Prova di escalation della dose di cellule T sensibilizzate a WT1 per leucemia residua o recidivante dopo trapianto di cellule progenitrici emopoietiche allogeniche

Criterio di inclusione:

• Prima di ricevere il trattamento, alcuni pazienti possono sottoporsi a test diagnostici e/o di altro tipo sui loro tumori maligni WT1 per determinare se è probabile che la loro malattia risponda al trattamento con cellule T specifiche WT1. In alternativa, possono essere richiesti campioni di sangue per i test di ricerca per accertare che le cellule T specifiche per WT1 non contengano cellule che potrebbero reagire contro il paziente. Questi pazienti firmeranno un consenso pre-trattamento separato. Se viene determinato che un paziente si qualificherà e potrebbe beneficiare delle infusioni di CTL WT1, firmerà il consenso al trattamento standard per MSKCC IRB # 07-055 e sarà arruolato e trattato in prova, se tutti gli altri criteri di idoneità i criteri sono soddisfatti.
• I pazienti eleggibili per questo studio includeranno pazienti con una diagnosi patologicamente confermata di leucemia o sindrome mielodisplastica (MDS) che, a seguito di un trapianto allogenico di cellule ematopoietiche, hanno recidivato di leucemia come dimostrato morfologicamente su striscio di sangue periferico o aspirato di midollo osseo, o hanno recidiva persistente malattia residua minima come dimostrato da almeno 2 test sequenziali separati da almeno 1 settimana che dimostrino evidenza molecolare di leucemia residua o MDS mediante FISH o citogenetica. Inoltre, i pazienti che devono ricevere un trapianto allogenico di cellule ematopoietiche come trattamento per una leucemia o una sindrome mielodisplastica che ha un rischio atteso di recidiva dopo il trapianto di> 30% saranno idonei a ricevere cellule T specifiche del peptide WT1 derivate da donatore generate prima al o al momento del trapianto per l'uso immediato dopo il trapianto in un momento tale che il paziente abbia una malattia residua minima o una ricaduta. Ciò include i pazienti con LMA o LLA refrattaria alla terapia di induzione primaria o in qualsiasi stadio successivo alla prima recidiva per LMA o LLA, LMC in una fase cronica secondaria, malattia accelerata o dopo trattamento per crisi blastica o stadi RAEB o RAEBT di MDS che non hanno risposto o si sono ripresentate dopo la terapia di induzione. Inoltre, i blasti leucemici o MDS del paziente devono essere documentati per esprimere la proteina WT1 rilevabile dall'analisi immunoistopatologica di biopsie midollari diagnostiche incluse in paraffina, ottenute alla diagnosi di recidiva o essere di un tipo noto per esprimere comunemente WT1 ad alta frequenza. L'espressione di WT1 sarà valutata mediante una modifica della tecnica di Dupont e Soslow (36) e graduata secondo un adattamento del German Immunoreactive Score (IRS) che è il prodotto dei punteggi parziali per l'intensità dell'immunoreattività (0-3+) e distribuzione dell'immunoreattività (0-4+). Per questo studio, i blasti leucemici con punteggi IRS di 4-12 saranno considerati positivi.
• Una diagnosi patologicamente confermata di leucemia o MDS.
• Pazienti che hanno già ricevuto un trapianto allogenico di cellule ematopoietiche e hanno una recidiva documentata di leucemia o MDS o hanno una malattia residua minima persistente ricorrente come documentato da almeno 2 test sequenziali, separati da 1 settimana, che dimostrano evidenza molecolare di leucemia o MDS mediante FISH , citogenetica o immunocitometria fluorescente.
• I pazienti che devono ricevere un trapianto allogenico di cellule ematopoietiche come trattamento per una leucemia o sindrome mielodisplastica che presenta un rischio atteso di recidiva superiore al 30% saranno idonei a ricevere cellule T sensibilizzate al peptide WT1 derivate da donatore generate prima o al momento del trapianto per l'uso immediato dopo il trapianto in un momento tale che il paziente abbia una malattia residua minima o una ricaduta. Ciò include i pazienti con:
• LLA, AML o MDS refrattari alla terapia di induzione primaria
• LLA o LMA in qualsiasi stadio successivo alla 1° ricaduta
• LMC in fase cronica di 2° o superiore dopo chemioterapia
• LMC in fase accelerata persistente o crisi blastica
• MDS ad alto rischio (RAEB e RAEB+) che non ha risposto o si è ripresentato dopo la chemioterapia di induzione
• I blasti leucemici o MDS dei pazienti devono esprimere la proteina WT1 rilevabile mediante analisi immunoistopatologiche, oppure; se non è disponibile un campione adeguato per il test, deve avere una forma di leucemia (ALL, AML diversa da M5) o MDS (2° MDS, RAEB, RAEBT) nota per sovraesprimere WT1 in un'alta percentuale di casi (>60 %). Per i pazienti che sviluppano una recidiva documentata di leucemia o MDS dopo il trapianto, gli aspirati midollari devono essere valutati per la proporzione di blasti che esprimono WT1 mediante immunoistologia o FACS quando possibile.
• Il donatore di trapianto di cellule ematopoietiche del paziente deve acconsentire a una leucaferesi di 2 volumi o donazioni di sangue intero ottenute in una flebotomia per un totale di circa 250 ml da cui verranno generate le cellule T specifiche WT-1 da utilizzare per il trasferimento adottivo
• Punteggio KPS o Lansky > o uguale a 40
• Adeguata funzionalità midollare, renale ed epatica al momento del trattamento con cellule T specifiche per WT1:
• Conta assoluta dei neutrofili (ANC) > o uguale a 1000/mm3, con o senza supporto G-CSF.

Questo requisito può essere revocato se il paziente ha una ricaduta ematologica della malattia o se il paziente non ha ancora recuperato i conteggi dalla chemioterapia.

• Piastrine > o uguali a 20.000/mm3. Questo requisito può essere revocato se il paziente ha una ricaduta ematologica della malattia o se il paziente non ha ancora recuperato i conteggi dalla chemioterapia.
• Creatinina < o uguale a 2,0 mg/dL
• ALT, AST <3,0 e bilirubina totale <2,5 x l'ULN istituzionale
• Non ci sono limiti di età per questo protocollo.
• I pazienti con recidiva rilevata anche nel sistema nervoso centrale possono essere trattati con questo protocollo. Tuttavia, se viene somministrata la chemioterapia intratecale, le cellule T non devono essere somministrate fino ad almeno 24 ore successive.

Criteri di esclusione:

• Pazienti con malattia del trapianto contro l'ospite (GVHD) acuta attiva (grado 2-4), GVHD cronica o una malattia autoimmune conclamata (ad es. anemia emolitica) che richiedono alte dosi di glucocorticosteroidi (>0,5 mg/kg/giorno di prednisone o suo equivalente) come trattamento.
• Pazienti con altre condizioni non correlate alla recidiva leucemica (ad es. malattia veno-occlusiva o infezione batterica, virale o fungina invasiva incontrollata) che sono anche pericolose per la vita e che precluderebbero la valutazione degli effetti di un'infusione di cellule T.
• Pazienti in gravidanza.

Idoneità del donatore per la donazione di linfociti del sangue per la generazione di cellule T specifiche per WT-1 derivate da donatore.

I criteri di ammissibilità per il donatore di sangue da utilizzare per generare cellule T sensibilizzate al peptide WT1 sono:

• Il donatore di linfociti T. specifici per WT-1 sarà lo stesso donatore che ha fornito il trapianto di cellule staminali ematopoietiche (HSCT) del paziente. Questi donatori normali saranno valutati per evidenza di precedente sensibilizzazione all'EBV mediante sierologia EBV. Se il donatore è sieropositivo e le cellule T del donatore sono sensibilizzate con le cellule B trasformate da EBV caricate con peptide WT-1 del donatore, le cellule T specifiche per EBV saranno generate anche da donatori sieropositivi che generano cellule T specifiche per WT-1 e le loro la crescita e la persistenza post trasferimento saranno confrontate con quelle delle cellule T specifiche di WT 1.
• Poiché il donatore sarà già stato sottoposto a un'ampia valutazione della sua salute per accertare l'idoneità alla donazione del trapianto del paziente, la rivalutazione per questa donazione di sangue sarà limitata a una storia clinica, un esame fisico e esami del sangue per assicurare contro qualsiasi nuova condizione che, a parere del medico del donatore, precludono al donatore di donare il sangue richiesto.
• Le nuove condizioni di salute che escluderebbero un donatore di trapianti da una seconda donazione di sangue sono limitate, ma includono:
• Nuova insorgenza di un'infezione da HIV
• Altre infezioni incontrollate che potrebbero essere trasmesse al paziente dalle cellule del sangue e esporrebbe il paziente a un significativo aumento del rischio di grave morbilità o morte.
• Anemia significativa con Hgb < o uguale a 10 gm/dl, persistente dal momento della donazione originale del trapianto.
• Storia di infarto miocardico o ictus dal momento della donazione HSCT che potrebbe aumentare il rischio di donazione di sangue. Un potenziale donatore sarà informato degli scopi di questo studio e dei suoi requisiti. Se acconsente, al donatore verrà richiesto di fornire due prelievi di sangue.
• Una donazione iniziale di 25 ml di sangue anticoagulato con eparina o ACD. Questo sangue viene utilizzato per stabilire una linea cellulare B trasfusa trasformata con i ceppi di laboratorio B95.8 di EBV. Questa linea cellulare EBV+ B/ (EBVBLCL) verrà utilizzata come cellula presentante l'antigene. Quando viene caricato con il pool di pentadecapeptidi WT-1, l'EBVBLCL sensibilizza efficacemente le cellule T degli stessi donatori contro WT-1 e EBV.

Poiché la creazione e il test di una linea cellulare B trasformata da EBV adatta all'uso come cellula presentante l'antigene richiedono 4-5 settimane di coltura in vitro, è importante che questo campione sia ottenuto il prima possibile per i pazienti a rischio di recidiva leucemica , poiché la recidiva della malattia si verifica più frequentemente 2-6 mesi dopo il trapianto. Di conseguenza, questo campione di sangue dovrebbe essere ottenuto dal donatore prima della donazione del trapianto di cellule progenitrici emopoietiche, ove possibile.

• Una donazione di una singola leucaferesi del volume sanguigno standard 2 raccolta in anticoagulante ACD standard. Se è impossibile raccogliere una leucaferesi da alcuni dei donatori, un'unità di sangue intero sarà accettata dall'AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility che produce i prodotti cellulari di grado clinico in condizioni GMP in MSKCC) per la generazione di un numero limitato di Cellule T. Questo sangue è necessario per l'isolamento delle cellule T da sensibilizzare con il pool di WT-1 15-meri caricato su cellule dendritiche autologhe o EBVBLCL autologo e propagato in vitro. Inoltre, è necessario fornire cellule feeder autologhe essenziali per sostenere la crescita delle cellule T senza il rischio di stimolare la crescita delle cellule T alloreattive in grado di indurre la GVHD.
• Questa donazione di una leucaferesi o di un'unità di sangue sarà ottenuta da donatori di HSCT non imparentati almeno 2 settimane dopo la loro donazione di un HSCT, ma subito dopo il più possibile.

Oltre a fornire il consenso scritto a queste donazioni di sangue allo scopo di generare cellule T specifiche per WT-1 per un potenziale uso nel trattamento della leucemia ricorrente o della malattia residua persistente che si sviluppa nel paziente per il quale il donatore ha fornito un HSCT, ciascun donatore sarà informato e gli verrà chiesto di fornire un consenso separato a ciascuna delle seguenti potenziali applicazioni delle cellule del sangue donate:

• L'uso di una frazione delle cellule isolate per generare cellule T immunitarie specifiche per virus, come il virus di Epstein-Barr (EBV) e il citomegalovirus (CMV), che possono causare infezioni letali o linfomi nei riceventi di trapianto. Tali cellule T potrebbero quindi essere utilizzate, in protocolli separati, per trattare le malattie associate a EBV (IRB 95-024) e/o per trattare le infezioni da CMV (IRB 05-065) nel paziente che riceve il trapianto di cellule progenitrici emopoietiche del donatore.

Il consenso a questa domanda limiterà il numero di donazioni di sangue che sarebbero richieste a qualsiasi donatore, poiché i globuli bianchi donati in una leucaferesi dovrebbero fornire cellule sufficienti per far crescere cellule T immunitarie contro WT-1, EBV e CMV.

La donazione di cellule T immunitarie specifiche per EBV o CMV generate dal donatore che non sono utilizzate o richieste dal paziente per il quale erano originariamente destinate a una banca di cellule immunitarie che saranno avviate e mantenute criopreservate in condizioni GMP nel Adoptive Immune Cell Therapy Facility presso MSKCC, per un potenziale utilizzo nel trattamento di altri pazienti con linfomi EBV o infezioni da citomegalovirus che esprimono alleli HLA condivisi dal donatore.