Een studie van voorspellende en prognostische markers bij patiënten met niet-kleincellige longkanker

1. Een retrospectieve compilatie maken van klinische, histopathologische, behandelings- en follow-upgegevens (klinisch pathologisch) van eerdere gevallen van niet-kleincellige longkanker (NSCLC).
2. Het opzetten van een prospectieve verzameling van klinische pathologische informatie van NSCLC-patiënten met overeenkomstige bloed- en weefselmonsters
3. Het ontdekken en valideren van moleculaire biomarkers van overleving en behandelingsresultaat bij NSCLC

Een van de huidige problemen bij de behandeling van longkanker is de beslissing om te behandelen en het type behandeling dat moet worden gekozen. Er is dus behoefte aan aanvullende prognostische (indicatief voor agressiviteit van de ziekte) en voorspellende (indicatief voor waarschijnlijke respons op behandeling) markers voor longkanker. Om een ​​succesvol programma voor prognostische en voorspellende markers uit te voeren, zijn verschillende factoren vereist, waaronder: een uitgebreide database die de klinische, histopathologische, behandelings- en uitkomstkenmerken van elk geval koppelt, een verzameling monsters gekoppeld aan de database die geschikt is voor het testen van kandidaat-markers en een multidisciplinair, interdepartementaal niveau van expertise in de behandeling van longkanker.

Doelstelling 1:

Er zal een beoordeling van de dossiers worden uitgevoerd om klinische, behandelings- en follow-upgegevens te extraheren

Doelstelling 2:

Patiënten van 21 jaar of ouder met nieuw gediagnosticeerde, onbehandelde niet-kleincellige longkanker zullen om toestemming worden gevraagd. Patiënten zullen worden geïdentificeerd via de pathologiedossiers en vanuit de onderzoekskliniek van het onderzoek. Na toestemming van de proefpersoon worden basiskenmerken verkregen. Follow-upgegevens over ontvangen therapieën en aangetroffen toxiciteiten zullen worden verkregen. Tumormonsters worden alleen verkregen van patiënten met NSCLC die een operatie ondergaan als onderdeel van routinematige klinische zorg. Het chirurgische monster zal naar Pathologie worden gestuurd om de geschiktheid van het diagnostische monster te verifiëren, zoals gebruikelijk is. Bloed zal worden verzameld bij de basislijn (of voorafgaand aan een antikankerbehandeling) en zal opnieuw worden bemonsterd op het moment van terugval of ziekteprogressie. Verzameling omvat het afnemen van 7 ml bloed in een Vacutainer CPT-buis (Becton Dickinson, VS), centrifugatie, extractie van een gescheiden laag mononucleaire cellen (MNC), labelen gevolgd door opslag beneden -80oC. De frequentie van bloedafname zal ongeveer 1-5 keer zijn (7-35 ml totaal). Het aantal keren hangt af van het feit of de longkanker terugvalt en in het gevorderde stadium, hoe vaak de longkanker terugvalt na de behandeling. DNA en RNA worden door CSIS geëxtraheerd en daar in een vriesruimte opgeslagen. Opgeslagen monsters zullen worden gebruikt voor onderzoek naar prognostische en voorspellende uitkomstmarkers en voor de ontdekking van nieuwe moleculaire veranderingen

Doelstelling 3:

Biomarkeranalyse van tumor en bloed. Bloed zal worden verrijkt voor circulerende tumorcellen (CTC) met behulp van eerder geoptimaliseerde methoden (11) en DNA zal worden geëxtraheerd uit CTC en tumor met behulp van de Tri-Reagent (Molecular Research Center, Cincinatti, OH). DNA zal worden geëxtraheerd uit tumor-, CTC- en mononucleaire cellen en getest op somatische longmutaties door sequencing (2). Kiemlijn-DNA zal worden geanalyseerd op genen die verband houden met genetisch risico voor NSCLC en, voor behandelingstoxiciteit, op genen die verband houden met NSCLC-chemotherapiemetabole routes.

Tissue microarray (TMA) is een high-throughput-methode voor het analyseren van grote aantallen formaline-gefixeerde, in paraffine ingebedde tumoren tegen minimale kosten en moeite. Om de expressie te analyseren van eiwitten die vermoedelijk relevant zijn voor de EGFR-functie, celproliferatie, angiogenese, apoptose, metastase en hormonaal, zal TMA worden gebruikt. Ook PTEN en C/EBPa worden geanalyseerd.