Doseskaleringsförsök med WT1-sensibiliserade T-celler för återstående eller återfallande leukemi efter allogen hematopoetisk stamcellstransplantation

Inklusionskriterier:

• Innan de får behandling kan vissa patienter genomgå diagnostiska och/eller andra tester av sina WT1-maligniteter för att avgöra om deras sjukdom sannolikt kommer att svara på behandling med WT1-specifika T-celler. Alternativt kan blodprov krävas för forskningstester för att fastställa att de WT1-specifika T-cellerna inte innehåller några celler som skulle kunna reagera mot patienten. Dessa patienter kommer att underteckna ett separat samtycke före behandling. Om det fastställs att en patient kommer att kvalificera sig för och kan ha nytta av infusioner av WT1 CTL, kommer han/hon att fortsätta med att underteckna standardbehandlingstillståndet för MSKCC IRB # 07-055 och bli inskriven och behandlad på prov, om alla andra kvalificerade kriterierna är uppfyllda.
• Patienter som är kvalificerade för denna studie kommer att inkludera patienter med en patologiskt bekräftad diagnos av leukemi eller myelodysplastiskt syndrom (MDS) som, efter en allogen hematopoetisk celltransplantation, har återfallit med leukemi som morfologiskt påvisats på perifert blodutstryk eller benmärgsaspirat, eller har återkommande ihållande. minimal kvarvarande sjukdom som påvisats av minst 2 sekventiella tester åtskilda av minst 1 vecka som visar molekylära tecken på kvarvarande leukemi eller MDS av FISH eller cytogenetik. Dessutom kommer patienter som ska få en allogen hematopoetisk celltransplantation som behandling för en leukemi eller myelodysplastiskt syndrom som har en förväntad risk för återfall efter transplantation på >30 % att vara berättigade att få donatorhärledda WT1-peptidspecifika T-celler genererade tidigare till eller vid tidpunkten för transplantation för omedelbar användning efter transplantation vid sådan tidpunkt att patienten visar sig ha minimal kvarvarande sjukdom eller återfall. Detta inkluderar patienter med AML eller ALL som antingen är motståndskraftiga mot primär induktionsterapi eller som i något skede är senare än första återfall för AML eller ALL, KML i en sekundär kronisk fas, accelererad sjukdom eller efter behandling för blastkris eller RAEB- eller RAEBT-stadier av MDS som inte har svarat på eller återkommit efter induktionsbehandling. Dessutom bör patientens leukemi- eller MDS-blaster dokumenteras för att uttrycka WT1-proteinet som kan detekteras genom immunhistopatologisk analys av diagnostiska paraffininbäddade märgbiopsier, erhållna vid diagnos av återfall eller vara av en typ som vanligtvis uttrycker WT1 vid hög frekvens. Uttryck av WT1 kommer att bedömas genom en modifiering av Dupont och Soslows (36) teknik och graderas enligt en anpassning av den tyska immunoreaktiva poängen (IRS) som är produkten av subpoäng för intensiteten av immunreaktivitet (0-3+) och distribution av immunreaktivitet (0-4+). För denna studie kommer leukemiblaster med IRS-poäng på 4-12 att anses vara positiva.
• En patologiskt bekräftad diagnos av leukemi eller MDS.
• Patienter som redan har fått en allogen hematopoetisk celltransplantation och har antingen ett dokumenterat återfall av leukemi eller MDS eller har återkommande ihållande minimal kvarvarande sjukdom som dokumenterats genom minst 2 sekventiella tester, separerade med 1 vecka, som visar molekylära tecken på leukemi eller MDS av FISH cytogenetik eller fluorescerande immunocytometri.
• Patienter som ska få en allogen hematopoetisk celltransplantation som behandling för en leukemi eller myelodysplastiskt syndrom som har en förväntad risk för återfall som överstiger 30 % kommer att vara berättigade att få donatorhärledda WT1-peptidsensibiliserade T-celler genererade före eller vid tidpunkten för transplantationen för omedelbar användning efter transplantation vid sådan tidpunkt att patienten visar sig ha minimal kvarvarande sjukdom eller återfall. Detta inkluderar patienter med:
• ALL, AML eller MDS motståndskraftig mot primär induktionsterapi
• ALL eller AML vid något stadium senare än 1° återfall
• KML i 2° eller högre kronisk fas efter kemoterapi
• KML i ihållande accelererad fas eller blast kris
• Högrisk MDS (RAEB och RAEB+) som inte har svarat eller har återkommit efter induktionskemoterapi
• Patienternas leukemi- eller MDS-blaster måste uttrycka WT1-proteinet som kan detekteras genom immunhistopatologisk analys, eller; om ett adekvat prov inte är tillgängligt för testning, måste , ha en form av leukemi (ALL, andra AML än M5) eller MDS (2° MDS, RAEB, RAEBT) känd för att överuttrycka WT1 i en hög andel av fallen (>60) %). För patienter som utvecklar ett dokumenterat återfall av leukemi eller MDS efter transplantation, bör märgspirater utvärderas för andelen blaster som uttrycker WT1 genom immunhistologi eller FACS när så är möjligt.
• Patientens donator för hematopoetiska celltransplantationer måste ge sitt samtycke till en 2-volyms leukaferes eller helblodsdonationer som erhålls vid en flebotomi, vilken totalt kommer att uppgå till cirka 250 ml från vilken de WT-1-specifika T-cellerna som ska användas för adoptivöverföring kommer att genereras
• KPS eller Lansky poäng > eller lika med 40
• Tillräcklig benmärgs-, njur- och leverfunktion vid tidpunkten för behandling med WT1-specifika T-celler:
• Absolut neutrofilantal (ANC) > eller lika med 1000/mm3, med eller utan G-CSF-stöd.

Detta krav kan frångås om patienten har hematologiskt återfall av sjukdomen eller om patienten ännu inte har återhämtat sig från kemoterapi.

• Blodplättar > eller lika med 20 000/mm3. Detta krav kan frångås om patienten har hematologiskt återfall av sjukdomen eller om patienten ännu inte har återhämtat sig från kemoterapi.
• Kreatinin < än eller lika med 2,0 mg/dL
• ALAT, ASAT <3,0 och total bilirubin alla < 2,5 x institutionell ULN
• Det finns inga åldersbegränsningar för detta protokoll.
• Patienter med återfall som också detekteras i CNS kan behandlas med detta protokoll. Men om intratekal kemoterapi administreras, bör T-celler inte administreras förrän minst 24 timmar därefter.

Exklusions kriterier:

• Patienter med aktiv (grad 2-4) akut transplantat- vs. värdsjukdom (GVHD), kronisk GVHD eller en uppenbar autoimmun sjukdom (t.ex. hemolytisk anemi) som kräver höga doser av glukokortikosteroid (>0,5 mg/kg/dag prednison eller motsvarande) som behandling.
• Patienter med andra tillstånd som inte är relaterade till leukemiska återfall (t. veno-ocklusiv sjukdom eller okontrollerad bakteriell, viral eller invasiv svampinfektion) som också är livshotande och som skulle utesluta utvärdering av effekterna av en T-cellsinfusion.
• Patienter som är gravida.

Donator berättigar till donation av blodlymfocyter för generering av donatorhärledda WT-1-specifika T-celler.

Behörighetskriterierna för blodgivaren som ska användas för att generera WT1-peptidsensibiliserade T-celler är:

• Donatorn av WT-1-specifika T. lymfocyter kommer att vara samma givare som tillhandahöll patientens hematopoetiska stamcellstransplantation (HSCT). Dessa normala donatorer kommer att utvärderas för bevis på tidigare sensibilisering för EBV genom EBV-serologi. Om donatorn är seropositiv och donatorns T-celler sensibiliseras med donatorns WT-1-peptidladdade EBV-transformerade B-celler, kommer EBV-specifika T-celler också att genereras från seropositiva donatorer som genererar WT-1-specifika T-celler, och deras tillväxt och persistens efter överföring kommer att jämföras med den för WT 1-specifika T-celler.
• Eftersom givaren redan kommer att ha genomgått en omfattande utvärdering av sin hälsa för att fastställa berättigande till att donera patientens HSCT, kommer omvärderingen för denna blodgivning att begränsas till en klinisk historia, fysisk undersökning och blodprov för att försäkra sig mot alla nya tillstånd som enligt givarens läkares uppfattning hindrar givaren från att ge erforderligt blod.
• Nya hälsotillstånd som skulle utesluta en transplantationsgivare från en andra blodgivning är begränsade, men inkluderar:
• Nystart av en HIV-infektion
• Annan okontrollerad infektion som skulle kunna överföras till patienten av blodkroppar och skulle utsätta patienten för en signifikant ökad risk för allvarlig sjuklighet eller död.
• Signifikant anemi med Hgb < än eller lika med 10 gm/dl, kvarstående sedan tidpunkten för den ursprungliga transplantationsdonationen.
• Historik av hjärtinfarkt eller stroke sedan tidpunkten för HSCT-donation, vilket kan öka risken för bloddonation. En perspektivgivare kommer att informeras om syftet med denna studie och dess krav. Om han/hon samtycker kommer givaren att uppmanas att lämna två blodprover.
• En första donation av 25 ml blod antikoagulerat med heparin eller ACD. Detta blod används för att etablera en B-cellinje transfunderad transformerad med B95.8-laboratoriestammarna av EBV. Denna EBV+ B-cellinje/(EBVBLCL) kommer att användas som en antigenpresenterande cell. När den laddas med poolen av WT-1-pentadekapeptider sensibiliserar EBVBLCL effektivt T-celler från samma donatorer mot WT-1 såväl som EBV.

Eftersom etablering och testning av en EBV-transformerad B-cellinje lämplig för användning som en antigenpresenterande cell kräver 4-5 veckors in vitro-odling, är det viktigt att detta prov erhålls så tidigt som möjligt för patienter med risk för leukemiåterfall , eftersom sjukdomsåterfall oftast inträffar 2-6 månader efter transplantation. Följaktligen bör detta blodprov tas från givaren före donation av det hematopoetiska progenitorcellstransplantatet närhelst det är möjligt.

• En donation av antingen en enkel standard 2-blodvolym leukaferes uppsamlad i standard ACD-antikoagulant. Om det är omöjligt att samla in en leukaferes från några av donatorerna, kommer en enhet helblod att accepteras av AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility som tillverkar cellprodukterna av klinisk kvalitet under GMP-förhållanden i MSKCC) för generering av ett begränsat antal T-celler. Detta blod krävs för isolering av T-cellerna för att sensibiliseras med poolen av WT-1 15-merer laddade på autologa dendritiska celler eller autologa EBVBLCL, och förökas in vitro. Dessutom krävs det att tillhandahålla autologa matarceller som är nödvändiga för att upprätthålla T-celltillväxt utan risk för att stimulera tillväxten av alloreaktiva T-celler som kan inducera GVHD.
• Denna donation av en leukaferes eller en blodenhet kommer att erhållas från obesläktade HSCT-givare minst 2 veckor efter deras donation av en HSCT, men så snart som möjligt.

Förutom att ge skriftligt samtycke till dessa donationer av blod i syfte att generera WT-1-specifika T-celler för potentiell användning vid behandling av återkommande leukemi eller ihållande kvarvarande sjukdom som utvecklas hos patienten för vilken givaren har tillhandahållit en HSCT, varje givare kommer att informeras om och ombeds ge separat samtycke till var och en av följande potentiella tillämpningar av de donerade blodkropparna:

• Användningen av en bråkdel av cellerna isolerade för att generera immun-T-celler specifika för virus, såsom Epstein-Barr-virus (EBV) och cytomegalovirus (CMV), som kan orsaka dödliga infektioner eller lymfom hos transplanterade mottagare. Sådana T-celler kan sedan användas, enligt separata protokoll, för att behandla EBV-associerade sjukdomar (IRB 95-024) och/eller för att behandla CMV-infektioner (IRB 05-065) hos patienten som får donatorns hematopoetiska stamcellstransplantation.

Att samtycka till denna ansökan kommer att begränsa antalet bloddonationer som skulle krävas av en donator, eftersom de vita blodkropparna som doneras i en leukaferes bör ge tillräckligt med celler för att växa immuna T-celler mot WT-1, EBV och CMV.

Donation av immuna T-celler specifika för EBV eller CMV genererade från givaren som inte används för eller krävs av patienten för vilken de ursprungligen var avsedda till en bank av immunceller som kommer att startas och bibehållas kryokonserverad under GMP-förhållanden i Adoptive Immune Cell Therapy Facility vid MSKCC, för potentiell användning vid behandling av andra patienter med EBV-lymfom eller cytomegalovirusinfektioner som uttrycker HLA-alleler som delas av givaren.