Eine Studie über prädiktive und prognostische Marker bei Patienten mit nichtkleinzelligem Lungenkrebs

1. Erstellung einer retrospektiven Zusammenstellung klinischer, histopathologischer, Behandlungs- und Follow-up-Daten (klinisch-pathologischer) früherer Fälle von nicht-kleinzelligem Lungenkrebs (NSCLC).
2. Ziel ist es, eine prospektive Sammlung klinischer pathologischer Informationen von NSCLC-Patienten mit entsprechenden Blut- und Gewebeproben zu erstellen
3. Ermittlung und Validierung molekularer Biomarker für Überleben und Behandlungsergebnis bei NSCLC

Eine der aktuellen Schwierigkeiten bei der Behandlung von Lungenkrebs ist die Entscheidung für die Behandlung und die Art der Behandlung. Daher besteht Bedarf an zusätzlichen prognostischen (Hinweis auf die Aggressivität der Krankheit) und prädiktiven (Hinweis auf das wahrscheinliche Ansprechen auf die Behandlung) Markern für Lungenkrebs. Um ein erfolgreiches prognostisches und prädiktives Markerprogramm durchzuführen, sind mehrere Faktoren erforderlich, darunter: eine umfassende Datenbank, die klinische, histopathologische, Behandlungs- und Ergebnismerkmale jedes einzelnen Falles verknüpft, eine mit der Datenbank verknüpfte Probensammlung, die zum Testen möglicher Marker geeignet ist und ein multidisziplinäres, abteilungsübergreifendes Fachwissen in der Behandlung von Lungenkrebs.

Ziel 1:

Es wird eine Überprüfung der Fallakten durchgeführt, um klinische, Behandlungs- und Nachsorgedaten zu extrahieren

Ziel 2:

Patienten ab 21 Jahren mit neu diagnostiziertem, unbehandeltem nicht-kleinzelligem Lungenkrebs müssen um ihre Einwilligung gebeten werden. Die Patienten werden anhand der Pathologieaufzeichnungen und von der Klinik des Studienprüfers identifiziert. Nach Zustimmung des Probanden werden Basismerkmale ermittelt. Es werden Folgedaten zu den erhaltenen Therapien und den aufgetretenen Toxizitäten erhoben. Tumorproben werden nur von Patienten mit NSCLC entnommen, die sich im Rahmen der routinemäßigen klinischen Versorgung einer Operation unterziehen. Die chirurgische Probe wird an die Pathologie geschickt, um die Eignung der diagnostischen Probe gemäß der üblichen Praxis zu überprüfen. Zu Beginn (oder vor einer Krebsbehandlung) wird Blut entnommen und zum Zeitpunkt eines Rückfalls oder Fortschreitens der Krankheit erneut entnommen. Zur Sammlung werden 7 ml Blut in ein Vacutainer-CPT-Röhrchen (Becton Dickinson, USA) entnommen, zentrifugiert, eine abgetrennte Schicht mononukleärer Zellen (MNC) extrahiert, markiert und anschließend bei einer Temperatur von -80 °C gelagert. Die Häufigkeit der Blutentnahme beträgt etwa 1–5 Mal (insgesamt 7–35 ml). Die Häufigkeit hängt davon ab, ob der Lungenkrebs erneut auftritt und im fortgeschrittenen Stadium, wie oft der Lungenkrebs nach der Behandlung erneut auftritt. DNA und RNA werden von CSIS extrahiert und dort im Gefrierraum gelagert. Gespeicherte Proben werden zur Untersuchung prognostischer und prädiktiver Ergebnismarker und zur Entdeckung neuer molekularer Veränderungen verwendet

Ziel 3:

Biomarker-Analyse von Tumor und Blut. Das Blut wird mit zuvor optimierten Methoden (11) für zirkulierende Tumorzellen (CTC) angereichert und die DNA wird mit dem Tri-Reagent (Molecular Research Center, Cincinatti, OH) aus CTC und Tumor extrahiert. DNA wird aus Tumor-, CTC- und mononukleären Zellen extrahiert und durch Sequenzierung auf somatische Lungenmutationen getestet (2). Die Keimbahn-DNA wird auf Gene analysiert, die mit dem genetischen Risiko für NSCLC in Zusammenhang stehen, und im Hinblick auf Behandlungstoxizitäten auf Gene, die mit den Stoffwechselwegen der NSCLC-Chemotherapie in Zusammenhang stehen.

Tissue Microarray (TMA) ist eine Hochdurchsatzmethode zur Analyse einer großen Anzahl formalinfixierter, in Paraffin eingebetteter Tumore mit minimalem Kosten- und Aufwand. Um die Expression von Proteinen zu analysieren, die vermutlich für die EGFR-Funktion, Zellproliferation, Angiogenese, Apoptose, Metastasierung und Hormone relevant sind, wird TMA eingesetzt. PTEN und C/EBPa werden ebenfalls analysiert.