante antes de la donación del trasplante de células progenitoras hematopoyéticas siempre que sea posible.

• Una donación de una sola leucaféresis estándar de 2 volúmenes de sangre recolectada en anticoagulante ACD estándar. Si es imposible recolectar una leucaféresis de algunos de los donantes, el AICTF (Instalación de Terapia de Células Inmunes Adoptivas que fabrica los productos celulares de grado clínico bajo condiciones GMP en MSKCC) aceptará una unidad de sangre completa para la generación de un número limitado de células T Esta sangre es necesaria para el aislamiento de las células T que se van a sensibilizar con el conjunto de 15-meros de WT-1 cargados en células dendríticas autólogas o EBVBLCL autólogas y propagadas in vitro. Además, se requiere proporcionar células alimentadoras autólogas esenciales para mantener el crecimiento de células T sin el riesgo de estimular el crecimiento de células T alorreactivas capaces de inducir GVHD.
• Esta donación de una leucaféresis o una unidad de sangre se obtendrá de donantes de HSCT no emparentados al menos 2 semanas después de la donación de un HSCT, pero tan pronto como sea posible.

Además de dar su consentimiento por escrito para estas donaciones de sangre con el fin de generar células T específicas de WT-1 para su uso potencial en el tratamiento de leucemia recurrente o enfermedad residual persistente que se desarrolla en el paciente para quien el donante proporcionó un HSCT, se informará a cada donante y se le pedirá que dé su consentimiento por separado para cada una de las siguientes aplicaciones potenciales de las células sanguíneas donadas:

• El uso de una fracción de las células aisladas para generar células T inmunes específicas para virus, como el virus de Epstein-Barr (EBV) y el citomegalovirus (CMV), que pueden causar infecciones letales o linfomas en los receptores de trasplantes. Dichos linfocitos T podrían usarse, bajo protocolos separados, para tratar enfermedades asociadas con EBV (IRB 95-024) y/o para tratar infecciones por CMV (IRB 05-065) en el paciente que recibe el trasplante de células progenitoras hematopoyéticas del donante.

Aceptar esta solicitud limitará la cantidad de donaciones de sangre que se requerirán de cualquier donante, ya que los glóbulos blancos donados en una leucoaféresis deberían proporcionar suficientes células para desarrollar células T inmunes contra WT-1, EBV y CMV.

La donación de células T inmunitarias específicas para EBV o CMV generadas por el donante que no son utilizadas ni requeridas por el paciente para el que estaban destinadas originalmente a un banco de células inmunitarias que se iniciarán y mantendrán criopreservadas en condiciones GMP en el Centro de Terapia de Células Inmunes Adoptivas en MSKCC, para uso potencial en el tratamiento de otros pacientes con linfomas EBV o infecciones por citomegalovirus que expresan alelos HLA compartidos por el donante.