KRAS-villin tyypin metastaattisen kolorektaalisyöpäkoe

Metastaattista paksusuolensyöpää sairastavat potilaat elävät pidempään, ja hoitovaihtoehdot ovat loppumassa taudin vastustuskyvyn vuoksi. Epidermaalinen kasvutekijäreseptori (EGFR) on validoitu terapeuttiseksi kohteeksi paksusuolensyövän (CRC) hoidossa. Ligandin sitoutuminen EGFR:ään aktivoi RAS/RAF/MAPK-, STAT- ja PI3K/AKT-signalointireittejä, jotka yhdessä moduloivat solujen lisääntymistä, adheesiota, migraatiota ja eloonjäämistä. Anti-EGFR-kohdennettujen vasta-aineiden setuksimabi ja panitumumabi monoterapiana annettuna CRC:ssä ovat osoittaneet vasteprosentteina noin 9 % ja 17 % (Amado et al., 2008; Saltz et al., 2004). Yksittäinen panitumumabi on hyväksytty käytettäväksi kolmannen linjan paksusuolensyövän hoidossa, ja sen on osoitettu parantavan etenemisvapaata eloonjäämistä tukihoitoon verrattuna. Lisäosaryhmäanalyysi osoitti, että 17 %:n vasteprosentti rajoittui potilaisiin, joilla oli villityypin KRAS-kasvaimia, ja että tätä ryhmää (noin 60–70 % kaikista CRC-potilaista) tulisi harkita lisätutkimuksessa (Amado et al., 2008). Huntsman Cancer Hospital -rekisterin mukaan paksusuolensyöpäpotilaat ovat suurin sairausryhmä maha-suolikanavan syöpäryhmässämme, ja monilla on tai lopulta etenee saatavilla oleva hoito tai he ovat tai tulevat sietämään toisen linjan hoitojen sivuvaikutuksia, kuten oksaliplatiinineuropatiaa tai irinotekaanin aiheuttamaa ripulia, mutta ovat silti ehdokkaita hoitoon.

Laboratoriossa translaatiotutkimusten avulla toivomme voivamme tunnistaa sellaisten geenien uudelleen ilmentymisen tai promoottorimetylaation vähenemisen, jotka osallistuvat kasvainsuppressorireitteihin, joiden tiedetään olevan tärkeitä paksusuolensyövässä (CRC) tai jotka osallistuvat EGFR-signalointireittiin. Ehdokasgeeneihin, joita arvioimme, ovat geenit, jotka on kuvattu aikaisemmissa tutkimuksissa CpG-saarimetylaattorifenotyyppiin (CIMP) liittyviksi, sekä geenit, joiden on aiemmin raportoitu hypermetyloituneen kolorektaalisen neoplasian yhteydessä. Näitä ovat APC, SFRP-perheen jäsenet, CDH-1 (e-kadheriini) ja p16 (Belshaw et ai., 2008; Lind ym., 2004; Suehiro et al., 2008). Muita arvioitavia geenejä, jotka ovat spesifisempiä EGFR- tai KRAS-signalointiin ovat: RASSF1A, kasvainsuppressorigeeni, jonka tiedetään olevan hypermetyloitunut useissa ihmisen syövissä, mukaan lukien CRC, liittyy toisinaan villityyppiin KRAS ja metylaatiolla hiljennettynä mahdollistaa RAS-aktivoinnin (Kang). et ai., 2006; Oliveira et ai., 2005); SOX17, transkriptiotekijöiden superperheen jäsen, jonka tiedetään olevan hypermetyloitunut CRC:ssä ja johtavan häiriintyneeseen Wnt-signalointiin (Zhang et al., 2008); SOCS-1, STAT3:n negatiivinen säätelijä, EGFR:ää aktivoiva ligandi, jonka on osoitettu vaimentaneen hypermetylaatiolla ja mahdollistavan konstitutiivisen signaloinnin EGFR:n kautta (Lee et al., 2006); ja PTEN, kasvainsuppressori, joka antagonisoi PI3K-AKT/PKB-signalointireittiä defosforyloimalla fosfoinositideja (Noro et al., 2007). Muita ehdokasgeenejä voidaan löytää tai lisätä alustavien tietojen ja meneillään olevan tutkimuksen perusteella. Metylaatioanalyysi ja geenien ilmentymiskuvion muutokset tehdään käyttämällä metylaatiospesifistä PCR:ää ja bisulfiittisekvensointia geeneille, joiden tiedetään osallistuvan EGFR-signalointireitteihin ja kolorektaaliseen neoplasiaan, kuten edellä on kuvattu. Meillä on aikaisempaa tietoa omasta työstämme ja muista, jotka viittaavat siihen, että hypometyloivan aineen käyttö voi herkistää paksusuolen syöpäsoluja terapeuttisille aineille (Karpf et al., 1999; Morita et al., 2006). Tämän tutkimuksen translaatiokomponenttia tuetaan institutionaalisella translaatioapurahalla, joka myönnetään PI:lle, Kimberly Jonesille, 1. heinäkuuta 2008 alkaen. Nämä tiedot voivat auttaa tunnistamaan muita tärkeitä kohteita ja mahdollistaa parempien yhdistelmähoitojen suunnittelun. Aiomme tehdä nämä määritykset viikoittaisista verinäytteistä ja poskinäytteistä potilaiden ollessa terapiassa, epiteelisoluille, jotka on otettu panitumumabiin liittyvästä ihottumasta, ja arkistoiduista tai biopsiasta otetuista kasvainnäytteistä, kun niitä on saatavilla (KRAS-testistä (pakollinen) ja valinnaisesta hoidon lopusta). biopsia).

Desitabiinin farmakokineettinen profiili on kuvattu hyvin, ja se tarjoaa useita mahdollisia annostusohjelmia, jotka ovat mahdollisia kliinisessä käytännössä ja yhdistelmässä muiden aineiden kanssa. Desitabiinia testataan parhaillaan yhdessä tavallisten sytotoksisten aineiden kanssa. Se on osoittanut jonkin verran aktiivisuutta kiinteissä kasvaimissa, mutta myelosuppressio on kuitenkin yleinen sivuvaikutus, varsinkin kun sitä annetaan samanaikaisesti muun myelosuppressiivisen hoidon (karboplatiini) kanssa (Appleton et al., 2007; Plimack et al., 2007). Ehdotamme uutta tutkimusta, jossa desitabiinia käytetään yhdessä ei-myelosuppressiivisen kohdennetun biologisen aineen kanssa sekä sen antamista peräkkäin eikä samanaikaisesti yrittääksemme maksimoida toisen lääkkeen vaikutuksen annostelemalla sitä demetylaatioikkunan aikana. Appletonin ym. raportoimassa annoksenmääritystutkimuksessa he suosittelivat 90 mg/m2 annosta 6 tunnin aikana 28 päivän välein, mutta nousivat jopa 135 mg/m2 ja yhdistivät tämän karboplatiiniin (Appleton et al., 2007). Olemme valinneet annoksen 45 mg/m2 desitabiinia 14 päivän välein perustuen sen raportoituun turvallisuuteen ja biologiseen vastaavuuteen tässä tutkimuksessa. Asteen 3 tai 4 hematologista toksisuutta ei havaittu, kun 3 potilasta sai infuusiona 45 mg/m2 desitabiinia ja sen jälkeen 5 AUC karboplatiinia; oli 1 asteen 3 leukopenia ja 1 asteen 3 neutropenia 4 potilaalla, joille infusoitiin 45 mg/m2 desitabiinia ja sen jälkeen 6 AUC karboplatiinia (Appleton et al., 2007). Suuremmalla annoksella 90 mg/m2 ja 5 AUC-karboplatiinia 13 potilaalla havaittiin 5 asteen 4 leukopeniaa tai neutropeniaa; 10 potilaalla, joilla oli 90 mg/m2 ja 6 AUC karboplatiinia, todettiin 4 asteen 4 leukopeniaa tai neutropeniaa. Ehdotettu 2 tunnin infuusio ei saa aiheuttaa infuusionopeuden toksisuutta, ja se on aikataulu, jonka potilaat sietävät. Hematologisissa sairauksissa käytettävät päivittäiset pienemmän annoksen infuusiot saattavat olla tehokkaita, mutta päivittäinen suonensisäinen kemoterapia vaikuttaa merkittävästi potilaan elämänlaatuun. Desitabiinin eliminaation puoliintumisaika on myös 30 minuuttia, joten se puhdistaa kehon nopeasti. Desitabiinin ehdotettu antaminen kahdesti, puolet annoksesta, 28 vuorokauden aikana tulisi sietää paremmin kuin 90 mg/m2 yhdistettynä karboplatiiniin. Myelosuppressiivisen toksisuuden, joka on desitabiinin pääasiallinen toksisuus, pitäisi olla vähemmän merkittävä, koska sitä ei yhdistetä toisen myelosuppressiivisen aineen kanssa, kuten se oli karboplatiinin kanssa. Pienen desitabiiniannoksen (45 mg/m2) hypometylointivaikutus on lähes sama kuin 90 mg/m2 sekä veressä että poskisoluissa. Useamman annostelun (2 viikon välein vs. 4 viikon välein) pitäisi säilyttää hypometyloiva vaikutus pienemmällä annoksella. Lisäksi ehdotamme uutta annostusaikataulua, jossa toista ainettamme, panitumumabia, annetaan vuorotellen viikkoina ja se kohdistuu EGFR-reittiin, kun se on hypometyloitunut aikaisemmasta desitabiinihoidosta. Työmme sekä muut ovat osoittaneet, että spesifistä promoottorin hypometylaatiota havaitaan 8–14 päivää hoidon aloittamisen jälkeen ja genominen DNA palaa lähtötasolle 28–35 päivää hoidon aloittamisen jälkeen (Appleton et al., 2007; Samlowski et ai., 2005, Kantarjian, 2007 #23).

Arvioimme myös kliinistä vastetta ja etenemisvapaata eloonjäämistä (PFS) ja vertaamme sitä panitumumabimonoterapiaa saaneiden potilaiden historiallisiin kontrolleihin. Jos yhdistelmä voidaan antaa turvallisesti ja nähdään vasteet, jotka ovat yhtä suuria tai parempia kuin yksittäisen aineen panitumumabitiedot, suunnittelemme useamman keskuksen laajemman vaiheen II tutkimuksen.