KRAS 野生型转移性结直肠癌试验

转移性结直肠癌患者的寿命更长，并且由于抗病性而没有治疗选择。 表皮生长因子受体 (EGFR) 已被验证为结直肠癌 (CRC) 的治疗靶点。 与 EGFR 结合的配体激活 RAS/RAF/MAPK、STAT 和 PI3K/AKT 信号通路，它们共同调节细胞增殖、粘附、迁移和存活。 抗 EGFR 靶向抗体西妥昔单抗和帕尼单抗在 CRC 中作为单一疗法给药已分别显示出大约 9% 和 17% 的反应率（Amado 等人，2008 年；Saltz 等人，2004 年）。 单药帕尼单抗已被批准用于结直肠癌的三线治疗，并显示出比支持性治疗更能改善无进展生存期。 进一步的子集分析显示 17% 的反应率仅限于 KRAS 野生型肿瘤患者，该组（约占所有 CRC 患者的 60-70%）应考虑进一步研究（Amado 等人，2008）。 根据 Huntsman 癌症医院登记处，结直肠癌患者是我们胃肠道癌症组中最大的疾病组，许多人已经或最终将在现有治疗中取得进展，或者对二线治疗的副作用（例如奥沙利铂神经病变或伊立替康引起的腹泻，但仍是治疗的候选者。

在实验室中，通过转化研究，我们希望确定参与已知对结直肠癌 (CRC) 重要的抑癌通路或参与 EGFR 信号通路的基因的重新表达或启动子甲基化减少。 我们将评估的候选基因将包括先前研究中描述的与 CpG 岛甲基化表型 (CIMP) 相关的基因，以及先前报道的与结直肠肿瘤相关的超甲基化基因。 这些将包括 APC、SFRP 家族成员、CDH-1（e-钙粘蛋白）和 p16（Belshaw 等人，2008 年；Lind 等人，2004 年；Suehiro 等人，2008 年）。 将评估的其他对 EGFR 或 KRAS 信号转导更特异的基因包括： RASSF1A 是一种肿瘤抑制基因，已知在包括 CRC 在内的几种人类癌症中被高度甲基化，偶尔与 KRAS 野生型相关，并且当被甲基化沉默时允许 RAS 激活（Kang等人，2006 年；奥利维拉等人，2005 年）； SOX17 是转录因子超家族的成员，已知在 CRC 中被高甲基化并导致 Wnt 信号传导中断（Zhang 等人，2008）； SOCS-1 是 STAT3 的负调节因子，是 EGFR 的激活配体，已被证明会被超甲基化沉默，并允许通过 EGFR 进行组成型信号传导（Lee 等人，2006 年）；和 PTEN，一种通过去磷酸化磷酸肌醇来拮抗 PI3K-AKT/PKB 信号通路的肿瘤抑制因子（Noro 等人，2007）。 根据初步数据和正在进行的研究，可能会发现或添加更多候选基因。 甲基化分析和基因表达模式的改变将使用甲基化特异性 PCR 和已知参与 EGFR 信号通路和结肠直肠肿瘤的基因的亚硫酸氢盐测序来完成，如上所述。 我们有来自我们自己和其他工作的先前数据表明使用低甲基化剂可以使结肠癌细胞对治疗剂重新敏感（Karpf 等人，1999 年；Morita 等人，2006 年）。 截至 2008 年 7 月 1 日，这项研究的翻译部分将得到授予 PI Kimberly Jones 的机构翻译资助的支持。 这些信息可能有助于确定其他重要目标，并允许设计更好的联合疗法。 我们计划在患者接受治疗时对每周的血液和口腔样本、从帕尼单抗相关皮疹中擦拭的上皮细胞以及可用时的存档或活检肿瘤标本（来自 KRAS 测试（必需）和可选的治疗结束）进行这些检测活检）。

地西他滨的药代动力学特征已得到很好的描述，并提供了几种可行的临床实践给药方案以及与其他药物联合使用的方案。 地西他滨目前正在与标准细胞毒性药物联合进行测试。 它在实体瘤中显示出一些活性，但是，骨髓抑制是一种常见的副作用，尤其是在与其他骨髓抑制疗法（卡铂）同时使用时（Appleton 等人，2007 年；Plimack 等人，2007 年）。 我们提出了一项新的研究，将地西他滨与非骨髓抑制性靶向生物制剂联合使用，并按顺序而不是同时给予，以尝试通过在去甲基化窗口期间给药来最大化第二种药物的作用。 在 Appleton 等人报告的剂量探索研究中，他们建议每 28 天 6 小时内使用 90 mg/m2 的剂量，但在将其与卡铂联合使用时剂量高达 135 mg/m2（Appleton 等人， 2007）。 根据本研究报告的安全性和生物学等效性，我们选择了每 14 天 45 mg/m2 地西他滨的剂量。 3 名患者输注 45 mg/m2 地西他滨后输注 5 AUC 卡铂，未观察到 3 级或 4 级血液学毒性； 4 名输注 45 mg/m2 地西他滨，随后输注 6 AUC 卡铂的患者出现 1 次 3 级白细胞减少症和 1 次 3 级中性粒细胞减少症（Appleton 等人，2007 年）。 在 13 名患者中，在 90 mg/m2 和 5 AUC 卡铂的较高剂量下，观察到 5 次 4 级白细胞减少或中性粒细胞减少；在 90 mg/m2 和 6 AUC 卡铂的 10 名患者中，有 4 次 4 级白细胞减少或中性粒细胞减少。 建议的超过 2 小时的输注不应产生任何输注速率毒性，并且将是患者能够耐受的时间表。 用于血液病的每日低剂量输注可能有效，但每日静脉化疗显着影响患者的生活质量。 地西他滨还具有 30 分钟的消除半衰期，因此会迅速清除体内。 所提议的地西他滨在 28 天内以一半剂量给药两次，其耐受性应优于 90 mg/m2 联合卡铂。 作为地西他滨主要毒性的骨髓抑制毒性应该不太显着，因为它不像卡铂那样与第二种骨髓抑制剂联合使用。 低剂量地西他滨 (45 mg/m2) 在血液和口腔细胞中的低甲基化作用几乎与 90 mg/m2 相当。 更频繁的给药（每 2 周与每 4 周）应该在较低剂量下保持低甲基化作用。 此外，我们提出了一种新的给药方案，其中我们的第二种药物帕尼单抗将每隔几周给药一次，并在 EGFR 通路因先前的地西他滨治疗而低甲基化时靶向 EGFR 通路。 我们和其他人的工作表明，在治疗开始后 8-14 天观察到特异性启动子低甲基化，并且基因组 DNA 在治疗开始后 28 到 35 天恢复到基线水平（Appleton 等人，2007 年； Samlowski 等人，2005 年，Kantarjian，2007 #23）。

我们还将评估临床反应和无进展生存期 (PFS)，并将其与接受帕尼单抗单药治疗的患者的历史对照进行比较。 如果可以安全地给予组合并且观察到等于或优于单药帕尼单抗数据的反应，我们将计划进行多中心更大规模的 II 期试验。