非小细胞肺癌患者预测和预后标志物的研究

1. 建立既往非小细胞肺癌 (NSCLC) 病例的临床、组织病理学、治疗和随访（临床病理）数据的回顾性汇编。
2. 建立具有相应血液和组织样本的NSCLC患者临床病理信息的前瞻性收集
3. 发现和验证 NSCLC 生存和治疗结果的分子生物标志物

目前肺癌治疗的难点之一是治疗决策和治疗类型的选择。 因此，需要额外的肺癌预后（指示疾病侵袭性）和预测（指示对治疗的可能反应）标志物。 要进行成功的预后和预测标记程序，需要几个因素，包括：一个综合数据库，链接每个病例的临床、组织病理学、治疗和结果特征，与数据库链接的样本集合，适用于测试候选标记，以及肺癌管理方面的多学科、跨部门的专业知识。

目标 1：

将对病例记录进行审查，以提取临床、治疗和随访数据

目标 2：

应征得 21 岁或以上新诊断、未经治疗的非小细胞肺癌患者的同意。 患者将通过病理记录和研究调查人员的诊所进行识别。 经受试者同意后，将获得基线特征。 将获得关于接受的治疗和遇到的毒性的后续数据。 肿瘤样本将仅从接受手术的 NSCLC 患者中获取，作为常规临床护理的一部分。 手术标本将被送往病理科，以按照惯例验证诊断样本的充分性。 将在基线（或任何抗癌治疗之前）收集血液，并在复发或疾病进展时再次取样。 采集需要将 7 毫升血液抽取到 Vacutainer CPT 管（Becton Dickinson，美国）中，离心，提取分离的单核细胞层 (MNC)，标记，然后在 -80oC 以下储存。 抽血的频率约为 1-5 次（总共 7-35 毫升）。 次数取决于肺癌是否复发和晚期，治疗后肺癌复发的频率。 CSIS 将提取 DNA 和 RNA，并将其储存在冷冻室中。 储存的样本将用于研究预后和预测结果的标志物，以及发现新的分子改变

目标 3：

肿瘤和血液的生物标志物分析。 将使用先前优化的方法 (11) 为循环肿瘤细胞 (CTC) 富集血液，并将使用 Tri-Reagent（分子研究中心，俄亥俄州辛辛那提）从 CTC 和肿瘤中提取 DNA。 将从肿瘤、CTC 和单核细胞中提取 DNA，并通过测序检测体细胞肺突变 (2)。 将分析种系 DNA 中与 NSCLC 遗传风险相关的基因，以及与 NSCLC 化疗代谢途径相关的治疗毒性基因。

组织微阵列 (TMA) 是一种高通量方法，可以以最低的成本和工作量分析大量福尔马林固定、石蜡包埋的肿瘤。 为了分析与 EGFR 功能、细胞增殖、血管生成、细胞凋亡、转移和激素假定相关的蛋白质的表达，将使用 TMA。 还将分析 PTEN 和 C/EBPa。