Um estudo de marcadores preditivos e prognósticos em pacientes com câncer de pulmão de células não pequenas

1. Estabelecer uma compilação retrospectiva de dados clínicos, histopatológicos, de tratamento e acompanhamento (clínico patológico) de casos anteriores de câncer de pulmão de não pequenas células (CPNPC).
2. Estabelecer uma coleção prospectiva de informações patológicas clínicas de pacientes com NSCLC com amostras de sangue e tecido correspondentes
3. Descobrir e validar biomarcadores moleculares de sobrevivência e resultado do tratamento em NSCLC

Uma das dificuldades atuais no manejo do câncer de pulmão é a decisão de tratar e o tipo de tratamento a ser selecionado. Assim, há necessidade de marcadores prognósticos (indicativos de agressividade da doença) e preditivos (indicativos de provável resposta ao tratamento) adicionais para o câncer de pulmão. Para conduzir um programa de marcadores prognósticos e preditivos de sucesso, vários fatores são necessários, incluindo: um banco de dados abrangente que vincule características clínicas, histopatológicas, de tratamento e resultados de cada caso, uma coleção de amostras vinculadas ao banco de dados que seja adequada para o teste de marcadores candidatos , e um nível de especialização multidisciplinar e interdepartamental no manejo do câncer de pulmão.

Objetivo 1:

Uma revisão dos registros de casos será realizada para extrair dados clínicos, de tratamento e acompanhamento

Objetivo 2:

Pacientes com 21 anos ou mais com câncer de pulmão de não pequenas células recém-diagnosticado e não tratado devem ser abordados para consentimento. Os pacientes serão identificados através dos registros de patologia e da clínica dos investigadores do estudo. Após o consentimento do sujeito, as características basais serão obtidas. Dados de acompanhamento sobre terapias recebidas e toxicidades encontradas serão obtidos. Amostras de tumor serão obtidas apenas de pacientes com NSCLC submetidos a cirurgia como parte do atendimento clínico de rotina. A peça cirúrgica será enviada à Patologia para verificar a adequação da amostra diagnóstica conforme prática usual. O sangue será coletado na linha de base (ou antes de qualquer tratamento anti-câncer) e será amostrado novamente no momento da recaída ou progressão da doença. A coleta envolverá a coleta de 7ml de sangue em um tubo Vacutainer CPT (Becton Dickinson, EUA), centrifugação, extração de uma camada separada de células mononucleares (MNC), rotulagem seguida de armazenamento abaixo de -80oC. A frequência da coleta de sangue será de cerca de 1 a 5 vezes (7 a 35 ml no total). O número de vezes depende se o câncer de pulmão recidivou e, no estágio avançado, quantas vezes o câncer de pulmão recidivou após o tratamento. O DNA e o RNA serão extraídos pelo CSIS e armazenados em um freezer. Amostras armazenadas serão usadas para investigação de marcadores prognósticos e preditivos de resultado e para descoberta de novas alterações moleculares

Objetivo 3:

Análise de biomarcadores de tumor e sangue. O sangue será enriquecido para células tumorais circulantes (CTC) usando métodos previamente otimizados (11) e o DNA será extraído de CTC e tumor usando o Tri-Reagent (Molecular Research Center, Cincinatti, OH). O DNA será extraído de tumor, CTC e células mononucleadas e testado para mutações pulmonares somáticas por sequenciamento (2). O DNA da linhagem germinativa será analisado para genes ligados ao risco genético para NSCLC e, para toxicidades de tratamento, para genes relacionados às vias metabólicas da quimioterapia do NSCLC.

O Tissue Microarray (TMA) é um método de alto rendimento para analisar grandes números de tumores fixados em formalina e embebidos em parafina a um custo e esforço mínimos. Para analisar a expressão de proteínas de relevância putativa para a função EGFR, proliferação celular, angiogênese, apoptose, metástase e hormonal, TMA será utilizado. PTEN e C/EBPa também serão analisados.