同种异体多病毒 - 定向细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL)

病毒感染通常由 T 细胞免疫控制，因此是造血干细胞移植 (HSCT) 后免疫恢复期间发病率和死亡率的重要原因。 1 感染风险受供体和供体之间组织不匹配程度的影响受体和供体的免疫状态，包括移植后免疫抑制的程度和持续时间。 巨细胞病毒 (CMV) 和 Epstein-Barr 病毒 (EBV) 等潜伏病毒的再激活很常见，通常会引起症状性疾病。 腺病毒等呼吸道病毒也常引起感染。 抗病毒药物仅对其中一些病毒有效；它们的使用成本高昂，并且与显着的毒性和耐药突变体的产生有关。 由于病毒特异性细胞免疫反应的恢复延迟显然与这些患者的病毒再激活和疾病相关，因此恢复病毒特异性免疫的细胞免疫疗法是一种有吸引力的选择，已成功用于针对其中一些病毒。

多病毒特异性 T 细胞

为了扩大单个 CTL 系的特异性以包括干细胞受体的三种最常见的病毒病原体，研究人员通过使用用编码 CMV 抗原 pp65 (Ad5f35CMVpp65) 的重组腺病毒载体转导的单核细胞重新激活 CMV 和腺病毒特异性 T 细胞。 随后用相同载体转导的 EBV-LCL 进行的刺激既能重新激活 EBV 特异性 T 细胞，又能维持活化的腺病毒和 CMV 特异性 T 细胞的扩增。 这种方法可靠地产生了对所有三种病毒具有细胞毒性功能的 CTL，研究人员在 I 期预防研究中将其注入 14 名干细胞受体。 他们观察到所有患者对 CMV 和 EBV 的免疫力都恢复了，但仅在输注前有腺病毒感染证据的患者中才观察到腺病毒特异性 T 细胞的增加。 一项后续研究显示，注入的 CTL 中腺病毒特异性 T 细胞的频率增加，产生了类似的结果，从而突出了内源性抗原促进注入的 T 细胞在体内扩增的重要性。 尽管如此，在输注前 CMV、腺病毒或 EBV 感染或再激活的两项临床试验中，所有患者都能够清除感染，包括一名需要通气支持的严重腺病毒肺炎患者。 因此，识别多种抗原的 CTL 可以对所有三种病毒产生临床相关的效果。

用于 HSCT 患者的 CTLs 与病毒天真捐助者

迄今为止讨论的所有供体特异性 T 细胞策略都使用了来自对感兴趣的病毒呈血清反应阳性的供体的产品。 随着脐带血 (CB) 移植物的使用越来越多，有相当多的患者接受了未感染过病毒的供体移植物。 CMV 再激活通常由内源性病毒引起，血清反应呈阳性的接受者和血清反应呈阴性的供体仍然是发生 CMV 的最高风险人群。 从脐带血移植物的接受者发展多病毒特异性 T 细胞需要启动幼稚 T 细胞，而不是简单地扩增来自血清阳性供体的预先存在的记忆 T 细胞。 在存在 IL-7、12 和 15 的情况下，使用使用自体 CB 衍生树突细胞和 Ad5f35CMVpp65 载体转导的 EBV-LCL 刺激 CB 衍生 T 细胞的方案，多病毒特异性 T 细胞可以在体外从 20脐带血单位的百分比。 到目前为止，已有 8 名患者在 CBT 后接受了 CTL 作为预防或治疗，且无毒性。 没有观察到与输液相关的毒性/GvHD，尽管只接受了 80% 的 CB 单位，但所有患者都在 30 天内移植了中性粒细胞。 疗效的早期证据也已得到证实，两名患者清除了 EBV、CMV 和腺病毒，三分之一患者的 EBV 病毒载量降低，另外 5 名患者保持无病毒。 因此，这些结果表明，在 CBT 后将幼稚 T 细胞 (CB) 衍生的病毒特异性 T 细胞转移给患者可能是安全的，并有助于在体内长期重建病毒特异性 T 细胞。