Uno studio sui marcatori predittivi e prognostici nei pazienti con carcinoma polmonare non a piccole cellule

1. Stabilire una raccolta retrospettiva di dati clinici, istopatologici, di trattamento e di follow-up (patologici clinici) di precedenti casi di carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC).
2. Stabilire una raccolta prospettica di informazioni patologiche cliniche da pazienti con NSCLC con corrispondenti campioni di sangue e tessuto
3. Scoprire e convalidare i biomarcatori molecolari della sopravvivenza e dell'esito del trattamento nel NSCLC

Una delle attuali difficoltà nella gestione del cancro del polmone è la decisione di trattare e il tipo di trattamento da selezionare. Pertanto, vi è la necessità di ulteriori marcatori prognostici (indicativi dell'aggressività della malattia) e predittivi (indicativi della probabile risposta al trattamento) per il cancro del polmone. Per condurre un programma di marcatori prognostici e predittivi di successo, sono necessari diversi fattori, tra cui: un database completo che colleghi le caratteristiche cliniche, istopatologiche, di trattamento e di esito di ciascun caso, una raccolta di campioni collegati al database che sia adatto per il test dei marcatori candidati e un livello di competenza multidisciplinare e interdipartimentale nella gestione del cancro del polmone.

Obiettivo 1:

Verrà condotta una revisione delle cartelle cliniche per estrarre i dati clinici, di trattamento e di follow-up

Obiettivo 2:

I pazienti di età pari o superiore a 21 anni con carcinoma polmonare non a piccole cellule di nuova diagnosi e non trattato devono essere contattati per il consenso. I pazienti saranno identificati attraverso i registri patologici e dalla clinica dei ricercatori dello studio. Dopo il consenso del soggetto, saranno ottenute le caratteristiche di base. Saranno ottenuti dati di follow-up sulle terapie ricevute e sulle tossicità riscontrate. I campioni di tumore saranno ottenuti solo da pazienti con NSCLC sottoposti a intervento chirurgico come parte delle cure cliniche di routine. Il campione chirurgico verrà inviato all'Anatomia Patologica per verificare l'adeguatezza del campione diagnostico come di consueto. Il sangue verrà raccolto al basale (o prima di qualsiasi trattamento antitumorale) e verrà nuovamente campionato al momento della recidiva o della progressione della malattia. La raccolta comporterà il prelievo di 7 ml di sangue in una provetta Vacutainer CPT (Becton Dickinson, USA), la centrifugazione, l'estrazione di uno strato separato di cellule mononucleate (MNC), l'etichettatura seguita dalla conservazione a una temperatura inferiore a -80°C. La frequenza del prelievo di sangue sarà di circa 1-5 volte (7-35 ml in totale). Il numero di volte dipende dalla recidiva del cancro del polmone e, nella fase avanzata, dalla frequenza con cui il cancro del polmone recidiva dopo il trattamento. Il DNA e l'RNA saranno estratti dal CSIS e conservati in uno spazio congelatore lì. I campioni conservati saranno utilizzati per l'indagine di marcatori prognostici e predittivi di esito e per la scoperta di nuove alterazioni molecolari

Obiettivo 3:

Analisi dei biomarcatori del tumore e del sangue. Il sangue sarà arricchito per le cellule tumorali circolanti (CTC) utilizzando metodi precedentemente ottimizzati (11) e il DNA sarà estratto da CTC e tumore utilizzando il Tri-Reagent (Molecular Research Center, Cincinatti, OH). Il DNA sarà estratto da cellule tumorali, CTC e mononucleate e testato per mutazioni polmonari somatiche mediante sequenziamento (2). Il DNA della linea germinale sarà analizzato per i geni legati al rischio genetico per il NSCLC e, per la tossicità del trattamento, per i geni legati alle vie metaboliche della chemioterapia del NSCLC.

Il microarray tissutale (TMA) è un metodo ad alto rendimento per l'analisi di un gran numero di tumori fissati in formalina e inclusi in paraffina con un costo e uno sforzo minimi. Per analizzare l'espressione di proteine ​​di presunta rilevanza per la funzione dell'EGFR, la proliferazione cellulare, l'angiogenesi, l'apoptosi, le metastasi e gli ormoni, verrà utilizzata la TMA. Verranno inoltre analizzati PTEN e C/EBPa.